【摘要】：目的(1)明確花旗松素在體外對破骨細(xì)胞生成和功能的影響。(2)探討花旗松素在體內(nèi)對卵巢切除小鼠骨丟失及其他方面的影響。方法(1)體外實(shí)驗(yàn):用RANKL分別誘導(dǎo)細(xì)胞系RAW 264.7和小鼠原代骨髓單核細(xì)胞(加入巨噬細(xì)胞集落形成因子M-CSF)向破骨細(xì)胞分化,并加入不同濃度的花旗松素予以干預(yù)。通過抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、抗酒石酸酸性磷酸酶活性檢測、骨吸收實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞骨架纖維形肌動蛋白(F-Actin)環(huán)染色、破骨細(xì)胞特異性基因和蛋白檢測等探討花旗松素對破骨形成和功能的影響。(2)體內(nèi)實(shí)驗(yàn):通過切除C57/BL6雌鼠卵巢建立骨質(zhì)疏松動物模型,實(shí)驗(yàn)組給予腹腔注射花旗松素,對照組給予相同劑量的鹽水。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)通過對各組小鼠骨組織進(jìn)行切片染色和μ-CT掃描進(jìn)行形態(tài)學(xué)和組織學(xué)評估,并通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測各組小鼠外周血清中炎性因子水平,探討花旗松素在體內(nèi)對卵巢切除小鼠骨丟失及其他影響。結(jié)果在體外實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)花旗松素能夠抑制破骨細(xì)胞形成和骨吸收功能;抑制NF-κB、C-Fos和MAPK的激活,并降低破骨細(xì)胞特異性基因的表達(dá),包括TRAP、MMP-9、Cathepsin K、C-Fos、NFATc1和RANK;抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和AP-1的核轉(zhuǎn)錄;阻止活性氧(ROS)的產(chǎn)生。上述作用機(jī)制可能通過抑制NF-κB、MAPKs和AKT蛋白通路起作用。此外,在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,我們發(fā)現(xiàn)花旗松素可以抑制破骨細(xì)胞活性和降低體內(nèi)血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和RANKL的水平,減輕了卵巢切除誘導(dǎo)的骨丟失。結(jié)論(1)花旗松素抑制破骨細(xì)胞生成和功能,緩解小鼠卵巢切除所致的骨丟失。(2)花旗松素可能成為一種治療破骨細(xì)胞相關(guān)疾病的新策略。
【圖文】：

Taxifolin結(jié)構(gòu)

IC50測定
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R965

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本文編號：2691378