【摘要】：真菌是自然界的第二大生物類群,其分布廣泛,物種多樣性極為豐富。目前真菌的物種數(shù)量保守估計(jì)為150萬(wàn)種,但已經(jīng)被人類認(rèn)知的僅有約6%,而進(jìn)行過(guò)生物與化學(xué)研究的物種比例則更低。真菌的物種與生態(tài)多樣性導(dǎo)致了其次級(jí)代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)與活性的多樣性,是活性天然產(chǎn)物的重要來(lái)源之一,在新藥研發(fā)中發(fā)揮了巨大的作用。上世紀(jì)三十年代抗細(xì)菌藥物青霉素的發(fā)現(xiàn),在治療細(xì)菌感染疾病中的地位舉足輕重。一個(gè)世紀(jì)以來(lái),人類從真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物中陸續(xù)開(kāi)發(fā)了降低膽固醇的洛伐他汀、免疫抑制劑環(huán)孢霉素以及治療多發(fā)性硬化癥的芬戈默德等重磅藥物,足以證明真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物在藥物研發(fā)中的重要地位。然而,真菌活性次級(jí)代謝產(chǎn)物研究近年來(lái)面臨著日益嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),人們已經(jīng)越來(lái)越難以從普通來(lái)源(土壤)的真菌中發(fā)現(xiàn)新結(jié)構(gòu)的次級(jí)代謝產(chǎn)物,很大程度上因?yàn)檫@些菌株易于采集、培養(yǎng),導(dǎo)致其被過(guò)度研究。于是,一些來(lái)源于特殊生存環(huán)境的真菌資源,例如蟲生、植物內(nèi)生、低溫、高溫和海洋真菌等,開(kāi)始得到了人們的關(guān)注。上述真菌在與其他物種互作或在適應(yīng)特殊生存環(huán)境的過(guò)程中,逐步進(jìn)化出獨(dú)特的生存策略,使其更可能產(chǎn)生結(jié)構(gòu)新穎多樣的次級(jí)代謝產(chǎn)物,從而成為理想的化學(xué)研究資源。濕地來(lái)源真菌是指生長(zhǎng)在天然或人工形成的沼澤地等帶有靜止或流動(dòng)水體的成片淺水區(qū),還包括在低潮時(shí)水深不超過(guò)6米的水域中的一類真菌,濕地環(huán)境被認(rèn)為是生產(chǎn)力最高的自然生態(tài)系統(tǒng)之一,擁有從低等生物到高等生物的多種生物類群,對(duì)維持地球生態(tài)系統(tǒng)平衡具有不可替代的作用。該類真菌是濕地微生物群體的重要組成部分,并且由于長(zhǎng)期受到濕地環(huán)境高生產(chǎn)力、多生物類群、多生態(tài)功能的影響,具有產(chǎn)生結(jié)構(gòu)類型豐富的次級(jí)代謝產(chǎn)物的潛力。盡管我國(guó)擁有大量的濕地資源,但近年來(lái)對(duì)濕地來(lái)源真菌的化學(xué)研究仍主要集中在紅樹(shù)林濕地環(huán)境來(lái)源的真菌資源,其他濕地環(huán)境來(lái)源真菌的化學(xué)研究明顯不足,亟待加強(qiáng)�；诒狙芯拷M對(duì)特殊生境真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的長(zhǎng)期研究經(jīng)驗(yàn),本課題以不同濕地環(huán)境采集的菌株為研究材料,對(duì)其經(jīng)過(guò)小規(guī)模發(fā)酵獲得的產(chǎn)物進(jìn)行初步的活性篩選,并通過(guò)比較其HPLC指紋,最終確定了兩株濕地來(lái)源真菌,Paraconiothyrium sporulosum與Pycnidiophora dispersa,作為化學(xué)研究對(duì)象。通過(guò)培養(yǎng)條件的優(yōu)化,包括改變培養(yǎng)基成分以及發(fā)酵時(shí)間等,比較發(fā)酵產(chǎn)物的HPLC和HPLC MS指紋,確定了最終培養(yǎng)條件,并制備了粗提物。采用不同分離手段,共分離得到了34個(gè)化合物,其中11個(gè)為新結(jié)構(gòu),并通過(guò)質(zhì)譜、核磁共振、圓二色譜以及X-ray單晶衍射等多種波譜技術(shù)確定了所有新化合物的結(jié)構(gòu)。同時(shí),對(duì)部分化合物進(jìn)行了初步的腫瘤細(xì)胞毒活性和抗菌活性評(píng)價(jià)。濕地來(lái)源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的化學(xué)研究尚處于初步階段,本課題通過(guò)對(duì)兩株不同濕地環(huán)境來(lái)源菌株的化學(xué)研究,獲得了不同結(jié)構(gòu)類型的新活性次級(jí)代謝產(chǎn)物,為濕地來(lái)源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的深入研究與評(píng)價(jià)提供了線索與材料。
【圖文】：

圖 1-4.化合物 15 的單晶圖合物 15 進(jìn)行了手性拆分，在拆分過(guò)程中發(fā)現(xiàn)化合物 15 在 3 個(gè)峰（圖 1-5），對(duì)三個(gè)峰分別進(jìn)行質(zhì)譜分析，發(fā)現(xiàn)按照（15a）和峰 2（15b）（約為 1:1）是 15 的一對(duì)對(duì)映異構(gòu)為了確定 15a 和 15b 的絕對(duì)構(gòu)型，對(duì)化合物 15 進(jìn)行了，根據(jù) Snatzke 環(huán)戊烯酮規(guī)則62, 15a 和 15b 在 330 365 負(fù)和正 Cotton 效應(yīng)，從而確定其絕對(duì)構(gòu)型分別為 1′S (1 和 15b 分別進(jìn)行手性分析，發(fā)現(xiàn)一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體皆可被 發(fā)生了自消旋。另外，峰 3（化合物 13）表明 15 存在部物 2-羥基-2,4-二甲基-3(2H)-苯并呋喃酮（圖 1-9 中化合

圖 1-5. 化合物 15 的 HPLC 手性拆分圖（CHIRALPAKAD-H; 5 μm; 4.6 ×250mm; 4% 2-propanol in hexanes for 60 min; 0.8 mL/min）由于化合物 5 與 15 具有同樣的半縮酮結(jié)構(gòu)，，因而對(duì)化合物 5 也進(jìn)行了手性拆分，發(fā)現(xiàn)化合物5在手性HPLC拆分時(shí)也出現(xiàn)了一對(duì)1:1的對(duì)映異構(gòu)體（圖1-7）。同時(shí)，拆分后的對(duì)映異構(gòu)體也發(fā)生了自消旋。但在 HPLC CD 分析（圖 1-8）中無(wú)法確定化合物 5 的對(duì)映異構(gòu)體的絕對(duì)構(gòu)型。
【學(xué)位授予單位】：軍事科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R914

【參考文獻(xiàn)】

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1 何軍偉;高昊;劉杏忠;姚新生;;濕地真菌Talaromyces flavus中2個(gè)新的聚酯類化合物[J];中國(guó)中藥雜志;2015年17期

2 譚倪;邵長(zhǎng)倫;陶李明;何麗仙;佘志剛;林永成;;南海紅樹(shù)林內(nèi)源真菌#2240的3個(gè)蒽醌類次級(jí)代謝產(chǎn)物的鑒別和藥理活性[J];應(yīng)用化學(xué);2009年03期

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1 張勤;四株特殊生境真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究[D];廈門大學(xué);2014年

本文編號(hào)：2593106