【摘要】：目的:本研究旨在探討藻酸雙酯鈉納米劑型(PSS-Loaded Nanoparticle,PSS-NP)對鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)大鼠的血管內(nèi)皮功能影響的研究。方法:將SD大鼠隨機(jī)分為正常對照(Control)組和糖尿病(diabetes mellitus,DM)組,DM組采用一次性腹腔注射STZ的方法建立1型DM大鼠模型,Control組給予同等容量的檸檬酸鈉緩沖液腹腔注射。于STZ誘導(dǎo)的8周后,經(jīng)超聲心動圖檢查證實(shí)DCM大鼠模型形成,隨后將DCM大鼠隨機(jī)分為:DCM組、DCM+前列地爾(prostaglandin E1,PGE1)組、DCM+低分子肝素(low molecular weight heparin,LMWH)組、DCM+藻酸雙酯鈉(propylene glycol alginate sodium sulfate,PSS)組及DCM+PSS-NP組,各給藥組分別給予PGE1 5ug·kg~(-1)·d~(-1)、LMWH 150IU·kg~(-1)·d~(-1)、PSS20mg·kg~(-1)·d~(-1)及PSS-NP 20mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射,Control組及DCM組給予同等容量的生理鹽水腹腔注射,連續(xù)給藥4周后實(shí)驗(yàn)結(jié)束。我們每日觀察記錄大鼠的一般狀況及生存狀態(tài),于藥物治療的第2周和第4周檢測了大鼠空腹血糖和體重變化,應(yīng)用超聲心動圖檢查心臟功能改變,蘇木素伊紅(hematoxylin and eosin,HE)染色觀察胸主動脈病理變化,透射電子顯微鏡觀察心臟的心尖部心肌的微血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變,酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測胸主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(protein C receptor,endothelial,PROCR)的濃度和血清中內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)A的濃度,硝酸還原酶法測定血清中一氧化氮(nitric oxide,NO)的濃度,Western Blot檢測胸主動脈和左室心肌組織的磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)-p85、VEGFA蛋白的表達(dá)及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、eNOS磷酸化水平。結(jié)果:我們的研究發(fā)現(xiàn)PSS-NP可顯著改善DCM大鼠一般生存狀態(tài),顯著增加空腹體重(P0.01),但對空腹血糖水平改善效果不顯著(P0.05)。超聲心動圖結(jié)果顯示PSS-NP可顯著改善DCM大鼠心室壁運(yùn)動,明顯降低左心室舒張末內(nèi)徑(left ventricular internal diameter in diastole,LVIDd;P0.01)及左心室收縮末內(nèi)徑(left ventricular internal diameter in systole,LVIDs;P0.05或P0.01)和升高短軸縮短率(fractional shortening,FS;P0.05或P0.01)、射血分?jǐn)?shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF;P0.05或P0.01)及E峰與A峰比值(E wave to A wave ratio,E/A ratio;P0.01),從而提高心臟收縮和舒張功能。HE染色結(jié)果顯示PSS-NP可顯著改善DCM大鼠胸主動脈內(nèi)皮形態(tài)學(xué)改變。透射電子顯微鏡觀察結(jié)果也顯示PSS-NP可顯著改善DCM大鼠心臟的心尖部心肌的微血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),從而阻滯血管內(nèi)皮功能障礙的進(jìn)一步發(fā)展。ELISA法結(jié)果顯示PSS-NP可顯著增高胸主動脈PROCR的濃度(P0.05或P0.01),從而減輕DCM大鼠胸主動脈內(nèi)皮損傷;PSS-NP也可顯著增高血清中eNOS的濃度(P0.05或P0.01)和VEGFA的濃度(P0.01),從而減輕DCM大鼠血管內(nèi)皮損傷。硝酸還原酶法結(jié)果顯示PSS-NP可顯著增高血清中NO的濃度(P0.05或P0.01),從而減輕DCM大鼠血管內(nèi)皮損傷。Western Blot檢測結(jié)果顯示PSS-NP可顯著增加胸主動脈和左室心肌組織PI3K-p85、VEGFA蛋白的表達(dá)及Akt、eNOS磷酸化水平(P0.05或P0.01),從而改善DCM大鼠血管內(nèi)皮功能。結(jié)論:本研究提示PSS-NP可能通過上調(diào)PI3K/Akt/eNOS/VEGFA信號通路來改善STZ誘導(dǎo)的DCM大鼠的大血管及微血管內(nèi)皮功能。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R965
【圖文】：

2 各組大鼠空腹血糖及體重監(jiān)測在藥物治療的第 2 周和第 4 周，我們觀察了 PSS-NP 對糖代謝和體重變化的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1A和B可知，DCM組空腹血糖水平明顯高于Control組（P<0.01），空腹體重顯著低于 Control 組（P<0.01）；與 DCM 組相比，DCM+PGE1 組、DCM+LMWH 組、DCM+PSS 組及 DCM+PSS-NP 組空腹血糖水平無顯著性差異（P>0.05），但各治療組空腹體重明顯增加（P<0.05），尤其以 DCM+PSS-NP 組增加最顯著（P<0.01）；DCM+PSS-NP 組空腹血糖及體重與其它治療組之間無顯著性差異（P>0.05）。這些結(jié)果說明所有治療均可增加空腹體重，但對空腹血糖水平改善效果不顯著。

結(jié)果4 各組大鼠胸主動脈 HE 染色HE 染色結(jié)果如圖 3 所示，Control 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞完整，細(xì)胞核大小均一；DCM 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜不規(guī)則，內(nèi)皮細(xì)胞破壞，細(xì)胞核大小不一；DCM+PGE1 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜尚光滑，內(nèi)皮細(xì)胞尚完整，細(xì)胞核大小尚均一；DCM+LMWH 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜欠光滑，內(nèi)皮細(xì)胞尚完整，細(xì)胞核大小尚均一；DCM+PSS 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜尚光滑，內(nèi)皮細(xì)胞尚完整，細(xì)胞核大小尚均一；DCM+PSS-NP 組：大鼠胸主動脈內(nèi)膜尚光滑，內(nèi)皮細(xì)胞完整，細(xì)胞核大小均一；各治療組病理表現(xiàn)均有不同程度改善，但以 DCM+PSS-NP 組改善效果最明顯。這一結(jié)果說明 PSS-NP 可改善 DCM 大鼠胸主動脈內(nèi)皮結(jié)構(gòu)紊亂。

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文5 各組大鼠心尖部心肌的微血管內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的改變透射電鏡觀察結(jié)果如圖 4 所示，Control 組：心肌微血管內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)完全正常；DCM 組：內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞核增大，形態(tài)不規(guī)則，核染色質(zhì)邊集，胞膜呈指狀向管腔中突起；DCM+PGE1 組：心肌微血管內(nèi)膜欠光滑，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)尚正常；DCM+LMWH 組：心肌微血管內(nèi)膜不光滑，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)尚正常；DCM+PSS組：心肌微血管內(nèi)膜欠光滑，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)尚正常；DCM+PSS-NP 組：心肌微血管內(nèi)膜尚光滑，內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)尚正常；各治療組 DCM 大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)改變均得到有效地改善，但以 DCM+PSS-NP 組在一定程度上改善效果最顯著。這些結(jié)果說明 PSS-NP 可改善 DCM 大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，阻滯血管內(nèi)皮功能障礙的進(jìn)一步發(fā)展。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 趙美瞇;李智;滕贊;趙金生;于秀華;渡邊泰雄;肇麗梅;;藻酸雙酯鈉改善模型大鼠的胰島素抵抗和血脂異常(英文)[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2007年05期

2 張春虹;臧偉進(jìn);徐靜;于曉江;呂軍;荊愛玉;陳莉娜;胡浩;孫強(qiáng);;建立糖尿病心肌病動物模型方法的實(shí)驗(yàn)研究[J];衛(wèi)生研究;2006年06期

本文編號：2773822