【摘要】：肺癌是一種異質(zhì)性,復(fù)雜性且具有挑戰(zhàn)性的疾病,是目前世界上發(fā)病率和死亡率均居首位的癌癥。隨著世界各地的工業(yè)化,城市化和環(huán)境污染,肺癌的病因變得更加復(fù)雜。肺癌分為小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌,其中非小細(xì)胞肺癌占據(jù)80-85%。肺癌的治療手段包括手術(shù)及放化療,但現(xiàn)有化療藥物少,對患者產(chǎn)生不可逆損傷,因此亟待開發(fā)療效高,毒副作用小的新型抗肺癌藥物。煙酸硒氰化合物SLL-1A-16是全新的有機(jī)硒小分子化合物,是將硒氰基團(tuán)引入煙酸中合成而來,本研究首先探究了化合物SLL-1A-16抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖的作用,發(fā)現(xiàn)SLL-1A-16對肺癌細(xì)胞的抑制作用最顯著,因此選取其中肺癌為主要研究對象探究SLL-1A-16在肺癌中的抗腫瘤活性及機(jī)制。首先,利用MTT法檢測化合物SLL-1A-16對肺癌細(xì)胞A549、NCI-H460,胃癌細(xì)胞BGC-823、MKN-28,肝癌細(xì)胞HEPG2、HEP3B,乳腺癌細(xì)胞MBA-MD-823、MCF7,前列腺癌細(xì)胞 LNCAP、PC-3,結(jié)直腸癌細(xì)胞 Caco2、SW480細(xì)胞增殖的影響,發(fā)現(xiàn)SLL-1A-16抑制肺癌細(xì)胞增殖的效果最顯著。然后,進(jìn)一步研究化合物SLL-1A-16處理兩種肺癌細(xì)胞24小時(shí)后,細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化,Western Blot檢測肺癌發(fā)生相關(guān)蛋白表達(dá)水平的變化;利用計(jì)算機(jī)模擬分子對接的方法模擬化合物SLL-1A-16的可能靶點(diǎn),初步探究其抑制肺癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制。結(jié)果如下:1.MTT法檢測細(xì)胞活力,SLL-1A-16分別處理6種癌系的12種細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)化合物SLL-1A-16顯著抑制肺癌細(xì)胞增殖,CCK8法檢測SLL-1A-16對肺癌細(xì)胞A549和NCI-H460的IC50值分別為20.935μM、11.624μM,克隆形成實(shí)驗(yàn)表明SLL-1A-16能夠顯著抑制肺癌細(xì)胞克隆形成能力。2.化合物SLL-1A-16將A549細(xì)胞阻滯在G1期,降低G1期相關(guān)蛋白Cyclin D和CDK4的蛋白表達(dá),對NCI-H460細(xì)胞沒有顯著的細(xì)胞阻滯作用,但能降低G1期相關(guān)蛋白Cyclin D的表達(dá)。3.化合物SLL-1A-16顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,且隨處理濃度增大,凋亡情況越顯著;在兩種肺癌細(xì)胞A549和NCI-H460中促進(jìn)凋亡相關(guān)蛋白Bax表達(dá)增加,抑制凋亡蛋白BCL2表達(dá)降低同時(shí)凋亡效應(yīng)蛋白activecaspase3表達(dá)升高。4.化合物SLL-1A-16上調(diào)兩種肺癌細(xì)胞中抑癌因子DKK3和磷酸化JNK、下調(diào)磷酸化STAT3蛋白表達(dá),抑制mTOR信號通路的激活從而發(fā)揮抑制肺癌細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。5.計(jì)算機(jī)分子對接發(fā)現(xiàn),化合物SLL-1A-16與mTOR蛋白存在相互作用,且存在9中可能構(gòu)象,在可能的9種構(gòu)象中化合物均結(jié)合在mTOR蛋白的FAT或激酶結(jié)構(gòu)域,表明SLL-1A-16能夠靶向mTOR信號通路,抑制其激活。上述結(jié)果表明,化合物SLL-1A-16能夠通過上調(diào)抑癌因子DKK3,下調(diào)p-STAT蛋白表達(dá),同時(shí)激活MAPK信號通路抑制mTOR相關(guān)信號通路的激活在肺癌細(xì)胞中發(fā)揮抑制細(xì)胞增殖的作用�；衔颯LL-1A-16在未來可能作為一種新的小分子藥物應(yīng)用于肺癌的靶向治療。
【學(xué)位授予單位】：遼寧大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R96
【圖文】：

圖１－２化合物ＳＬＬ－１Ａ－１６對ＨｅｐＧ２和Ｈｅｐ３－ｂ細(xì)胞增殖的抑制作用逡逑１．４．３化合物ＳＬＬ－１Ａ－１６對兩種胃癌細(xì)胞的作用逡逑ＳＬＬ－１Ａ－１６處理胃癌細(xì)胞ＭＫＮ－２８和ＢＧＣ－８２３。以０．３％邋ＤＭＳＯ為對照組，逡逑實(shí)驗(yàn)組化合物濃度分別取３、１０、３０、１００、３０（ＨｉＭ，５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）和Ｓｕｌｉｎｄａｃ逡逑作為陽性對照組，在ＭＫＮ－２８細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中５－ＦＵ濃度為３５＾Ｍ，Ｓｕｌｉｎｄａｃ濃度為逡逑２ｍＭ，在ＢＧＣ－８２３細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中５－ＦＵ濃度為２５＾Ｍ，Ｓｕｌｉｎｄａｃ濃度為１．２ｍＭ，結(jié)逡逑果如圖所示，ＳＬＬ－１Ａ－１６在藥物處理濃度為１００、３００ｎＭ時(shí)能夠顯著抑制ＭＫＮ－２８逡逑細(xì)胞增殖，在ＢＧＣ－８２３細(xì)胞中ＳＬＬ－１Ａ－１６不能抑制細(xì)胞增殖，相反能夠促進(jìn)逡逑ＢＧＣ－８２３細(xì)胞的增殖復(fù)制。逡逑ＭＫＮ－２８邐ＢＧＣ－８２３逡逑１５0１邐Ｅ３邋ＤＭＳＯ邐２５０￣｜逡逑＾邐ＥＳ３邋ＳＬＬ－１Ａ－１６－３邐Ｅ３邋ＭＳＯ逡逑邋１00邋Ａ邋工工邐□邋ＳＬＬ－１Ａ．１６－１０邋ＭＭ邋５邋２０°－邐＿邐Ｃ３邋ＳＬＬ－１Ａ－１６－３邋＾逡逑ＱＤ邋ＳＬＬ－ＩＡ－１６－３０＾邐＇他邐＾邋＾邋％邐□邋ＳＬＬ－１Ａ－１６－１０邋＾逡逑｜邐■`幔藉巍

本文編號：2773988