【摘要】：目的探討新型孕激素衍生物3α-羥基-3β-甲氧基甲基-16,17-亞甲基-孕甾-20-酮(CPU)對(duì)硝普鈉(SNP)誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制。方法用終濃度為0.01,0.10,1.00μmol·L-1的CPU預(yù)處理30 min,然后加入SNP共同作用24 h。采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,分光光度計(jì)法檢測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)活性氧(ROS)、線粒體膜電位和細(xì)胞凋亡率;Western蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)Bcl-2、Bax和活化的胱天蛋白酶3蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與細(xì)胞對(duì)照組比較,SNP模型組PC12細(xì)胞的存活率顯著降低,LDH的釋放明顯增加(P0.01),MDA生成增多,SOD活性降低,ROS水平升高,線粒體膜電位水平降低,細(xì)胞凋亡率由細(xì)胞對(duì)照組(1.20±0.14)%增加至(55.52±3.56)%(P0.01);Bcl-2蛋白表達(dá)降低,而Bax表達(dá)升高,Bax/Bcl-2比值升高,同時(shí)胱天蛋白酶3被激活(P0.01)。與模型組比較,CPU 0.01,0.10和1.00μmol·L-1作用24 h后,細(xì)胞存活率顯著升高,LDH的釋放減少(P0.01),MDA的生成量減少,SOD活性增加,ROS累積減少,線粒體膜電位水平升高(P0.01);凋亡細(xì)胞分別降至(37.79±4.85)%,(22.31±4.25)%和(10.39±2.65)%;Bcl-2蛋白表達(dá)增加,Bax和活化的胱天蛋白酶3表達(dá)降低。結(jié)論 CPU對(duì)SNP所致?lián)p傷的PC12細(xì)胞有一定的保護(hù)作用,其作用機(jī)制可能與其抗氧化和抗凋亡作用有關(guān)。

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2568643