【摘要】：目的觀察吡格列酮(Pioglitazone)對趨化素誘導成骨細胞代謝過程的影響,探討吡格列酮改善成骨細胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導機制。方法將成骨細胞隨機分組,選取適宜濃度的趨化素(Chemerin)進行誘導后,加入吡格列酮,觀察成骨細胞活力變化。ELISA法檢測細胞趨化蛋白1(MCP-1)、E選擇素(E-selection)的影響,采用Western blot法檢測成骨細胞黏附分子1(ICAM-1)、需肌醇跨膜激酶/核酸內(nèi)切酶1(inositol-requiring transmembrane kinase/endonuclease 1,IRE1)、葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(Glucose-regulated protein 78,GRP78)的表達變化,探究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應在此過程中作用。結(jié)果 MTT法檢測提示加入Pioglitazone后對成骨細胞活力未見明顯影響;與對照組相比,成骨細胞ICAM-1、MCP-1、E-selection、IRE1、GRP78、在Chemerin組的指標較高(P0.05),而Pioglitazone呈濃度依賴性地抑制Chemerin所誘導的上述效應,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),當吡格列酮濃度為20μmol/L時效果最顯著。結(jié)論內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激可能參與趨化素誘導成骨細胞代謝中的細胞凋亡過程,吡格列酮可抑制趨化素的作用,對成骨細胞具有保護功能,其機制可能與抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激反應相關。
【圖文】：

每次5min，加ECL熒光液顯色，上機檢測。用目標條帶與內(nèi)標條帶(β-actin)的積分吸光度值(Integratedabsorbance，IA)的比值的百分率表示IκB-α和ICAM-1的表達水平。1.7統(tǒng)計學處理采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，所有實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差(mean±SD)表示，采用t檢驗進行組間比較，P＜0.05為有統(tǒng)計學差異。2結(jié)果2.1MTT法檢測成骨細胞活力各組細胞處理后酶標儀檢測表明:與對照組和趨化素模型組比較，不同濃度的吡格列酮干預組(10μmol/L、20μmol/L)的細胞活力未見明顯降低，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，見圖1。圖1吡格列酮對趨化素誘導的成骨細胞活力的影響1:對照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－6mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組;4:1×10－5mol/L濃度趨化素+20μmol/L吡格列酮組;與對照組相比較，P＞0.05Fig．1Effectofpioglitazoneonviabilityofosteoblastsinducedbychemerin1:Controlgroup;2:Chemerin1×10－5mol/Lgroup;3:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;vs．control，P＞0.052.2吡格列酮對趨化素誘導的原代成骨細胞MCP-1含量表達的影響與對照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預組和20μmol/L吡格列酮干預組的MCP-1含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干預組濃度的升高，原代成骨細胞的MCP-1含量下降(P＜0.05)，且在吡格列酮濃度為20μmol/L時效果最為顯著，提示吡格列酮呈濃度依賴性抑制趨化素對原代成骨細胞MCP-1含量的增加作用。見圖2。圖2吡格列酮對趨化素誘導的成骨細胞MCP-1含量的影響1:對照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－5mol/L濃?

10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;vs．control，P＞0.052.2吡格列酮對趨化素誘導的原代成骨細胞MCP-1含量表達的影響與對照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預組和20μmol/L吡格列酮干預組的MCP-1含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干預組濃度的升高，原代成骨細胞的MCP-1含量下降(P＜0.05)，且在吡格列酮濃度為20μmol/L時效果最為顯著，提示吡格列酮呈濃度依賴性抑制趨化素對原代成骨細胞MCP-1含量的增加作用。見圖2。圖2吡格列酮對趨化素誘導的成骨細胞MCP-1含量的影響1:對照組;2:1×10－5mol/L濃度趨化素組;3:1×10－5mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組;4:1×10－5mol/L濃度趨化素+20μmol/L吡格列酮組;與對照組相比較，*P＜0.05;與1×10－5mol/L濃度趨化素組比較，，#P＜0.05;與1×10－5mol/L濃度趨化素+10μmol/L吡格列酮組比較，＆P＜0.05Fig．2EffectofpioglitazoneonMCP-1productioninosteoblastsinducedbychemerin1:Controlgroup;2:Chemerin1×10－5mol/Lgroup;3:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/Lgroup;4:Chemerin1×10－5mol/L+pioglitazone20μmol/Lgroup;*P＞0.05vs．control;#P＜0.05，comparedwithChemerin1×10－5mol/Lgroup;＆P＜0.05，comparedwithChemerin1×10－5mol/L+pioglitazone10μmol/mLgroup2.3吡格列酮對趨化素誘導的原代成骨細胞E-selection含量表達的影響與對照組比較，趨化素模型組、10μmol/L吡格列酮干預組和20μmol/L吡格列酮干預組的E-selection含量均升高(P＜0.05);與趨化素模型組比較，隨著吡格列酮干

【參考文獻】

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本文編號：2556710