目的探討阿糖胞苷(Ara-C)通過自噬途徑影響人紅白血病K562細胞株增殖、凋亡的作用及可能的機制。方法采用CCK-8法檢測不同濃度的Ara-C作用24h和48h后細胞增殖抑制率;流式細胞術(shù)(FCM)檢測凋亡率和周期;Hoechest染色觀察細胞核染色質(zhì)的形態(tài),吖啶橙染色觀察細胞酸性自噬小泡;Western blot檢測p38和p-p38蛋白表達變化;RT-PCR和免疫熒光檢測自噬凋亡相關(guān)基因和蛋白的表達水平。結(jié)果 CCK-8檢測發(fā)現(xiàn)不同濃度的Ara-C均能抑制K562細胞增殖,并呈濃度和時間依賴性;FCM檢測顯示Ara-C能增加細胞的凋亡和將細胞周期阻滯在S期;Hoechest染色發(fā)現(xiàn)Ara-C處理K562細胞后呈凋亡形態(tài)改變;吖啶橙染色發(fā)現(xiàn)Ara-C組細胞綠色熒光增強,細胞出現(xiàn)大量的酸性自噬小泡;RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)Ara-C上調(diào)自噬關(guān)鍵基因Beclin-1、LC3A和LC3B表達;Western blot檢測發(fā)現(xiàn)Ara-C增加磷酸化p38表達;免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)Ara-C增加LC3表達。結(jié)論 Ara-C能夠激活p-p38介導(dǎo)的K562細胞發(fā)生自噬,進而抑制細胞增殖和促進細胞凋亡作用。

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