發(fā)布時間：2019-11-13 23:59

【摘要】：目的：研究FW-04-806對HER2陽性胃癌細胞的體內(nèi)外抗腫瘤活性及其機制，探討其與Lapatinib的聯(lián)合作用，為大環(huán)雙內(nèi)酯化合物FW-04-806這種潛在的Hsp90抑制劑的開發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：（1）四甲基偶氮唑藍(MTT)法體外檢測FW-04-806對HER2陽性胃癌細胞NCI-N87、OE19的增殖抑制作用；（2）集落形成法檢測FW-04-806對HER2陽性胃癌細胞的集落形成抑制能力；（3）通過FITC/PI雙染法檢測FW-04-806對HER2陽性胃癌細胞的凋亡作用；（4）通過PI染色法檢測FW-04-806對胃癌細胞周期的影響；（5）Western blot法檢測對胃癌細胞蛋白的影響；（6）免疫共沉淀法檢測蛋白間相互作用；（7）免疫組化觀察Hsp90客戶蛋白的表達變化；（8）體內(nèi)異種移植瘤模型檢測FW-04-806的抑瘤率。 結(jié)果：（1）FW-04-806呈劑量依賴性抑制胃癌細胞NCI-N87、OE19、AGS、SGC-7901的增殖，對應(yīng)半數(shù)抑制率分別為24.17、29.61、58.13、60.59μmol·L-1，結(jié)果顯示FW-04-806對HER2陽性胃癌細胞（NCI-N87、OE19）更敏感；（2）長期集落形成實驗結(jié)果顯示，F(xiàn)W-04-806對HER2陽性胃癌細胞NCI-N87、OE19的集落形成能力有明顯的抑制作用；（3）隨著FW-04-806作用NCI-N87和OE19細胞藥物濃度的增加，流式細胞儀檢測到的細胞凋亡率逐漸增加；（4）FW-04-806明顯改變細胞周期，減少S期，阻滯胃癌細胞周期于G2-M期；（5）FW-04-806阻滯HER2下游細胞信號通路，抑制HER2、Akt和ERK的磷酸化，增加凋亡蛋白cleaved caspase3、cleaved parp的表達；（6）免疫共沉淀結(jié)果顯示，F(xiàn)W-04-806作用胃癌細胞OE19，誘使Hsp90/CDC37復(fù)合物解離，減少CDC37與Hsp90結(jié)合（；7）免疫組化切片圖可以觀察到，F(xiàn)W-04-806明顯減少Hsp90客戶蛋白HER2、Akt的表達；（8）FW-04-806在異種移植瘤模型中有效抑制腫瘤生長，與對照組相比，200mg/kg實驗組抑瘤率為48.0%，，P0.01，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；（9）FW-04-806聯(lián)合Lapatinib具有協(xié)同作用，使增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)增強。 結(jié)論：（1）FW-04-806對HER2陽性的胃癌細胞具有良好的體內(nèi)外抗腫瘤作用。（2）FW-04-806可能是一種潛在的Hsp90抑制劑，通過干擾CDC37與Hsp90的結(jié)合，抑制Hsp90功能，從而降解Hsp90客戶蛋白HER2和Akt，阻滯HER2下游細胞信號通路。（3）FW-04-806與Lapatinib聯(lián)合用藥具有協(xié)同抑制作用。該協(xié)同作用可能是通過增強抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡這兩個途徑來實現(xiàn)。
【圖文】：

FW-04-806分子結(jié)構(gòu)和摩爾質(zhì)量

圖 2 FW-04-806 對胃癌細胞增殖抑制作用的量效曲線-806 明顯抑制 HER2 陽性胃癌細胞集落形成果表明 FW-04-806 能夠抑制 HER2 陽性胃癌細胞 NCI-N細胞增殖停滯，與對照組相比較，F(xiàn)W-04-806 明顯抑制細
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R96

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 黃維;陳宏;賈緯;傅慧靈;許建華;江紅;鄭衛(wèi);;FW-04-806的結(jié)構(gòu)分析及其抗腫瘤活性研究[J];中國抗生素雜志;2011年07期

2 ;Significance of expression of heat shock protein90α in human gastric cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2003年11期

本文編號：2560543