發(fā)布時間：2020-06-14 13:59

【摘要】：目的:通過建立原位種植結直腸癌肝轉移小鼠模型,觀察丁酸(Butyric acid)對模型小鼠免疫功能及炎癥反應相關指標的影響,探討丁酸對小鼠結直腸癌肝轉移的抑制作用及其可能的作用機制。方法:60只雄性BALB/C小鼠于盲腸壁漿膜層下注射0.2 mL 1×10~6 CT26細胞建立結直腸癌肝轉移原位種植模型。造模后第三天按體重隨機分為對照組、丁酸低劑量組[0.3 g/(kg·d)]、丁酸中劑量組[1 g/(kg·d)]和丁酸高劑量組[3 g/(kg·d)],每組15只。實驗組小鼠分別給予不同劑量三丁酸甘油酯灌胃,對照組以等體積的生理鹽水代替,每天1次,連續(xù)干預40天后處死小鼠,計算各組小鼠結直腸癌肝轉移率,胸腺指數,脾臟指數;流式細胞實驗檢測小鼠外周血T淋巴細胞亞群;中性紅法檢測小鼠脾臟巨噬細胞吞噬功能;MTT法檢測小鼠NK細胞殺傷功能;酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測小鼠血清中IL-2、IL-10和IL-12濃度水平。采用RT-PCR和Western Blot法檢測小鼠腫瘤組織內NF-κB、COX-2和TNF-αmRNA和蛋白的表達情況。結果:對照組和丁酸低、中、高劑量組小鼠的肝轉移率分別為30.77%、7.14%、0%、14.29%,與對照組相比,丁酸干預組小鼠結直腸癌肝轉移發(fā)生情況得到抑制,小鼠的胸腺指數和脾臟指數明顯增高(P0.05);丁酸干預后,模型小鼠CD3~+CD4~+T細胞、CD3~+CD8~+T細胞、CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值顯著提高(P0.05);而NK細胞的殺傷活性雖有所增強,但差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);丁酸低、中劑量組能夠有效增強小鼠巨噬細胞吞噬活性(P0.05),丁酸高劑量組小鼠巨噬細胞吞噬活性略高于對照組小鼠,但差異沒有統(tǒng)計學意義(P0.05);丁酸干預組小鼠血清中IL-2和IL-12的水平顯著提高,而IL-10的水平則明顯低于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);此外,丁酸干預還能夠下調NF-κB、COX-2和TNF-αmRNA和蛋白的表達水平(P0.05);在以上各組結果中,丁酸中劑量組的作用效果均好于丁酸其余兩組。結論:適量的丁酸能夠通過增強結直腸癌肝轉移小鼠脾臟巨噬細胞的吞噬活性,增加小鼠外周血T淋巴細胞亞群中CD3~+CD4~+T細胞和CD3~+CD8~+T細胞百分比,并調節(jié)炎性因子IL-2、IL-12和IL-10,降低腫瘤組織中炎癥介質NF-κB與COX-2、TNF-?的表達,增強小鼠抗腫瘤免疫反應,延緩炎癥進程,從而達到抑制模型小鼠結直腸癌肝轉移的作用效果。
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R965
【圖文】：

圖 1.1 BCA 法測蛋白濃度的標準曲線4.3 Western-blot（1）制膠①清洗玻璃板后再用蒸餾水沖洗晾干備用。②制膠表 1.3 SDS-PAGE 膠配制表10%分離膠（12 mL） 濃縮膠（6 mL）dd H2O 4.8 mL 4.2 mL30%丙烯酰胺 3.4 mL 990 LpH8.8 Tris 26 mL -pH6.8 Tris - 750 L10%SDS 120 L 60 L10%過硫酸銨 120 L 60 LTEMED 4.8 L 6 L（2）灌膠上樣

結果結 果組小鼠體重變化趨勢及生長情況應性喂養(yǎng)一周后，各組小鼠平均體重均呈穩(wěn)定性增長，組間無明顯差異中和術后的創(chuàng)傷造成各組小鼠平均體重出現下降趨勢，但隨著傷口的愈 3~6 周，各組小鼠的平均體重逐漸增加，實驗第 6 周各組小鼠平均體重別，對照組與丁酸干預組小鼠平均體重差異逐漸拉大。于第 7 周，各組重出現下降趨勢，其中，對照組平均體重略低于丁酸各劑量組（見圖 2.程中，各組小鼠均出現毛色無光澤，呈靜電樣改變，活動和飲食減少，變，出現腹瀉癥狀。

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3 徐玉清;;結直腸癌肝轉移治療原則和進展[A];第九屆全國腫瘤轉移學術大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學會腫瘤學年會報告集[C];2011年

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9 趙霞;葉穎江;王杉;;結直腸癌肝轉移預后因素分析[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術會議論文匯編（下冊）[C];2007年

10 賈忠;封光華;賀冠海;張健;;結直腸癌肝轉移外科治療后肝內復發(fā)的再治療探討[A];2007年浙江省外科學學術會議論文匯編[C];2007年

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7 天津市第三中心醫(yī)院肝膽外科主任醫(yī)師 舒桂明;更新結直腸癌肝轉移的切除理念[N];健康報;2012年

8 張旭;結直腸癌肝轉移治療新途徑[N];中國醫(yī)藥報;2011年

9 中華醫(yī)學會外科分會胃腸學組 秦新裕邋許劍民;結直腸癌肝轉移診治指南解讀[N];健康報;2008年

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6 郭春光;結直腸癌肝轉移相關分子標志物的篩選與鑒定[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2008年

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