發(fā)布時(shí)間：2020-08-11 23:27

【摘要】：目的:研究炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物和DPPZ類(lèi)型釕配合物的合成;研究不同炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物與c-myc G-四鏈體DNA結(jié)合能力和抗腫瘤活性的差異,以及對(duì)c-Myc蛋白的調(diào)控作用。研究不同炔基修飾的DPPZ類(lèi)型釕配合物的抗腫瘤活性差異和3-氨基苯乙炔基修飾的釕配合物對(duì)高轉(zhuǎn)移乳腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制作用。方法:利用微波輔助Sonogashira偶聯(lián)反應(yīng)合成炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物和DPPZ類(lèi)型釕配合物;并運(yùn)用ESI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR等手段對(duì)化合物進(jìn)行表征。通過(guò)MTT法、紫外滴定光譜、CD滴定光譜、FRET熔點(diǎn)測(cè)定、競(jìng)爭(zhēng)性FRET熔點(diǎn)測(cè)定、TEM、AFM、PCR-stop和Western blot等實(shí)驗(yàn)研究不同炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物與c-myc G-四鏈體DNA結(jié)合能力和抗腫瘤活性的差異,以及對(duì)c-Myc蛋白的調(diào)控作用。此外,運(yùn)用MTT法研究不同炔基修飾的DPPZ類(lèi)型釕配合物對(duì)不同腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。利用細(xì)胞定位、流式細(xì)胞檢測(cè)、慧星實(shí)驗(yàn)、免疫熒光和管腔形成等實(shí)驗(yàn)研究3-氨基苯乙炔基修飾的釕配合物對(duì)高轉(zhuǎn)移乳腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制作用。結(jié)果:微波輔助Sonogashira偶聯(lián)反應(yīng)合成了2種炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物和27種炔基修飾的DPPZ類(lèi)型化合物。且意外地發(fā)現(xiàn)丙炔醇與含溴釕配合物進(jìn)行Sonogashira偶聯(lián)反應(yīng)時(shí),發(fā)生了互變異構(gòu)化反應(yīng)生成烯醛,并應(yīng)用ESI-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR、光譜學(xué)、銀鏡反應(yīng)等手段得到了驗(yàn)證。另外,研究發(fā)現(xiàn)炔基修飾的PIP類(lèi)型釕配合物可通過(guò)選擇性地結(jié)合、穩(wěn)定c-myc G-四鏈體DNA,阻斷其轉(zhuǎn)錄、翻譯,下調(diào)c-Myc蛋白的表達(dá),促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡,可作為潛在c-Myc蛋白抑制劑。再者,研究發(fā)現(xiàn)以DPPZ為主配體的手性釕配合物對(duì)高轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞具有很好的殺傷力,右旋釕配合物的抗腫瘤活性普遍優(yōu)于左旋釕配合物,且引入芳香環(huán)炔基能增強(qiáng)釕配合物的抗腫瘤活性。3-氨基苯乙炔基修飾的釕配合物對(duì)MDA-MB-231具有理想的抗腫瘤活性(IC_(50)=25.51±1.42μM),且該化合物在較低濃度下就可以抑制高轉(zhuǎn)移乳腺癌的侵襲和轉(zhuǎn)移,而不殺死細(xì)胞。綜上,炔基釕配合物是最有前途的非鉑類(lèi)靶向抗癌藥物。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R914;R96
【圖文】：

圖 1-4 多吡啶釕配合物[Ru(bpy)(phpy)dppz]+的抗腫瘤作用機(jī)制Fig.1-4 Antitumor mechanism of polypyridyl ruthenium complex [Ru(bpy)(phpy)dppz]+與鉑類(lèi)化合物相同，以上釕配合物是通過(guò)攻擊雙鏈 DNA，干擾 DNA 的轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。然而，這樣的攻擊不能區(qū)分腫瘤和正常細(xì)胞，因此也會(huì)產(chǎn)生一定的副作用。G-四鏈體 DNA 主要存在于染色體端粒序列和基因的啟動(dòng)子區(qū)域。在正常細(xì)胞中，人端粒 DNA 不斷地縮短，最終導(dǎo)致細(xì)胞衰老和細(xì)胞凋亡。然而，癌細(xì)胞的端粒是維持和延長(zhǎng)的，這是癌細(xì)胞增殖和永生化的基礎(chǔ)。因此，G4 靶向抗癌藥物的研發(fā)具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。有文獻(xiàn)表明釕（II）配合物與 G-四鏈體 DNA 的結(jié)合在選擇性抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)上起關(guān)鍵作用[39]。其中，c-myc 基因或其蛋白 c-Myc 已經(jīng)成為癌癥發(fā)生和發(fā)展的重要指標(biāo)[40]。由于 c-Myc 蛋白在細(xì)胞中迅速降解，很難直接被藥物靶向，所以目前 c-Myc 抗癌治療策略主要是抑制 c-myc 的轉(zhuǎn)錄，從而下調(diào) c-Myc 蛋白表達(dá)。梅文杰等人[41]設(shè)計(jì)合成了一個(gè)具有較大芳香平面的多吡啶釕配合物L(fēng)[Ru(bpy)2(p-tFMPIP)]2+(化合物的結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖 1-5a)，并通過(guò)一系列光譜學(xué)實(shí)驗(yàn)證

表 2-3 Ru（II）配合物對(duì)選擇的細(xì)胞系的抑制作用 Inhibitory effect of Ru(II) complexes against selected cell IC50(μM)-231 MCF-7 HepG2 EC-1 HaC.36 35.66 ±3.48 >300 >300 135.6 ±.51 10.6 ±1.47 181.7 ±8.33 >300 274.1 ±.24 / 7.2 ±0.69 >300 7.5 ±aT)/ IC50(MDA-MB-231)釕（II）配合物 1 和 2 對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞1.7 和 18.5 μM），這與順鉑（34.3 μM）相當(dāng)。（IC50值分別為 135.6 和 274.1 μM），化合 的毒性指數(shù)分別為約 2.62 和 14.8。而順鉑的毒常細(xì)胞的毒性比順鉑低很多。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 張召;含炔基手性釕(Ⅱ)配合物的合成、表征及其誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制[D];廣東藥學(xué)院;2014年

2 吳瓊;芳烴釕(Ⅱ)配合物的微波輔助合成及其抗腫瘤作用機(jī)制[D];廣東藥學(xué)院;2013年

3 王淇;微波輔助Sonogashira反應(yīng)制備含乙炔基釕（Ⅱ）配合物及其抗腫瘤活性[D];廣東藥學(xué)院;2012年

本文編號(hào)：2789706