【摘要】：急性腹瀉(Acute diarrhea,AD)是腹瀉型疾病的一種,發(fā)病急促,周期較短,其主要病變部位在小腸,臨床表現(xiàn)為腹痛、嘔吐、排便頻率增加等癥狀。特別是對于嬰幼兒,容易引起脫水、微量元素短缺和生長發(fā)育緩慢等障礙。有研究表明,患者在發(fā)生AD時,及時補充Zn元素可以有效縮短腹瀉持續(xù)時間和腹瀉病程。本課題制備了一種新型復合補液鹽,在補充電解質(zhì)的同時增加Zn元素的吸收,且本文以質(zhì)量源于設(shè)計(Quality by design,QbD)理念為指導對其制備工藝進行了優(yōu)化,開發(fā)了能量色散X射線熒光光譜(Energy dispersive X-ray fluorescence spectroscopy,EDXRF)法對Zn含量進行質(zhì)控,最后利用番瀉葉誘導小鼠AD模型,通過HE染色、細胞因子變化、免疫組化、蛋白印記等實驗考察復合補液鹽的作用機制。主要研究內(nèi)容如下:(1)以QbD理念為指導制備復合補液鹽:評估篩選關(guān)鍵質(zhì)量屬性是混合均勻度和干燥失重,關(guān)鍵物料屬性是原料的流動性以及粒度。確認處方:每包含有氯化鉀0.375g、氯化鈉0.650g、枸櫞酸鈉0.725g、無水葡萄糖3.375g、葡萄糖酸鋅0.140g。經(jīng)過風險評估篩選出關(guān)鍵工藝參數(shù)是初混、總混時間,最后選用Design expert軟件進行兩因素三水平的全因子實驗,獲得模擬方程RSD(28)1.75-0.033A(10)0.17B,預測優(yōu)化RSD為0.217%時,混合均勻度最高,驗證試驗表明模型擬合較好,并建立控制空間為初混30min,總混40~45min。(2)EDXRF法對復合補液鹽中Zn含量的質(zhì)控:Zn元素標準曲線為y(28)0.7027x-80.24,其中R~2為0.9942,說明樣品中Zn含量與X射線熒光強度線性關(guān)系良好;Zn元素的檢測限是2.32?g/ml、定量限是7.04?g/ml;6份平行樣品Zn元素檢測結(jié)果的RSD是1.85%;準確度實驗中三個水平的回收率均在98%-102%以內(nèi);對制備的兩批樣品和中間產(chǎn)品的檢測結(jié)果符合要求,說明采用EDXRF法對復合補液鹽中Zn含量進行檢測是可行的,同時也可用于過程控制。(3)復合補液鹽對AD的作用機制研究:采用番瀉葉誘導小鼠AD模型,復合補液鹽低、中、高劑量組都能夠明顯降低小鼠的稀便率、稀便級、腹瀉指數(shù)和體重降低百分率;采用HE染色觀察小腸組織發(fā)現(xiàn),復合補液鹽低、中、高劑量組還可以有效減輕小鼠小腸粘膜組織病理改變;采用酶聯(lián)免疫法觀察小鼠血清和小腸組織中的炎癥因子改變,發(fā)現(xiàn)低、中、高劑量組的復合補液鹽可以明顯降低小鼠血清和小腸組織中的IL-8、TNF-α的水平,但對抑炎因子IL-4、IL-10無顯著變化;接著通過免疫組化實驗,發(fā)現(xiàn)復合補液鹽高劑量組陽性率稍有上升;最后采用Western blot法對Claudin、Occludin、ZO-1、NF-κB蛋白表達水平進行檢測,進一步證實復合補液鹽對AD有著顯著的治療效果。
【圖文】：

圖 2.1 處方因素分析魚刺圖Fig.2.1 Fishbone chart of formulation由圖 2.1 以及預實驗和相關(guān)文獻資料得出，輔料的種類和用量對產(chǎn)品制備著性影響，所以在最終復合補液鹽的制備中沒有添加輔料；而原料的流動性度對處方開發(fā)以及工藝研究有著顯著性的影響，即 CMAs 確認為原料的流動、粒度。.5 處方確認.5.1 原料性質(zhì)考察.5.1.1 吸濕性分別對 5 種原料的吸濕特性（以吸濕平衡曲線表示）進行測定，確定其臨對濕度（Critical Relative Humidity，CRH），，以便為生產(chǎn)、貯藏環(huán)境以及處計提供參考，具體操作步驟如下：稱取氯化鉀、氯化鈉、枸櫞酸鈉、無水葡、葡萄糖酸鋅適量，鋪滿于稱量瓶底部，厚度約 2mm，稱定其重量（m1）入盛有不同濃度的飽和鹽溶液干燥器上部，于 25℃恒溫恒濕箱中儲存 24h，

飽和鹽溶液對應(yīng)相對濕度數(shù)值見表 2.5，5 種原料吸濕平衡曲線見圖 2.2。表 2.5 飽和鹽溶液對應(yīng)相對濕度表Tab.2.5 Saturated salt solution corresponding to relative humidity table飽和鹽溶液類型 相對濕度%醋酸鉀飽和溶液 22氯化鎂飽和溶液 33碳酸鉀飽和溶液 43溴化鈉飽和溶液 57氯化鈷飽和溶液 65氯化鈉飽和溶液 75氯化鉀飽和溶液 85硫酸鉀飽和溶液 97
【學位授予單位】：江蘇大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R943;R96

【參考文獻】

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本文編號：2679591