【摘要】：實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹苽淇拱┌邢蜓趸?Graphene Oxide,GO)藥物載體,研究其負(fù)載順鉑(Cis-Dichlorodiamineplatinum,CDDP)、卡鉑(Carboplatin,CBP)和奧沙利鉑(Oxalipatin for Injection,OXA)載藥、釋藥性能,測(cè)定該載藥體系及聯(lián)合近紅外熱療的體外抗癌活性,為靶向載藥體系聯(lián)合近紅外熱療應(yīng)用于臨床治療提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法1.采用經(jīng)典的Hummers法合成GO,通過(guò)化學(xué)沉淀法制備氧化石墨烯-四氧化三鐵(GO-Fe_3O_4),再用苯胺單體對(duì)其進(jìn)行修飾制備氧化石墨烯-四氧化三鐵-聚苯胺載體(GO-Fe_3O_4-PANI),接著通過(guò)酰胺反應(yīng)對(duì)GO-Fe_3O_4-PANI進(jìn)行葉酸靶向修飾得到GO-Fe_3O_4-PANI-FA。2.采用傅立葉紅外光譜儀(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、紫外光譜分析(UV-vis)、X-射線粉末衍射(X-ray Diffraction,XRD)、掃描電子顯微鏡(Scanning Electron Microscopy,SEM)、熱失重分析(Thermogravimetric Analyzer,TGA)和ZETA電位分析(Zeta Potential,ZETA電位)等手段對(duì)GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體的結(jié)構(gòu)性能形貌進(jìn)行表征。3.采用MTT法和BSA(Bovine Serum Albumin,BSA)吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA體外生物相容性。4.通過(guò)負(fù)載CDDP、CBP和OXA藥物,測(cè)定GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA在不同環(huán)境條件(p H、溫度和抗癌藥物劑量)下的載藥和釋藥性能。5.采用MTT法初步評(píng)價(jià)GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA靶向藥物的體外抗癌活性。6.通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA靶向藥物聯(lián)合近紅外熱療對(duì)癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.制備GO、GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA并得到其結(jié)構(gòu)形貌表征信息。2.MTT實(shí)驗(yàn)和BSA吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)GO-Fe_3O_4-PANI載體濃度在0~125μg/mL之間對(duì)HL-7702細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、HepG-2細(xì)胞和RAW264.7細(xì)胞的相對(duì)增殖率均75%;GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體濃度在0~30μg/mL之間對(duì)模型細(xì)胞的相對(duì)增殖率均80%。(2)GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA與BSA相互作用分別在120 min和270 min時(shí)可達(dá)到最高吸附量。(3)改變BSA的初始濃度,可以改變吸附的效果。(4)改變pH環(huán)境,載體對(duì)BSA的吸附效果也隨之改變。3.載體載藥性能測(cè)定結(jié)果:(1)GO-Fe_3O_4-PANI載體負(fù)載CDDP、CBP及OXA的載藥率和包封率分別為83.28%和4.16%、38.38%和27.74%及84.90%和18.37%;(2)GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體負(fù)載CDDP、CBP及OXA的載藥率和包封率分別為32.78%和49.38%、25.93%和70.00%及24.27%和64.11%。4.載體釋藥性能研究結(jié)果:(1)GO-Fe_3O_4-PANI負(fù)載CDDP、CBP及OXA釋藥最佳環(huán)境分別是pH8.0和37℃,pH6.0和37℃及pH6.0和47℃,累積釋放率則分別為75%,98%和75%;(2)GO-Fe_3O_4-PANI-FA負(fù)載CDDP、CBP及OXA釋藥最佳環(huán)境分別是pH6.0和37℃,pH6.0和37℃,pH7.4和47℃,累積釋放率則分別為70%,80%和95%。5.載藥體系的體外抗癌活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)陽(yáng)性對(duì)照藥物CDDP對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和Hep G-2細(xì)胞的抑制率具有劑量依賴性,當(dāng)CDDP濃度達(dá)到8μg/mL時(shí),抑制率均達(dá)到了80%以上。GO-Fe_3O_4-PANI*CDDP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CDDP載藥體系負(fù)載上CDDP達(dá)8μg/mL時(shí)對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和Hep G-2細(xì)胞抑制率分別為25%和35%,20%和40%。(2)在研究藥物濃度0~150μg/mL范圍內(nèi)GO-Fe_3O_4-PANI*CBP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CBP對(duì)HepG-2的抑制作用均大于CBP;GO-Fe_3O_4-PANI*CBP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CBP對(duì)SMMC-7721的抑制作用均小于CBP,并存在劑量依賴性,隨著藥物CBP濃度的增大對(duì)細(xì)胞的抑制率不斷增大。(3)當(dāng)OXA濃度為30μg/mL時(shí),陽(yáng)性對(duì)照藥物OXA對(duì)HepG-2細(xì)胞和SMMC-7721細(xì)胞的抑制率分別為75%和65%。GO-Fe_3O_4-PANI*OXA和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*OXA在研究的OXA藥物濃度0~60μg/mL范圍內(nèi)抑制率低于OXA。(4)OXA藥物濃度0~60μg/mL范圍內(nèi)GO-Fe_3O_4-PANI-FA*OXA對(duì)Hep G-2細(xì)胞的抑制率均比GO-Fe_3O_4-PANI*OXA載藥體系大。6.體外近紅外熱療實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)CDDP濃度為16.00μg/mL時(shí),GO-Fe_3O_4-PANI*CDDP和GO-Fe_3O_4-PANI*CDDP+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和Hep G-2細(xì)胞的抑制率分別為23%和25%,35%和35%;GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CDDP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CDDP+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和Hep G-2細(xì)胞的抑制率分別為32%和36%,40%和42%。當(dāng)CBP濃度為150μg/mL時(shí),GO-Fe_3O_4-PANI*CBP和GO-Fe_3O_4-PANI*CBP+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和HepG-2細(xì)胞的抑制率分別為45%和40%,50%和70%;GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CBP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CBP+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和Hep G-2細(xì)胞的抑制率分別為15%和22%,44%和60%。當(dāng)OXA濃度為60μg/mL時(shí),GO-Fe_3O_4-PANI*OXA和GO-Fe_3O_4-PANI*OXA+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和HepG-2細(xì)胞的抑制率分別為30%和80%,80%和85%;GO-Fe_3O_4-PANI-FA*OXA和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*OXA+熱療對(duì)SMMC-7721細(xì)胞和的抑制率分別為37%和86%,40%和92%。實(shí)驗(yàn)結(jié)論1.通過(guò)FTIR、UV-vis、XRD、SEM、TGA和ZETA電位分析表明成功制備GO、GO-Fe_3O_4、GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA。2.MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在0~125μg/mL濃度范圍內(nèi)的GO-Fe_3O_4-PANI載體和0~30μg/mL濃度范圍內(nèi)的GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體對(duì)模型細(xì)胞是安全無(wú)毒。3.BSA吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)合載體的ZETA電位表明當(dāng)pHpI時(shí)GO-Fe_3O_4-PANI吸附BSA的量高于GO-Fe_3O_4-PANI-FA,即GO-Fe_3O_4-PANI生物相容性比GO-Fe_3O_4-PANI-FA要好。4.GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體負(fù)載CDDP、CBP和OXA在不同環(huán)境下的載藥釋藥性能研究結(jié)果表明GO-Fe_3O_4-PANI適合作為CDDP和CBP的藥物載體;GO-Fe_3O_4-PANI-FA適合作為OXA的藥物載體。5.載藥體系的體外抗癌活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體的存在對(duì)CDDP的釋放具有緩釋作用;GO-Fe_3O_4-PANI-FA*CDDP和GO-Fe_3O_4-PANI-FA*OXA載藥體系初步表現(xiàn)出FA靶向性,有望作為靶向藥物載體進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行研究;GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA載體的存在對(duì)CBP的釋放雖然具有緩釋作用,但是沒(méi)有表現(xiàn)出靶向性,需進(jìn)一步研究進(jìn)行解釋說(shuō)明。6.GO-Fe_3O_4-PANI和GO-Fe_3O_4-PANI-FA負(fù)載CDDP,CBP和OXA作為載藥體系聯(lián)合近紅外熱療較載藥體系抑制癌細(xì)胞作用強(qiáng),有望成為一種有潛力的靶向化療聯(lián)合近紅外熱療手段應(yīng)用于新型腫瘤靶向治療。
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R943;R96
【圖文】：

GO-Fe3O4和 GO-Fe3O4-PANI 的紫外特征吸收?qǐng)D譜Figure 2-2 The UV-vis spectra of GO, GO-Fe3O4and GO-Fe3O4-PANI圖 2-2 所示展示了 GO，GO-Fe3O4和 GO-Fe3O4-PANI 的紫外吸收?qǐng)D譜。GO 的紫外光學(xué)特征吸收?qǐng)D譜顯示了一個(gè)吸收峰在一個(gè)寬的肩峰在 300 nm 左右分別對(duì)應(yīng)的是 GO 碳骨架上的芳鍵的π-π*躍遷和 GO 中的含氧活性基團(tuán)羰基或者羧基上的 C遷所致。與 GO 相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相符，表明 GO 的成功制備。3O4-PANI 的紫外光學(xué)特征吸收?qǐng)D譜，在 418 nm 左右出現(xiàn)的吸NI 上苯環(huán)的π-π*躍遷引起，由于 Fe3O4和 PANI 的存在使得 G一個(gè)微小的藍(lán)移現(xiàn)象從 230 nm 藍(lán)移到 224 nm 左右[49]。O, GO-Fe3O4, GO-Fe3O4-PANI 的 XRD 表征結(jié)果與分析

圖 2-4 GO (a)、GO-Fe3O4(b)和 GO-Fe3O4-PANI (c)的掃描電鏡圖Figure 2-4 The SEM images of GO (a), GO-Fe3O4(b) and GO-Fe3O4-PANI (c)如圖 2-4 顯示了 GO (a)，GO-Fe3O4(b)和 GO-Fe3O4-PANI (c)的 SEM 圖像，對(duì)于 GO (a) 的 SEM 圖像，可以明顯的看到褶皺的波絲狀碳片，這是單層 GO 所具有的特征；而對(duì)于 GO-Fe3O4-PANI (c)的 SEM 圖像，我們可以從圖中看到 Fe3O4顆粒和 PANI 被成功的連接到 GO 表面上，形成了GO-Fe3O4-PANI 復(fù)合材料。并且 Fe3O4顆粒和 PANI 相對(duì)較均勻的分布在GO 表面上，避免了 GO 的卷曲和聚合，使其有一個(gè)相對(duì)較大的表面積，為后續(xù)負(fù)載抗腫瘤藥物提供一個(gè)更大的負(fù)載空間。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 武斌;;石墨烯空心四氧化三鐵聚苯胺納米復(fù)合材料及其制備[J];合成材料老化與應(yīng)用;2015年03期

2 譚書(shū)想;;常見(jiàn)鉑類抗腫瘤藥物耐藥機(jī)制和不良反應(yīng)的比較分析[J];中南藥學(xué);2015年05期

3 安靜;郭桂真;羅青枝;王德松;;石墨烯和石墨烯基納米復(fù)合材料的制備及在生物醫(yī)療領(lǐng)域的應(yīng)用[J];材料導(dǎo)報(bào);2015年03期

4 耿欣;何大偉;王永生;趙文;周亦康;李樹(shù)磊;;Synthesis and microwave absorption properties of graphene-oxide(GO)/polyaniline nanocomposite with Fe_3O_4 particles[J];Chinese Physics B;2015年02期

5 張龍姣;張陽(yáng)德;申玉璞;申玉坤;;葉酸修飾的氧化石墨烯裝載阿霉素的載藥性能評(píng)價(jià)[J];材料導(dǎo)報(bào);2014年12期

6 徐運(yùn)妹;李丹;張玲;童海霞;楊蕊瓊;安振宇;李文杞;;基于氧化石墨烯修飾的DNA生物傳感器用于苯酚的檢測(cè)[J];化學(xué)傳感器;2014年01期

7 劉濤;馬棟;柯波;謝民強(qiáng);;葉酸靶向載順鉑羧甲基-β-環(huán)糊精納米復(fù)合物的制備及對(duì)鼻咽癌的體外抑制效應(yīng)[J];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào);2014年01期

8 劉一;楊玉飛;白玉;劉虎威;;鉑類抗癌藥物及其作用機(jī)理的分析技術(shù)進(jìn)展[J];化學(xué)通報(bào);2013年10期

9 趙美霞;李洋;王超杰;;葉酸受體靶向性的γ-環(huán)糊精-葉酸包合物修飾的CdSe/ZnS量子點(diǎn)的合成及其生物活性[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);2013年04期

10 張達(dá);周非凡;邢達(dá);;功能化氧化石墨烯的靶向腫瘤成像與光熱治療[J];科學(xué)通報(bào);2013年07期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 徐成;氧化石墨烯復(fù)合納米材料的制備及其在藥物遞送和生物成像上的應(yīng)用[D];湖南大學(xué);2016年

2 周樂(lè);聯(lián)合近紅外熒光分子腫瘤靶向探針的熱效應(yīng)與免疫因子協(xié)同治療甲狀腺腫瘤的研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 劉婷;TROP2對(duì)宮頸癌生物學(xué)行為的影響及Anti-TROP2/HGNs近紅外熱療對(duì)宮頸癌作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

4 田正山;氧化石墨烯功能化應(yīng)用研究[D];東南大學(xué);2015年

5 陳瑞;高分子多功能納米微球的構(gòu)建與抗腫瘤研究[D];南京大學(xué);2013年

6 陳帥君;葉酸受體介導(dǎo)的載順鉑磁性納米pH敏感靶向給藥系統(tǒng)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

7 梅青松;熒光氧化石墨烯的制備及其在生物傳感器中的應(yīng)用[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2012年

8 沈順;介孔二氧化硅包覆金納米棒的腫瘤熱療—化療聯(lián)合治療研究[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

9 叢林海;金納米鏈及Anti-EGFR/Au共軛物近紅外熱療對(duì)人喉癌Hep-2細(xì)胞凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馬娜新;非共價(jià)功能化修飾的氧化石墨烯作為抗癌藥物載體的研究[D];山東大學(xué);2017年

2 潘晶晶;基于PEG修飾的GO@Au腫瘤靶向藥物控釋系統(tǒng)的構(gòu)建及基礎(chǔ)研究[D];鄭州大學(xué);2016年

3 鄭青;石墨烯葉酸復(fù)合物的生物靶向識(shí)別與傳感[D];北京交通大學(xué);2015年

4 王曉琴;新型氧化石墨烯納米粒子運(yùn)載Stat3特異性siRNA質(zhì)粒靶向治療肝癌實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2015年

5 韓博;葉酸靶向癌細(xì)胞納米熒光探針的制備及其性能研究[D];大連理工大學(xué);2015年

6 王婷婷;石墨烯復(fù)合納米材料用于抗癌藥物遞送的熒光共聚焦成像分析[D];西南大學(xué);2015年

7 周佳林;新型核殼結(jié)構(gòu)金納米材料用于腫瘤的近紅外光熱治療研究[D];浙江大學(xué);2015年

8 葉銀堅(jiān);石墨烯基多級(jí)納米復(fù)合材料的構(gòu)建及其電化學(xué)應(yīng)用研究[D];江西師范大學(xué);2014年

9 王亞培;功能化氧化石墨烯的制備及其在藥物傳輸與磁共振成像上的應(yīng)用[D];上海師范大學(xué);2013年

10 許玲;葉酸靶向IgG偶聯(lián)阿霉素的制備及體外抗腫瘤活性研究[D];華中科技大學(xué);2012年

本文編號(hào)：2732993