目的:急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合癥(ALI/ARDS)是一種非心源性,急性發(fā)作,同時(shí)伴有雙肺炎癥浸潤及難治性低氧血癥為特征的臨床危急重癥之一。目前尚缺乏有效的治療手段,ALI的病死率高達(dá)35%-46%。近年來研究發(fā)現(xiàn),成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)的早期反應(yīng)蛋白14(Fn14)與炎癥的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。但該受體是否參與ALI的發(fā)生發(fā)展尚無報(bào)道,本研究擬探討Fn14受體激活在LPS誘導(dǎo)的小鼠ALI中的作用。方法:采用氣管滴注脂多糖(LPS,5 mg/kg)復(fù)制小鼠ALI模型,治療組于造模前1 h腹腔注射Fn14阻斷劑金精三羧酸(ATA,20mg/kg),小鼠于造模12 h后處死、取材。觀察阻斷Fn14致死劑量LPS誘導(dǎo)的ALI小鼠存活率的影響;HE染色和肺組織炎癥評分評價(jià)小鼠肺組織的病理改變;檢測血清中LDH活性;細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測支氣管肺泡灌洗液中炎性細(xì)胞的數(shù)目和檢測肺組織髓過氧化物酶,觀察肺內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤情況;RT-PCR檢測IL-1β、TNF-α、MCP-1的基因表達(dá);Western Blot方法檢測Fn14和pro-IL-1β的蛋白表達(dá)情況;ELISA方法檢測肺組織中TNF-α、IL-1β蛋白含量以及支氣管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、MCP-1的蛋白表達(dá)情況;結(jié)果:Western blot檢測結(jié)果顯示Fn14在ALI小鼠肺組織中表達(dá)上調(diào)。采用Fn14的特異性阻斷劑ATA阻斷Fn14可提高致死劑量LPS誘導(dǎo)的ALI小鼠生存率;阻斷Fn14可減輕LPS誘導(dǎo)ALI小鼠肺組織病理改變及炎癥評分;阻斷Fn14可減輕細(xì)胞損傷;阻斷Fn14可減少炎性細(xì)胞浸潤;阻斷Fn14可下調(diào)促炎細(xì)胞因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)與分泌;亦可以減少單核趨化因子-1的表達(dá)與分泌。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),阻斷Fn14可以降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量并部分提高抗氧化物酶SOD活性。結(jié)論:1.Fn14受體激活參與急性肺損傷的發(fā)生發(fā)展;2.阻斷Fn14受體激活可以減輕ALI肺內(nèi)炎癥反應(yīng)。
【學(xué)位單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R965
【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 Fn14 在急性肺損傷小鼠肺組織中的表達(dá)我們首先在急性肺損傷小鼠肺組織中通過 Western Blot 檢測 Fn14 蛋白的含量，結(jié)果顯示 Fn14 在急性肺損傷小鼠肺組織中的表達(dá)顯著高于對照組（P＜0.05）（圖 1）。且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），揭示 Fn14 可能參與小鼠 ALI 的發(fā)生發(fā)展。

圖 2-1 ATA 對 LPS 誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠存活率的影響.（n=20）*** ：與 LPS+ATA 組相比，P<0.01 阻斷 Fn14 對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織病理改變的影響：HE 染色結(jié)果顯示，正常對照組小鼠的肺組織顯示其結(jié)構(gòu)完整、肺泡間隔較肺泡結(jié)構(gòu)很清晰，肺泡內(nèi)干凈無異物。LPS 作用 12 h，可見小鼠肺組織有大性細(xì)胞浸潤、肺間隔增厚同時(shí)伴有血管充血和明顯出血點(diǎn)，顯現(xiàn)出明顯的炎應(yīng)，表明小鼠 ALI 的模型復(fù)制成功。ATA 預(yù)處理組小鼠肺組織病理改變明輕（圖 2-2-A），結(jié)果表明阻斷 Fn14 可明顯減輕 LPS 誘導(dǎo)的 ALI 小鼠肺組織理改變。同時(shí)我們對照評分標(biāo)準(zhǔn)對小鼠肺組織的病理改變進(jìn)行炎癥評分。結(jié)示 LPS 作用 12 hALI 小鼠肺組織的炎癥評分明顯升高，而使用 ATA 處理后肺組織炎癥評分明顯低于 ALI 組（圖 2-2-B, P＜0.05）。以上結(jié)果顯示，采

23圖 2-2 ATA 對 LPS 誘導(dǎo) ALI 小鼠肺組織的病理改變的影響. (n=4-7)A：HE 染色；B：肺組織炎癥評分**：與 Control 組相比，P<0.01；##：與 ATA+LPS 相比，P<0.01

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李俊紅;羅雅玲;賴文巖;王蔚盈;宮靜;;地塞米松對哮喘小鼠肺組織中TWEAK及其受體Fn14表達(dá)的調(diào)節(jié)作用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2012年11期

2 馮志成;;血清及支氣管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6在急性呼吸窘迫綜合癥中的變化及意義[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年18期

本文編號(hào)：2832868