肥胖是指可損害健康的異�；蜻^量脂肪積累,隨著生活水平的提高以及生活方式的改變,肥胖已經成為世界性的公共衛(wèi)生難題。研究表明肥胖不僅是一種代謝性異常疾病,還是2型糖尿病、非酒精性脂肪肝病、心血管疾病以及腫瘤等眾多疾病的重要危險因素�，F(xiàn)有治療肥胖的藥物大都存在毒副作用大及易反彈等缺點,因此,尋找一種安全有效的減肥活性物質是科研工作者的努力方向。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)殼聚糖具有良好的減肥降脂活性,但由于其水溶性差、不易吸收等缺點極大地限制了其開發(fā)利用。殼寡糖(Chitosan oligosaccharides,COS)作為殼聚糖的水解產物,來源廣泛價格低廉,其水溶性好、生物利用度高并且具有多種生物活性,在生物醫(yī)藥及保健食品領域有廣泛的應用前景。本課題以平均分子量小于等于1000 Da的COS(COST)為研究對象,首先對COST進行安全性毒理學評價,再將安全無毒的COST制備成顆粒劑(COST granules,COSTG),采用營養(yǎng)型肥胖大鼠模型評估COSTG的減肥活性以及對機體脂質代謝的影響,隨后以肝臟組織為研究對象,對其作用機制進行初步探討,為COSTG的進一步開發(fā)利用提供科學依據(jù)。為了評估COST的安全性,對其進行了系統(tǒng)的安全性毒理學研究。急性毒性試驗結果表明,COST對雌雄小鼠的最大耐受量均超過54g/kg·bw,按照急性毒物分級,屬于無毒級物質。采用Ames試驗、小鼠骨髓細胞微核試驗以及小鼠精子畸形試驗來評價COST的致突變作用,以上三項遺傳毒性試驗結果均為陰性,表明在試驗劑量范圍內COST沒有遺傳毒性作用。30天喂養(yǎng)試驗結果表明,COST對大鼠的最大未觀察到有害作用劑量在5.00 g/kg·bw以上,即為人體推薦劑量0.05 g/kg·bw的100倍以上。上述結果表明COST為無毒級物質,安全性高。按照最優(yōu)處方:5%聚維酮作為黏合劑,0.6%阿司帕坦作為矯味劑,無水乙醇作為潤濕劑,采用手工濕法制粒制備COSTG。制得的COSTG為淡黃褐色固體顆粒,色澤一致,無潮解、軟化、結塊現(xiàn)象,口味微甜,成型率為94.63%,含水量為6.28%,干燥失重為1.32%,溶化性檢查顆粒全部溶解,無渾濁現(xiàn)象,各指標均符合《中國藥典(2015年)》要求。方法學研究表明,采用苯酚硫酸法測定COSTG中COST含量的方法準確度、精密度以及穩(wěn)定性良好。COSTG中COST的含量測定平均值為92.13%,RSD為0.74%,符合設定要求。通過高脂飲食建立營養(yǎng)型肥胖大鼠模型,對COSTG的減肥活性及其在肥胖大鼠脂質代謝方面的影響進行了評價。研究發(fā)現(xiàn),COSTG在不影響攝食量的前提下,顯著減少肥胖大鼠的體重增重,有效抑制肥胖大鼠脂肪組織的肥大與增生,顯著降低肥胖大鼠的脂/體比,表現(xiàn)出良好的減肥活性,并呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。此外,在脂質代謝方面,COSTG能改善肥胖大鼠的血脂異常,主要表現(xiàn)為顯著減低血清中TC和TG含量;COSTG能顯著降低肥胖大鼠的肝重以及肝重指數(shù),抑制肥胖大鼠肝臟組織中脂質堆積,預防肝臟脂肪變性,主要表現(xiàn)為減少肝臟中TG含量;高劑量COSTG還能顯著增加TC和TG在糞便中的排泄量。為了進一步探究COSTG改善肥胖大鼠脂質代謝的分子機制,從內質網(wǎng)應激和脂質合成及分解代謝方面對其作用機制進行了探討。結果表明,COSTG一方面可下調肝臟中SREBP-1c、FAS以及PPARγ的轉錄,抑制脂質合成代謝;另一方面可上調肝臟中PPARα的轉錄,促進脂肪酸β-氧化分解代謝;另外還可以下調內質網(wǎng)應激反應通路中相關因子的轉錄,減輕肝臟內質網(wǎng)應激。COSTG可能通過上述三條途徑改善肥胖大鼠的脂質代謝紊亂。綜上,COST為無毒級物質,以其為主藥制備質量合格的COSTG。COSTG可顯著減少肥胖大鼠體重增重,糾正血脂紊亂,改善脂質代謝,在減肥降脂以及預防脂肪肝方面具有顯著活性。COSTG對肝臟脂質代謝的調節(jié)作用可能與抑制脂質合成、促進脂質氧化分解以及減輕內質網(wǎng)應激有關。本研究結果將為COSTG在減肥降脂和預防脂肪肝的保健產品的開發(fā)利用提供重要的理論支持。
【學位單位】：廣東藥科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R99
【部分圖文】：

肥胖患病率的進展圖

男性和女性的全球體重指數(shù)分布圖

廣東藥科大學碩士研究生學位論文（3）使用高脂飲食誘導建立營養(yǎng)型肥胖 SD 大鼠模型，對 COSTG 的減肥功能進行評價，并探討其對肥胖大鼠脂質代謝的影響。（4）采用 FQRT-PCR 技術對大鼠肝臟中的脂質代謝以及內質網(wǎng)應激相關基因進行檢測，初步探討 COSTG 改善肝臟脂質代謝的藥理機制。1.4.3 本課題的技術路線
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1 葉芷君;COST安全性毒理學評價及COSTG對肥胖大鼠脂質代謝的影響[D];廣東藥科大學;2019年

本文編號：2873501