發(fā)布時(shí)間：2020-06-19 12:57

【摘要】：抑郁癥是一類患病率、復(fù)發(fā)率及死亡率高的精神疾病,嚴(yán)重影響患者工作與生活,在臨床上引起高度重視。沃替西汀是一種抗抑郁新藥,2013年9月30日被美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療成人重度抑郁癥(Major Depressive Disorder,MDD),其制劑形式是沃替西汀氫溴酸鹽。和傳統(tǒng)的抗抑郁藥相比,沃替西汀通過(guò)調(diào)節(jié)受體活性和抑制5-羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白再攝取兩種作用機(jī)制聯(lián)合發(fā)揮抗抑郁作用,使其有效性、安全性和耐受性更高。沃替西汀本身的水溶性較差(0.1 mg/mL),本實(shí)驗(yàn)室針對(duì)這個(gè)問(wèn)題,制備了一種新的制劑形式-沃替西汀半鹽酸鹽,作為新藥候選藥物進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。藥物代謝研究是新藥研發(fā)過(guò)程中重要的一環(huán),研究?jī)?nèi)容包括體外代謝研究和體內(nèi)代謝研究。體外代謝研究包括測(cè)定藥物體外代謝的酶促動(dòng)力學(xué)參數(shù)和確定參與代謝的CYP450酶表型,用來(lái)預(yù)測(cè)藥物在體內(nèi)的代謝清除過(guò)程和藥物的相互作用,為藥物在體內(nèi)的代謝過(guò)程研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。體內(nèi)代謝研究包括藥物在體內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)和代謝產(chǎn)物研究,為藥物的安全性、有效性提供依據(jù)。本文將沃替西汀半鹽酸鹽作為潛在的抗抑郁藥候選藥物進(jìn)行了體外和體內(nèi)代謝初步研究,并與沃替西汀原藥、沃替西汀氫溴酸鹽及鹽酸鹽進(jìn)行了系統(tǒng)比較。比較沃替西汀不同鹽晶型在體外溶解度及大鼠體內(nèi)口服吸收上的差異,并探討了溶解度和生物利用度的關(guān)系,為沃替西汀制劑提供依據(jù)。研究的主要內(nèi)容有:(1)溶解度研究用HPLC-UV法測(cè)定沃替西汀及其3種鹽(氫溴酸鹽、鹽酸鹽和半鹽酸鹽)在鹽酸溶液(0.1mol/L,pH1.0)、醋酸緩沖液(pH4.5)、磷酸緩沖液(pH6.5)、水、SDS溶液(0.2%和0.5%)中的溶解度,比較其溶解度的差異。結(jié)果顯示,在0.1mol/L鹽酸溶液和pH6.5磷酸緩沖液中,沃替西汀及其3種鹽的溶解度基本一致;在pH4.5醋酸緩沖液中,沃替西汀的溶解度最大,溶解度大小依次為:VOTVOT-HClVOT-HBrVOT-0.5HCl;在水中,溶解度大小依次為:VOT-HClVOT-HBrVOT-0.5HClVOT;在0.2%SDS溶液中,溶解度大小依次為:VOT-HBrVOT=VOT-0.5HClVOT-HCl;在0.5%SDS中,溶解度大小依次為:VOT-HBrVOT=VOT-HCl=VOT-0.5HCl。(2)沃替西汀及其鹽晶型體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究采用超高效液相色譜串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜法(UHPLC-MS/MS)建立新的大鼠血漿中沃替西汀的檢測(cè)方法,并對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的方法學(xué)驗(yàn)證。結(jié)果表明該分析方法專屬性好,線性關(guān)系良好,基質(zhì)效應(yīng)、精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性均符合要求,可用于沃替西汀在大鼠血漿中的定量分析。通過(guò)對(duì)大鼠灌胃給藥等摩爾沃替西汀10.07μmol/kg(相當(dāng)于沃替西汀3.0 mg/kg,沃替西汀氫溴酸鹽3.82mg/kg,沃替西汀鹽酸鹽3.36 mg/kg,沃替西汀半鹽酸鹽3.18 mg/kg)和33.57μmol/kg(相當(dāng)于沃替西汀10.0 mg/kg,沃替西汀氫溴酸鹽12.73 mg/kg,沃替西汀鹽酸鹽11.20mg/kg,沃替西汀半鹽酸鹽10.6 mg/kg)的沃替西汀及其3種鹽晶型,研究了其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程。研究發(fā)現(xiàn)在兩種給藥劑量下,沃替西汀及其3種鹽晶型在大鼠體內(nèi)口服吸收沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。由上述數(shù)據(jù)推測(cè),在鹽酸溶液(pH1.0)和的磷酸緩沖液(pH 6.5)中沃替西汀及3種晶型的溶解度相差不大,這可能是大鼠體內(nèi)沃替西汀多晶型口服吸收沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的原因之一。另外,影響藥物吸收的因素,除了溶解度還有別的因素,比如適當(dāng)?shù)挠退峙湎禂?shù),因此沃替西汀晶型藥物溶解度的差異并未影響其在大鼠體內(nèi)的生物利用度。(3)沃替西汀在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物分析鑒定灌胃給予沃替西汀半鹽酸鹽10mg/kg,收集血漿、尿液和糞便。采用超高效液相色譜串聯(lián)四級(jí)桿飛行時(shí)間質(zhì)譜(UHPLC-Q-TOF/MS)技術(shù)篩選和鑒定了沃替西汀在大鼠血漿、尿液及糞便中的代謝產(chǎn)物。結(jié)果發(fā)現(xiàn)了29個(gè)代謝產(chǎn)物,其中血漿中17個(gè),尿液中9個(gè),糞便中12個(gè),第一次發(fā)現(xiàn)的代謝產(chǎn)物有11個(gè)。主要的代謝途徑有甲基化、羥化、氧化和葡萄糖醛酸化。(4)沃替西汀在大鼠肝微粒體中代謝表型及酶促動(dòng)力學(xué)研究將系列濃度的沃替西汀與大鼠肝微粒體進(jìn)行共孵育,采用UHPLC-MS/MS法測(cè)定孵育液中剩余沃替西汀的濃度,利用GraphPad Prism 6.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)擬合并計(jì)算酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)。采用選擇性化學(xué)抑制劑,測(cè)定不同抑制劑對(duì)沃替西汀代謝的影響,探討大鼠肝微粒體中參與沃替西汀代謝的主要代謝酶亞型。在大鼠肝微粒體中,沃替西汀的Vmax為(23.76±2.99)ng·min~(-1)·mg~(-1);Km為(88.04±31.84)ng·mL~(-1);CLint為0.27 mL·min~(-1)·mg~(-1)。特異性抑制劑除了環(huán)丙沙星外,其他6種抑制劑對(duì)沃替西汀的代謝均有顯著的抑制作用,其中氟西汀和酮康唑?qū)ξ痔嫖魍〉囊种谱饔贸蕽舛纫蕾�。結(jié)果表明,沃替西汀在大鼠肝微粒體中被廣泛代謝,其中包括Ⅰ相CYP450酶CYP2C9,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19,Ⅱ相代謝酶SULT和UGT。
【學(xué)位授予單位】：華南理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R965
【圖文】：

圖 1-2 沃替西汀結(jié)構(gòu)式he chemical structure of v抑郁癥（Major Depressive公司聯(lián)合研發(fā)，被美國(guó)2013 年 9 月 30 日批準(zhǔn)以沃替西汀是一種新型的具備郁作用：調(diào)節(jié)受體活性環(huán)類抗抑郁藥和單胺氧沃替西汀的作用機(jī)制研究，是 5-HT3、5-HT7、5動(dòng)劑和 5-HT 轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制力學(xué)研究結(jié)果顯示，在人1 h，半衰期 t1/2平均為 66

圖 2-1A 空白血漿圖，B 空白血漿+VOT（2.5 ng/mL）+ IS (20 ng/mL)色譜圖，C S鼠灌胃給藥沃替西汀 3.0 mg/kg 后 1.0 h 的血漿樣品色譜圖Fig 2-1 Representative chromatograms of a blank plasma sample (A), a blank plasma saspiked with Vortioxetine (2.5 ng/mL) and the IS (20 ng/mL) (B), and a plasma saobtained from a rat 1.0 h after oral administration of vortioxetine (3.0 mg/kg) (C)2.5.2 線性以沃替西汀的濃度（ng/mL）為橫坐標(biāo)，以沃替西汀和內(nèi)標(biāo)卡馬西平峰面積比坐標(biāo)，采用加權(quán)最小二乘法，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖 2-2。由圖可知，大鼠血漿樣品替西汀的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為 y=0.3023X+0.0673 (R2=0.9995)，結(jié)果表明沃替西汀0.078-40.00 ng/mL 范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2720825