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生物蛋白活性分子及藥物檢測體系的構(gòu)建及機理研究

發(fā)布時間:2020-04-04 21:01
【摘要】:生物分子的研究使人們從基因水平上了解了一些疾病的發(fā)病機理,并且設(shè)計分子探針來對生物內(nèi)部分子含量進行了定量的檢測,為各種疾病的發(fā)生提供了一定的理論基礎(chǔ),與此同時為臨床醫(yī)學(xué)中的使用劑量提供了一定的理論指導(dǎo),和大量的科學(xué)依據(jù)。隨著藥物檢測的不斷發(fā)展,納米探針檢測技術(shù)的出現(xiàn),它不僅為人類對藥品劑量的使用提供了一定的理論依據(jù)與此同時在人類實際生活中也具有重要的意義。本文利用氮摻雜碳量子點的熒光性質(zhì),將其分別作為納米探針復(fù)合物對魚精蛋白,以及令其直接作為熒光傳感器的形式對肝素進行痕量檢測。本論文的主要研究內(nèi)容如下:(1)將檸檬酸置于單乙醇胺中,通過簡單加熱實現(xiàn)快速形成、大規(guī)模的合成氮摻雜熒光碳點。所得的氮摻雜碳量子點在370 nm處的光激發(fā)下,在458 nm處產(chǎn)生了較強的熒光發(fā)射,其最大的吸收波長為365.085 nm。脫氧核糖核苷酸能夠增強該氮摻雜碳量子點的熒光并且具有相關(guān)線性關(guān)系。因而制備了氮摻雜碳點(NCDs)與脫氧核糖核苷酸的雜交納米復(fù)合物(納米探針)。并將其成功用于檢測魚精蛋白。其原理是:DNA與氮摻雜碳量子點通過靜電作用相結(jié)合,增強了氮摻雜碳量子點的熒光,隨著魚精蛋白的加入,魚精蛋白競爭結(jié)合DNA,從而使得體系的熒光得到恢復(fù),據(jù)此,建立了一種基于NCDs熒光性質(zhì)定量檢測魚精蛋白的方法。在實驗條件各方面最佳情況下,該方法具有簡便、選擇性好等優(yōu)良特性,該分析方法的線性檢測范圍為1-10μg.mL~(-1),檢出限可達0.61μg.mL~(-1)。(2)利用由上至下的液相加熱法制備了氮摻雜碳量子點(NCDs),肝素能增強該碳量子點的熒光且具有相關(guān)線性關(guān)系。鑒于此的現(xiàn)象,設(shè)計了一種以氮摻雜碳量子點為熒光傳感器去檢測肝素的分析方法。該檢測方法利用NCDs與肝素之間強烈的靜電作用,使得NCDs的熒光增強,從而對肝素的含量進行檢測。在實驗條件各方面達到最佳情況下,該分析方法的線性檢測范圍為0.13~2.63 U/mL,檢出限為0.01 U/mL。實際樣品加標(biāo)回收率介于93.88%~101.23%之間。納米分子探針具備了光化學(xué)穩(wěn)定、水溶性好、表面積大等等的特性,納米分子出現(xiàn)的意義大大提高了傳統(tǒng)的生物分子探針的檢測性能。合成碳量子點的基礎(chǔ)性元素是碳,與過去人們經(jīng)常使用的熒光材料相比較,現(xiàn)在的材料生物安全性更好,相對生物分子活性干擾來說,也比過去的那些合成材料更小。和所熟知的重金屬離子相比較來說,碳量子點不僅可以在普通的光照的條件下就能夠發(fā)出明亮的光,與此同時它們具有著激發(fā)光較寬而且連續(xù)、光穩(wěn)定性較高、發(fā)射波長可調(diào)控等特點,F(xiàn)在,由于氮原子本身具有孤對電子,當(dāng)?shù)舆M入碳骨架后,它們將會有效的來調(diào)節(jié)碳點本身的性質(zhì),例如表面或者局部、電子特征等化學(xué)特性,因此氮原子摻入到碳點中是一個關(guān)鍵?傊,本文利用NCDs的熒光性質(zhì),構(gòu)建了一種納米探針,對生物分子魚精蛋白,以及藥物肝素進行痕量檢測,這種方法操作簡便,且具有較深的實際意義。不僅為分子生物學(xué),甚至是生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的研究都提供了一定的研究理論基礎(chǔ),同時為一些疾病發(fā)生以及前期預(yù)防治療提供了一定的幫助。并且對現(xiàn)代醫(yī)學(xué)提供了新的發(fā)展思路。
【圖文】:

透射電鏡,透射電鏡,熒光量子產(chǎn)率,山西師范大學(xué)


山西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文長從 360 nm 調(diào)至 480 nm 時,觀察到該紅移至 518 nm 處。這種依靠激發(fā)波長變?yōu)榱W拥某叽绮痪灰约氨砻姘l(fā)射缺陷氮摻雜碳量子點的熒光量子產(chǎn)率可以高米材料的熒光量子產(chǎn)率都要高。該氮摻的是,在室溫下,經(jīng)近一年的儲存后,,。將其放在 350 nm 的紫外燈照射下,

瓊脂糖凝膠電泳,密度分析,發(fā)光區(qū),靜電


NCDs/DNA 的 DNA 帶也比較微弱,但幾乎沒有 DNA 可以跟復(fù)雜的 ACD 相結(jié)合(圖2-6 中 3),因此該條帶較亮。此外,密度分析該凝膠的發(fā)光區(qū)顯示,70%的 DNA 在和NCDs 結(jié)合之后不在凝膠中遷移。由此,證實了靜電是形成混合物 NCDs/DNA 的驅(qū)動力。
【學(xué)位授予單位】:山西師范大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R91

【參考文獻】

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1 郭楠;崔煒;魯靜朝;都軍;劉凡;謝瑞芹;楊曉紅;谷國強;楊秀春;;靜脈注射肝素鈉和達肝素鈉對血小板激活影響的對比研究[J];中國心血管雜志;2008年05期



本文編號:2614070

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