[目的]探究諾考達(dá)唑和阿非科林聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人胚胎干細(xì)胞周期同步化到G1和S期的作用并觀察藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和生物功能的影響。[方法]采用諾考達(dá)唑和阿非科林先后作用于胚胎干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期,顯微鏡下觀察藥物對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響,熒光染色技術(shù)觀察胚層標(biāo)志物α-SMA和β-tubulin表達(dá)。[結(jié)果]加入諾考達(dá)唑和阿非科林后,G1期為66.35%,S期為33.52%,多數(shù)細(xì)胞被同步化在G1期;諾考達(dá)唑作用16 h,G1期為18.45%,S期為79.10%,多數(shù)細(xì)胞從周期抑制中恢復(fù);能夠形成典型的擬胚體;熒光染色顯示α-SMA和β-tubulin均有表達(dá)。[結(jié)論]諾考達(dá)唑和阿非科林聯(lián)合作用能夠使胚胎干細(xì)胞66.35%同步化在G1期,諾考達(dá)唑作用16 h,79.10%的細(xì)胞同步化在S期。中胚層標(biāo)志物α-平滑肌肌動(dòng)蛋白和外胚層標(biāo)志物β微管蛋白在蛋白水平均有明顯表達(dá)。去除藥物后,細(xì)胞未發(fā)生顯著性損傷。 

【文章來(lái)源】：生物技術(shù). 2015年06期 北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1. 1 材料
        1. 1. 1 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 1. 2 試劑
        1. 1. 3 儀器
        1. 1. 4 培養(yǎng)基
    1. 2 方法
        1. 2. 1 人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)
        1. 2. 2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞的分離培養(yǎng)
        1. 2. 3 實(shí)驗(yàn)分組與給藥方案
        1. 2. 4碘化丙錠（ PI） 染色流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞周期測(cè)定
        1. 2. 5 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
        1. 2. 6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果與分析
    2. 1 諾考達(dá)唑和阿非科林對(duì)人胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)的影響
    2. 2 諾考達(dá)唑和阿非科林聯(lián)合作用對(duì)人胚胎干細(xì)胞存活的影響
    2. 3 諾考達(dá)唑和阿非科林聯(lián)合作用對(duì)人胚胎干細(xì)胞周期同步化的影響
    2. 4 撤除藥物后細(xì)胞擬胚體的形成
    2. 5 撤除藥物后細(xì)胞擬胚體多向分化能力檢測(cè)
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào)：2919178