目的：制備穿膜肽介導(dǎo)的輸送抗癌藥物阿霉素的納米給藥系統(tǒng)，探索其在逆轉(zhuǎn)腫瘤的多藥耐藥、及抑制耐藥腫瘤生長方面的作用。制備低分子量魚精蛋白（LMWP）修飾的PLGA納米粒，負(fù)載一線抗癌藥物阿霉素；并在體內(nèi)外評(píng)價(jià)這種納米載體在治療腫瘤多藥耐藥方面的作用。 方法：研究了LMWP應(yīng)用于藥物載體的優(yōu)勢(shì)，合成了烷基化的LMWP多肽，通過疏水作用力采用納米沉淀法制備LMWP修飾的PLGA納米粒（LMWP/PLGANP），負(fù)載阿霉素（LMWP/PLGA/Dox NP）。采用激光散射粒度儀對(duì)納米粒的粒徑及電位進(jìn)行分析；用透射電子顯微鏡（TEM）觀察納米粒形態(tài)及分布；用透析法測(cè)定納米粒的體外釋藥行為；使用熒光顯微鏡及流式細(xì)胞分析儀考察各實(shí)驗(yàn)組阿霉素的入胞能力；使用激光共聚焦顯微鏡分析各實(shí)驗(yàn)組阿霉素的入核能力；采用MTT法考察各實(shí)驗(yàn)組對(duì)敏感腫瘤細(xì)胞及耐藥腫瘤細(xì)胞的增殖抑制效果；采用nu/nu裸鼠耐藥乳腺癌模型考察LMWP/PLGA/Dox對(duì)多藥耐藥腫瘤的抑制效果及全身毒性。 結(jié)果：通過單因素法優(yōu)化制備了粒徑為200nm左右的LMWP/PLGA/DoxNP。納米粒Zeta電位為27mV左右，TEM顯示納米粒呈球狀，均勻分布。納米粒體外吸附蛋白（BSA）量較少，在血清中較穩(wěn)定，48h未發(fā)現(xiàn)顆粒粒徑變化。溶血實(shí)驗(yàn)證明了納米粒較好的生物相容性，可供注射使用。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)顯示，LMWP修飾能夠顯著增強(qiáng)納米粒進(jìn)入細(xì)胞的能力，尤其體現(xiàn)在耐藥細(xì)胞上；LMWP/PLGA/Dox NP也表現(xiàn)出了較好的核靶向功能。 MTT實(shí)驗(yàn)證明了LMWP/PLGA/Dox NP顯著的對(duì)于腫瘤細(xì)胞（尤其是耐藥腫瘤細(xì)胞）的增殖抑制效果。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，LMWP修飾能夠增強(qiáng)PLGA納米粒穿透腫瘤的能力，顯示出對(duì)多藥耐藥腫瘤較好的抑制效果；小鼠體重變化及病理切片結(jié)果證明，LMWP/PLGA/Dox NP無毒。 結(jié)論：本研究構(gòu)建的LMWP修飾的負(fù)載阿霉素的PLGA納米給藥系統(tǒng)在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均表現(xiàn)出較好的逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的效果，顯示出較好的抑制腫瘤生長的能力。為腫瘤多藥耐藥的治療提供了一種新策略。
【學(xué)位單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2014
【中圖分類】：R943;R96
【部分圖文】：

而有效地介導(dǎo)藥物在體內(nèi)的輸送。同時(shí)，低分子量魚精蛋白體內(nèi)外的安全得到證實(shí)[20,21]。因此我們合成了烷基化的 LMWP 肽鏈，其疏水性烷基鏈能過疏水作用力與 PLGA 納米粒作用，得到 LMWP 修飾的 PLGA 納米粒。并 PLGA 負(fù)載一線抗癌藥物阿霉素，應(yīng)用 LMWP 的高效穿透力來提高藥物療到對(duì)抗腫瘤多藥耐藥的目的（圖 1）。

圖 1.2 LMWP 與 TAT 混合溶液的洗脫層析圖3.1.2 LMWP 在 MCF-7 與 HUVEC 細(xì)胞中攝取效率圖 1.3 是 LMWP-FITC 在 MCF-7 及 HUVEC 細(xì)胞上的攝取結(jié)果。圖 1.3B 是對(duì)圖 1.3A 流式結(jié)果的定量分析。

圖 1.2 LMWP 與 TAT 混合溶液的洗脫層析圖P 在 MCF-7 與 HUVEC 細(xì)胞中攝取效率 LMWP-FITC 在 MCF-7 及 HUVEC 細(xì)胞上的攝取結(jié)結(jié)果的定量分析。
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃瑩瑩;;Biodegradable Polylactide-co-glycolide (PLGA) Thin Films Prepared by Electrospray and Pressurized Spray Deposition[J];Journal of Wuhan University of Technology-Materials Science;2005年S1期

2 王志清;劉衛(wèi);徐輝碧;楊祥良;;載三氧化二砷的PEG-PLGA隱性納米粒的制備及體外研究(英文)[J];Chinese Journal of Chemical Engineering;2007年06期

3 ;Effect of Excipients on Stability and Structure of rhCuZn-SOD Encapsulated in PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2004年03期

4 郭曉東;;Surface Modification of Biomimetic PLGA-(ASP-PEG) Matrix with RGD-Containing Peptide:a New Non-Viral Vector for Gene Transfer and Tissue Engineering[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2006年03期

5 陳劍;樊新;周忠誠;阮建明;;PLGA材料仿生改性的最新進(jìn)展[J];粉末冶金材料科學(xué)與工程;2008年06期

6 ;Preparation and mineralization of PLGA/Gt electrospun fiber mats[J];Chinese Science Bulletin;2009年08期

7 李雙燕;;PLGA組織工程支架材料的研究與展望[J];國外絲綢;2009年02期

8 郝杰;鄭啟新;;Biomineralization of the Surface of PLGA-(ASP-PEG) Modified with the K_(16) and RGD-containing Peptide[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2009年05期

9 ;Preparation of Tolterodine Metabolite Loaded Biodegradable PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2010年01期

10 ;Comparison of BSA Release Behavior from Electrospun PLGA and PLGA/Chitosan Membranes[J];Chemical Research in Chinese Universities;2011年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 戴文達(dá);新型結(jié)構(gòu)PLGA/膠原三維可降解復(fù)合材料用于軟骨再生的效果研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

2 劉福娟;聚乳酸/乙醇酸共聚物（PLGA）仿生細(xì)胞外基質(zhì)的制備、表征及其與蛋白界面交互作用的研究[D];東華大學(xué);2010年

3 黃術(shù);RFP-PLGA骨緩釋復(fù)合體的初步實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2013年

4 徐洋;表面改性的納米羥基磷灰石/PLGA復(fù)合材料的制備及成骨活性實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2010年

5 董樹君;新型納米改性生物玻璃/PLGA復(fù)合材料的制備及骨缺損修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2009年

6 韓瑞玲;魚精蛋白包覆PLGA納米粒用于疫苗載體的初步研究[D];華中科技大學(xué);2010年

7 孟昭旭;電紡PLGA/明膠組織工程支架和藥物載體的制備與性能研究[D];哈爾濱工程大學(xué);2011年

8 楊艷芳;動(dòng)/靜態(tài)條件下PLGA與PLGA/β-TCP多孔支架的降解與釋藥行為[D];天津大學(xué);2010年

9 龐龍;PLGA/β-TCP快速成型支架改性的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 李丹;PLGA/羥基磷灰石復(fù)合支架的制備及其用于骨修復(fù)的研究[D];浙江大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張志杰;Zein/PLGA雙組份納米復(fù)合纖維膜的制備研究[D];浙江理工大學(xué);2010年

2 鄭莉琴;PLGA-無機(jī)鹽復(fù)合生物材料對(duì)牙胚細(xì)胞和牙髓干細(xì)胞增殖分化的影響[D];福建師范大學(xué);2008年

3 彭兆意;小鼠胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)的血管細(xì)胞聯(lián)合種植在PLGA上初步構(gòu)建出血管組織[D];南昌大學(xué);2008年

4 戴有剛;SF/PLGA共混靜電紡絲人工血管材料的研究[D];蘇州大學(xué);2009年

5 張軍武;PLGA、脫細(xì)胞軟骨粒支架、PLGA-脫細(xì)胞軟骨粒支架體外構(gòu)建組織工程軟骨的比較[D];山西醫(yī)科大學(xué);2009年

6 張翠娟;PLGA/HA骨支架復(fù)合材料的制備與性能[D];湖南科技大學(xué);2009年

7 曾威;PLGA改性腸吻合支架的初步研究[D];南華大學(xué);2010年

8 高秀娟;抗癌藥物芫花酯甲PLGA微球制備與肺靶向性評(píng)價(jià)[D];大連理工大學(xué);2007年

9 閆露;基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合PLGA成骨實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2007年

10 楊燕珠;改性多壁碳納米管修飾的PLGA支架及其細(xì)胞黏附特性[D];上海交通大學(xué);2008年

本文編號(hào)：2873163