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BM-MSCs通過增強(qiáng)MDSCs免疫抑制功能治療小鼠實(shí)驗(yàn)性干燥綜合征的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 02:56
  目的:研究小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)對(duì)實(shí)驗(yàn)性干燥綜合征小鼠(experimental Sj?gren syndrome,ESS)疾病進(jìn)程的影響;探究BM-MSCs對(duì)髓源性抑制細(xì)胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。方法:(1)構(gòu)建ESS小鼠模型,于初次免疫后的第18天和第25天經(jīng)尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs至ESS小鼠,檢測(cè)小鼠唾液流速,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)小鼠血清中抗SG抗體,抗核抗體和抗M3R抗體的水平。流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)檢測(cè)小鼠脾臟及頸部淋巴結(jié)中Th1和Th17細(xì)胞的比例。(2)尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs于ESS小鼠,FCM檢測(cè)小鼠脾臟及頸部淋巴結(jié)中總MDSCs及其亞群多核細(xì)胞樣MDSCs(polymorphonuclear MDSCs,PMN-MDSCs)和單核細(xì)胞樣MDSCs(monocytic MDSCs,M-MDSCs)的比例。采用免疫磁珠法分選不同處理組ESS小鼠脾臟中的CD... 

【文章來源】:江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】:68 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

BM-MSCs通過增強(qiáng)MDSCs免疫抑制功能治療小鼠實(shí)驗(yàn)性干燥綜合征的實(shí)驗(yàn)研究


原發(fā)性干燥綜合征中涉及到的細(xì)胞和分子機(jī)制[8]

免疫調(diào)節(jié)


圖 1.3 MSCs 的免疫調(diào)節(jié)能力[91]Figure1.3 Immunomodulatory properties of mesenchymal stem cells[91]1.4 本實(shí)驗(yàn)的研究目的、方法、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及意義1.4.1 實(shí)驗(yàn)的研究目的前期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)隨著 ESS 疾病的發(fā)生發(fā)展,MDSCs 的免疫抑制功能逐漸喪失,進(jìn)而促進(jìn)疾病進(jìn)程。本研究初步探討 BM-MSCs 對(duì) ESS 小鼠中 MDSCs 的免疫抑制功能的調(diào)控及分子機(jī)制作用,為臨床干燥綜合征的治療提供新的策略。1.4.2 實(shí)驗(yàn)方法BM-MSCs 原代培養(yǎng)及純化、實(shí)驗(yàn)性干燥綜合征小鼠模型的構(gòu)建、流式細(xì)胞術(shù)、免疫磁珠分選法、逆轉(zhuǎn)錄 PCR、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR、轉(zhuǎn)染、CFSE 標(biāo)記的淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)等。

小鼠,過繼轉(zhuǎn)移,抗體,抗核抗體


江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文**: p<0.01, *: p<0.05)。2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.3.1 BM-MSCs 對(duì) ESS 小鼠疾病進(jìn)程的影響如圖 2.1A 所示,分別在第一次免疫后的第 18 天和第 25 天,通過尾靜脈過繼轉(zhuǎn)移BM-MSCs 至 ESS 小鼠體內(nèi),并觀察其對(duì) ESS 小鼠疾病進(jìn)程的影響。結(jié)果顯示,過繼轉(zhuǎn)移 BM-MSCs 至 ESS 小鼠后,小鼠的唾液流速明顯加快(圖 2.1B)(**p<0.01);多種與ESS 疾病進(jìn)程密切相關(guān)的自身抗體,包括抗 SG 抗體,抗核抗體和抗 M3R 抗體的水平顯著下降(圖 2.1C.D.E)(**p<0.01)。


本文編號(hào):2898737

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