目的研究“右旋糖酐-磁性層狀復合氫氧化物-氟尿嘧啶(Dextran-Magnetic Layered Double Hydroxide-Fluorouracil,DMF)”給藥系統(tǒng)引發(fā)人胃癌細胞MGC-803/SGC-7901脹亡的機制表型。方法通過“前體共沉淀-離子交換插層-原位復合-溶劑轉換”技術制備DMF。TEM確定DMF致細胞死亡形態(tài)特征;CCK-8實驗,細胞免疫熒光分析,ATP、活性氧、線粒體膜電位、游離Ca~(2+)濃度檢測、蛋白免疫印記技術以及ACP水平檢測,研究DMF誘導胃癌MGC-803/SGC-7901細胞脹亡的機制及其相對于原藥5-Fu的表型差異。結果DMF誘導MGC-803/SGC-7901凋亡及脹亡;DMF對兩種癌細胞體外增殖的抑制作用相對5-Fu原藥有顯著差異,MGC-803細胞中,IC_(50)值分別為263.1μg·mL~(-1),1876μg·mL~(-1);SGC-7901中IC_(50)值分別為327.0μg·mL~(-1),2261.8μg·mL~(-1)。DMF能引發(fā)線粒體功能障礙,引起胞內(nèi)鈣離子濃度增高、ATP水平下降、線粒體膜電位降低,但不造成胞內(nèi)ROS積累。DMF能引起ERS效應,存在Caspase-7、Caspase-12、Caspase-9、Caspase-3、PARP級聯(lián)反應的可能。DMF能激活前脹亡受體,但對穿孔素、鈣蛋白酶及脹亡受體蛋白水平的影響不及原藥顯著。在Caspase-8、Caspase-6、Caspase-9、Caspase-3及Lamin-A級聯(lián)反應中,DMF對核膜及聚核酸酶PARP表現(xiàn)出更強的降解趨勢。DMF能在較短的時間內(nèi)使溶媒體中的標志酶水平產(chǎn)生變化。結論DMF能引起胞內(nèi)細胞器大量空泡化,ATP快速耗竭,符合細胞脹亡表型,但內(nèi)源性線粒體凋亡不是細胞脹亡的主要原因;DMF能引發(fā)強烈的ERS效應,脹亡過程可能存在一條與ERS凋亡相近的信號通路;鈣蛋白酶系統(tǒng)并非DMF引發(fā)細胞結構性損傷及脹亡的關鍵因素。DMF能引發(fā)與凋亡相似的Caspases級聯(lián)反應,對核膜及聚核酸酶PARP產(chǎn)生更強的破壞作用。
【學位單位】：寧夏醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R965
【部分圖文】：

1 DMF 納米制劑的物相表征及其體外藥物釋放圖 1 為 DMF 納米給藥系統(tǒng)合成樣品的 XRD 模型。樣品在（11.039°，0.8008 nm）（22.200°，0.4001 nm）、（33.080°，0.2706 nm）和（57.580°，0.1599 nm）位置出現(xiàn)特征衍射峰，按文獻[7,8]歸屬為類層狀復合氫氧化物 R-六方晶相的（003）、（006）、（0012和（110）晶面衍射，證明本實驗經(jīng)共沉淀、藥物插層合成的 DET-MLDH-FU（DMF）與 Fe3.6Fe0.9(O,OH,Cl)9磁性層狀復合氫氧化物[8]屬于同一晶相。此外，DMF 樣品在（35.391°，0.2634 nm）位置還有明顯衍射，與 JCPDS）標準卡片 PDF 19-0629（磁性氧化鐵）的（311）（35.442°，0.2632 nm）對應，表明在樣品處理、干燥過程中 DMF 中的Fe(II、III)MLDH 會部分氧化生成微量 Fe3O4，但氧化鐵含量 ω ( Fe3O4)僅為 0.10，非主要晶相。

OH)16]·[Cl2 (4.0H2O)]為載體的“DET-MLDH- FLU”三級超的鐵磁性檢驗呈強陽性；通過古埃磁天平法測得粉體的質(zhì)0-4cm3·g-1，證明 DMF 是一種磁性納米藥物。DMF 的磁性是由 LDH 層板 Fe(II、III)離子的順磁性單電子排列結構決示，樣品具有層板羥基的伸縮振動 νO-H、彎曲振動 δH-O-H、等圖 2 DMF 樣品的紅外光譜 The FT-IR of DET-MLDH-FU samples

本實驗合成以[FeII6FeIII2(OH)16]·[Cl2 (4.0H2O)]為載體的“DET-MLDH- FLU”三級超分子給藥系統(tǒng)（DMF），樣品的鐵磁性檢驗呈強陽性；通過古埃磁天平法測得粉體的質(zhì)量磁化率為 1.80×10-4~2.99×10-4cm3·g-1，證明 DMF 是一種磁性納米藥物。DMF 的磁性并非因載體部分氧化引起，而是由 LDH 層板 Fe(II、III)離子的順磁性單電子排列結構決定的。FT-IvR 光譜（圖 2）顯示，樣品具有層板羥基的伸縮振動 νO-H、彎曲振動 δH-O-H、層板晶格氧的伸縮振動 νM-O等LDH 型 IR 吸收特征，及有機復合層官能團的伸縮振動信息，與DMF 系統(tǒng)包含無機載體 MLDH、藥物分子及右旋糖酐等有機成圖 2 DMF 樣品的紅外光譜Fig.2 The FT-IR of DET-MLDH-FU samples
【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 黃春林;;葉下珠醇提物對人胃癌細胞的抑制作用[J];中國中醫(yī)急癥;2011年05期

2 張光霽,申力;藤蟾方抑制人胃癌細胞的生長及誘導其凋亡的實驗研究[J];浙江臨床醫(yī)學;2005年06期

3 陳華,楊守峰,楊雪琴;癌平口服液含藥血清對人胃癌細胞分化的影響[J];中國醫(yī)藥學報;2002年10期

4 鄒菁,張麗英;蛇毒復合酶對人胃癌細胞的抑瘤研究[J];蛇志;2002年01期

5 楊勤建;中藥香龍散可誘導人胃癌細胞的凋亡[J];中國腫瘤;1999年09期

6 安鋼,汪德耀;HpD-激光對體外培養(yǎng)人胃癌細胞的殺傷作用[J];腫瘤;1988年04期

7 唐磷,胥佩菱;取代4-吡啶酮-2-甲醛與氨基化合物縮合產(chǎn)物的合成及抗癌活性研究[J];華西藥學雜志;1988年01期

8 常和西,何菱,胥佩菱;芳維甲類結構修飾[J];華西藥學雜志;1988年04期

9 鄧健蓓,錢微,蘇成芝;特異性轉移因子對人胃癌細胞RNA合成及H-ras癌基因表達的影響[J];第四軍醫(yī)大學學報;1989年06期

10 樂美兆,宋小明,閻玉森;龍霧茶提取物對人胃癌細胞作用的電鏡觀察[J];茶葉科學;1989年02期

相關博士學位論文 前10條

1 吳晗;小分子化合物VCPA聯(lián)合阿霉素誘導人胃癌細胞凋亡作用及其分子機制的研究[D];武漢大學;2017年

2 哈敏文;抗癌藥物對人胃癌細胞周期影響的研究[D];中國醫(yī)科大學;2004年

3 趙一兵;人胃癌細胞線粒體DNA突變的研究[D];南京醫(yī)科大學;2005年

4 馮玉光;尼美舒利對氯化鈷誘導的人胃癌細胞HIF-1a、VEGF表達的抑制作用和機制研究[D];鄭州大學;2005年

5 吳濤;TGF-β_1 SiRNA對人胃癌細胞和腹膜間皮細胞作用意義的初步探討[D];中國醫(yī)科大學;2006年

6 關宏偉;人胃癌細胞SGC7901/ADR耐藥相關蛋白質(zhì)分子的差異比較研究[D];大連醫(yī)科大學;2006年

7 高福蓮;siRNA逆轉人胃癌細胞mdr1介導的多藥耐藥[D];鄭州大學;2006年

8 楊志平;雌馬酚抑制人胃癌細胞生長及其相關機制的研究[D];福建醫(yī)科大學;2015年

9 蔣長興;青蛤多糖分離鑒定、硫酸酯化及其生物活性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學;2011年

10 劉英霞;三氧化二砷（As_2O_3）抑制人胃癌細胞SGC-7901侵襲轉移作用機理研究[D];蘭州大學;2011年

相關碩士學位論文 前10條

1 鄧雅;構建人胃癌細胞淋巴結轉移模型與高轉移性細胞株的篩選及其相關機制研究[D];廣西醫(yī)科大學;2018年

2 裴琴玉;“右旋糖酐-磁性層狀復合氫氧化物-氟尿嘧啶”給藥系統(tǒng)引發(fā)人胃癌細胞死亡的表型特征[D];寧夏醫(yī)科大學;2019年

3 艾夢環(huán);復方蜥蜴散不同微粒組合劑對MGC-803人胃癌細胞的干預作用及機制研究[D];寧夏醫(yī)科大學;2019年

4 唐佳運;蛋氨酸腦啡肽對人胃癌細胞BGC823和MGC803增殖及凋亡作用的影響[D];中國醫(yī)科大學;2018年

5 劉蕾;化痰通瘀解毒方水提取物對人胃癌細胞SGC-7901侵襲轉移及Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白表達的影響[D];安徽中醫(yī)藥大學;2017年

6 趙曉曉;β-欖香烯對人胃癌細胞的影響及其部分機制[D];安徽醫(yī)科大學;2017年

7 趙容;AHVAC-Ⅰ誘導人胃癌細胞SGC-7901線粒體凋亡途徑的研究[D];皖南醫(yī)學院;2017年

8 李亞洲;膜聯(lián)蛋白A11對人胃癌細胞株AGS順鉑耐藥性影響及其機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2017年

9 范學軍;微囊化人胃癌細胞培養(yǎng)模型建立及實驗研究[D];遵義醫(yī)學院;2011年

10 周燕;羅漢松實醇提物對人胃癌細胞的抑制作用研究[D];湖北中醫(yī)藥大學;2015年

本文編號：2861200