發(fā)布時(shí)間：2020-10-27 16:12

　　 目的1.使用非線性混合效應(yīng)模型(nonlinear mixed effect model,NONMEM)軟件,建立MET在國(guó)人經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入(Percutaneous coronary intervention,PCI)術(shù)后冠心病患者群體藥代動(dòng)力學(xué)(population pharmacokinetics,PPK)模型,為美托洛爾(metoprolol,MET)個(gè)體化治療提供參考。2.探討CYP2D6*10基因變異對(duì)MET藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。方法1.應(yīng)用基因芯片法檢測(cè)CYP2D6*1/*10基因分型。2.應(yīng)用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(Liquid chromatography-tandem mass spectrometry/mass spectrometer,LC-MS/MS)法測(cè)定MET血漿濃度。3.采用一房室模型,應(yīng)用NONMEM軟件建立MET PPK模型,定量考察43例患者性別、年齡、肝腎功能、CYP2D6基因變異、合并用藥、合并疾病等協(xié)變量對(duì)MET藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。4.作圖評(píng)價(jià)模型擬合優(yōu)度,采用非參數(shù)自舉法考察MET PPK模型穩(wěn)定性和內(nèi)部有效性,同時(shí)通過(guò)正態(tài)化預(yù)測(cè)分布誤差(Normalization prediction distribution error,NPDE)考察MET藥動(dòng)學(xué)模型預(yù)測(cè)能力及是否可產(chǎn)生模擬數(shù)據(jù)。結(jié)果1.43例PCI術(shù)后冠心病患者CYP2D6基因型及等位基因分布頻率:CYP2D6*1/*1型18.61%(8例),CYP2D6*1/*10型51.16%(22例),CYP2D6*10/*10型30.23%(13例);*1 44.19%,*10 55.81%�；蛐头植碱l率符合Hardy-Weinberg平衡定律。2.LC-MS/MS法測(cè)定MET血漿濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=7.98*10~3*X+230(n=8,r=1.0000),線性范圍0.5-100ng.mL~(-1),檢測(cè)限為0.33 ng.mL~(-1)(S/N≥10)。提取回收率97.6-103.5%,日內(nèi)精密度、日間精密度均小于5%,基質(zhì)效應(yīng)1.05-1.18。3.基于43例PCI術(shù)后冠心病患者92個(gè)血藥濃度點(diǎn)、CYP2D6基因型、合并用藥、合并疾病等相關(guān)資料建立MET的PPK最終模型為:CL/F(Lgh~(-1))=θ_(CL)*ICYP*e~ηV/F(L)=θ_V最終模型表明,僅有CYP2D6基因變異對(duì)MET清除率有影響,表現(xiàn)為CYP2D6*10的變異可降低MET清除率,CYP2D6*1/*10基因型患者M(jìn)ET清除率較CYP2D6*1/*1基因型患者下降36.6%,CYP2D6*10/*10基因型患者M(jìn)ET清除率較CYP2D6*1/*1基因型患者下降70.7%,呈現(xiàn)基因劑量效應(yīng)。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)MET表觀分布容積有影響的協(xié)變量。4.最終模型的散點(diǎn)圖擬合度優(yōu)于最簡(jiǎn)模型;非參數(shù)自舉法內(nèi)部驗(yàn)證穩(wěn)定性高達(dá)99.2%,相關(guān)偏差絕對(duì)值均小于10%,提示模型具有較好的穩(wěn)定性和內(nèi)部有效性;NPDE方差齊性服從正態(tài)分布,提示模型具有良好的預(yù)測(cè)能力且可以產(chǎn)生模擬數(shù)據(jù)。結(jié)論1.本研究采用LC-MS/MS法檢測(cè)MET血漿濃度敏感性高、選擇性高、準(zhǔn)確性好,為臨床MET濃度測(cè)定及藥代動(dòng)力學(xué)研究提供可靠方法。2.CYP2D6*10基因變異是MET清除率重要影響因素,本研究建立的MET的PPK模型穩(wěn)定、可靠,可為MET個(gè)體化給藥提供參考。
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：R969.1
【部分圖文】：

圖 1 CYP2D6 的基因芯片法檢測(cè)結(jié)果圖共納入 CYP2D6*1/*1 基因型患者 8 例（18.61%），CYP2D6*1/*10 基因型 22例（51.16%），CYP2D6*10/*10 基因型 13 例（30.23%），*1 等位基因頻率為44.19%，*10 等位基因頻率 55.81%，詳見(jiàn)表 3。遺傳分析結(jié)果如表 4 所示，進(jìn)行卡方檢驗(yàn)后 P＞0.05，符合 Hard-Weinberg 平衡，提示入選患者來(lái)自較大的且處于隨機(jī)婚配的群體，具有群體代表性。表 3 CYP2D6 基因型分布基因型頻率(n，%) 等位基因頻率(%)CYP2D6 *1*1 *1*10 *10*10 *1 *10例數(shù) 8（18.61） 22（51.16） 13（30.23） 44.19 55.81注：*1 等位基因頻率=(CYP2D6*1*1×2+CYP2D6*1*10)/43×2*10 等位基因頻率=(CYP2D6*10*10×2+CYP2D6*1*10)/43×2

MET質(zhì)譜圖AMET一級(jí)質(zhì)譜圖BMET二級(jí)質(zhì)譜圖

圖 3 MET LC-MS/MS 測(cè)定的色譜質(zhì)譜圖A 標(biāo)準(zhǔn)品（酒石酸 MET） B 琥珀酸 MET 緩釋片 C 空白血漿D 空白血漿+標(biāo)準(zhǔn)樣品（0.05ng/mL）E 空白血漿+標(biāo)準(zhǔn)樣品（100ng/mL）F 患者血漿2.2.2 MET 標(biāo)準(zhǔn)曲線和檢出限本法測(cè)得 MET 血藥濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 4 所示，得到回歸方程為：Y=7.98*103*X+230 (r=1.00，n=8)，其中線性范圍 0.50-100ng/mL，信噪比（S/N）≥10，當(dāng) S/N=10 時(shí)，求得 MET 的檢出限為 0.33 ng/mL。
【參考文獻(xiàn)】

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2 溫志國(guó);安亮;林鳳;王全哲;;CYP2D6基因多態(tài)性的臨床應(yīng)用概況[J];分子診斷與治療雜志;2013年05期

3 張弨;趙榮生;翟所迪;單愛(ài)蓮;;群體藥代動(dòng)力學(xué)概述[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志;2013年08期

4 李新剛;趙志剛;;群體藥代動(dòng)力學(xué)研究進(jìn)展[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志;2013年01期

5 李芹;王睿;郭雅;裴斐;;中國(guó)人群CYP2D6基因多態(tài)性對(duì)美托洛爾藥代動(dòng)力學(xué)的影響[J];中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2008年07期

6 柯元南;陳紀(jì)林;;不穩(wěn)定性心絞痛和非ST段抬高心肌梗死診斷與治療指南[J];中華心血管病雜志;2007年04期

7 張弨,翟所迪;非線性混合效應(yīng)模型法在群體藥代動(dòng)力學(xué)和群體藥效學(xué)中的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(藥學(xué)分冊(cè));2004年04期

8 紀(jì)玲,潘世秀,吳健民,Jacqueline Marti-Jaun,Martin Hersberger;中國(guó)大陸人群CYP2D6基因多態(tài)性的檢測(cè)(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年12期

本文編號(hào)：2858744