【摘要】：目的：觀察NT注射液單次及反復靜脈輸注Beagle犬后的藥動學特征，動物毒性反應、毒性靶器官和可能的延遲毒性，為NT注射液的臨床應用提供依據(jù)。 方法：藥代動力學研究選用Beagle犬18只，按性別隨機分為3組，每組6只，雌雄各半，分別為低劑量組（5mg/kg）、中劑量組（15mg/kg）和高劑量組（45mg/kg）。中劑量組連續(xù)給藥4次，每天給藥一次，其他各組均單次給藥，用輸液泵控制給藥時長為30min。分別于首次和末次（中劑量組）給藥前、給藥開始后5、15、30、35、45、60、90、120、150、180min，于前肢或后肢皮下靜脈取血約1ml，分離血漿后檢測血藥濃度。長期毒性研究選用Beagle犬40只，按性別隨機分為5組，每組8只，雌雄各半。分別為生理鹽水對照組、溶媒對照組、供試品低（10mg/kg）、中（30mg/kg）、高（90mg/kg）劑量組。生理鹽水對照組給予0.9％氯化鈉注射液；溶媒對照組給予NT注射液輔料。5組動物的給藥容量均為9ml/kg，用輸液泵控制給藥時長為30min。每天給藥1次，連續(xù)給藥28天。試驗期間對動物進行生理指標觀察，包括體重、體溫、心電圖、眼科、血細胞計數(shù)、凝血功能、血液生化、尿常規(guī)等。高劑量動物由于毒性反應較大，給藥4次后安樂死。其他組別動物(每組雌雄各3只動物)于第28次給藥后次日進行安樂死，將剩余的雌雄各1只動物停藥觀察4周后再實施安樂死。對死亡及安樂死動物進行大體解剖觀察，并對主要臟器組織進行病理學鏡檢。 結(jié)果：Beagle犬在給予NT注射液后，雌雄動物表現(xiàn)出相似的藥動學特征。單次靜脈給藥后，低、中、高劑量組的t1/2分別為2.74±0.95、4.44±2.27和11.00±2.24min，Cmax分別為927.87±187.74、4458.84±1259.01、21260.54±10915.83ng/ml，AUC0-180min分別為385.03±89.93、1657.16±535.55、9227.954301.73h ng/kg。在5-45mg/kg劑量范圍內(nèi)，Cmax和AUC均隨劑量增加而增大。低、中、高劑量組的給藥劑量比為1:3:9，Cmax及AUC0-180min比值分別為1:4.81:22.91及1:4.30:23.97。中劑量組連續(xù)給藥4次，末次給藥的t1/2為11.24±10.80min，Cmax和AUC0-180min分別為2539.73±703.48ng/ml和1407.59±319.57h ng/kg，平均蓄積因子為0.90。長期毒性研究給藥第5天，90mg/kg劑量組1只動物死亡，其余7只動物由于瀕死而進行了安樂死；10mg/kg劑量組動物未見與供試品毒性相關的異常反應。30mg/kg劑量組除1只動物陸續(xù)出現(xiàn)唾液分泌過多、剩食、少便或無便、精神不振、牙垢、齒齦潮紅、眼分泌物外，其它動物未見與供試品毒性相關的異常反應。90mg/kg劑量組動物給藥第2天開始陸續(xù)出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道等的異常反應，主要表現(xiàn)為呼吸急促、喘息、腹式呼吸、呼吸困難、鼻分泌物，精神不振、俯臥、無力、痙攣，軟便、稀便、便血、惡心、嘔吐、肛周污穢、少便或無便、剩食，眼分泌物，臨床癥狀隨給藥時間延長呈加重趨勢，于第5天死亡或安樂死。試驗期間，10和30mg/kg劑量組動物的體重、體溫、心電圖參數(shù)、眼科檢查、尿液指標未見有毒理學意義的變化。10mg/kg劑量組的血細胞計數(shù)、凝血功能指標和血液生化指標未見有毒理學意義的變化。與同期生理鹽水對照組比較，90mg/kg劑量組動物第5天的體重、體溫降低，部分動物的心電圖波形異常，表現(xiàn)為P波高尖，與大體解剖所見右心房/右心室擴張相吻合，但組織學檢查未見右心房/右心室有明顯的病理改變。血漿AST和CK未見異常。與生理鹽水對照組比較，30mg/kg劑量組給藥第5、14和28天的Mono和90mg/kg劑量組第5天的Mono升高。30mg/kg劑量組第5、28天的FIB升高，90mg/kg劑量組第5天的PT縮短，APTT延長，F(xiàn)IB升高。30mg/kg劑量組第14、28天的TP，第5、14和28天的GLB升高，第14、28天的A/G降低。90mg/kg劑量組第5天的A/G降低，ALP、TP、GLB、TCH升高。30和90mg/kg劑量組其它血液學指標和血液生化指標未見有毒理學意義的變化。病理檢查結(jié)果顯示，第5天進行解剖的90mg/kg劑量組8只動物均可見肺臟膨大，呈暗紅色或紅白相間，伴或不伴氣管內(nèi)有泡沫狀液體，胸腺、脾臟��；顯微鏡下的形態(tài)學特點為肺泡壁毛細血管擴張充血，肺泡腔內(nèi)可見漿液性滲出物，其中有大量紅細胞、一定量纖維素、少量中性粒細胞和肺泡巨噬細胞，胸腺、脾臟、淋巴結(jié)的淋巴細胞空竭/壞死，伴有淋巴細胞數(shù)量減少。給藥期和恢復期結(jié)束時按計劃安樂死后解剖的10和30mg/kg劑量組動物均未見與供試品相關的病理改變。在10~90mg/kg劑量范圍內(nèi)，NT的平均Cmax及AUC（0-藥后60min）隨劑量增加而增加。首次給藥后，低、中、高劑量組NT的平均Cmax和AUC（0-藥后60min）比值分別為1:4.98:15.08及1:5.60:19.50；第28次給藥后，低、中劑量組NT的平均Cmax和AUC（0-藥后60min）比值分別為1:4.35及1:4.83。低、中劑量組動物第28天與第1天的AUC(0-藥后60min)和Cmax的比率均在0.90-1.3之間，未見明顯藥物蓄積。給藥期間，溶媒對照組1只動物，10mg/kg劑量組2只動物，30mg/kg劑量組2只動物給藥局部腫脹（僅持續(xù)1天），其它動物給藥局部未見異常。給藥局部腫脹的發(fā)生率和持續(xù)時間未見劑量-反應相關性。給藥局部顯微鏡檢查結(jié)果顯示，各組均有部分動物發(fā)生靜脈周圍炎。生理鹽水對照組和90mg/kg劑量組可見皮下出血，溶媒對照組和10、30、90mg/kg劑量組個別動物可見靜脈炎。生理鹽水對照組與各實驗組動物靜脈周圍炎和皮下出血的發(fā)生率和病變程度相似，無明顯劑量反應關系，可能為注射針的機械性損傷。 結(jié)論：NT在Beagle犬體內(nèi)的消除較快，血藥濃度隨劑量增加而增加，，血藥濃度增加比例大于劑量增加比例，但無藥物體內(nèi)蓄積，且無性別差異。NT注射液反復靜脈輸注給予Beagle犬4周的安全劑量為10mg/kg，致死劑量為90mg/kg。大劑量下主要的毒性反應為呼吸急促、喘息、腹式呼吸、呼吸困難、俯臥、無力、痙攣，軟便、稀便、便血、惡心、嘔吐、肛周污穢、剩食，PT縮短，APTT延長，Mono、FIB、TP、GLB升高，A/G降低。30mg/kg劑量組動物停藥4周后毒性反應可恢復。NT注射液反復靜脈輸注Beagle犬4周后，明確的毒性靶器官為肺臟，可能的毒性靶器官為胸腺、脾臟和淋巴結(jié)。
【圖文】：

圖3.1 NT注射液靜脈輸注給予Beagle犬后的血 濃度2.4 代謝動力學參數(shù)單次給藥時，低、中、高劑量組的 t1/2分別為 2.74±0.95、4.44±2.27、11.00±2.24in，平均 Cmax分別為 927.87±187.74、4458.84±1259.01、21260.54±10915.83 ng/ml，均 AUC0-180 min分別為 385.03±89.93、1657.16±535.55、9227.95±4301.73 h·ng/kg，見表 3.5。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R965

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 王海勇;王林;楊曉明;;基于c-Met信號通路的抗癌藥物研究進展[J];國際藥學研究雜志;2007年06期

2 馬靜方;楊春雨;仇會會;葉麗平;;堿性成纖維細胞生長因子和Bcl-2在卵巢上皮性惡性腫瘤中的表達及意義[J];廣東醫(yī)學;2013年02期

3 耿海云;陳映霞;;VEGF/VEGFR信號通路抑制劑療效預測的研究進展[J];臨床腫瘤學雜志;2013年09期

4 桂賢,劉會敏;腫瘤多藥耐藥發(fā)生機制的研究進展[J];上海醫(yī)學;2005年02期

5 潘輝林;黃巖;宋慧勝;何耀武;李健;;氨磷汀對行化療的腫瘤患者的保護作用[J];實用癌癥雜志;2011年03期

6 卜遲文;楊全德;劉景宏;陳茜;;垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因及堿性成纖維細胞生長因子在乳腺癌組織中的表達及意義[J];實用臨床醫(yī)藥雜志;2012年07期

7 劉福艷;劉福強;謝元超;于英俊;;液質(zhì)聯(lián)用技術在藥物分析中的應用研究進展[J];中國藥品標準;2008年06期

8 趙燕;趙瑩;王緒成;;靶向給藥在腫瘤治療中的應用進展[J];中國醫(yī)院用藥評價與分析;2008年01期

9 金惠;劉力鋒;梁雷;鄧衛(wèi)平;劉建文;;新型組蛋白去乙�；敢种苿〥WP0016誘導神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U251周期阻滯及凋亡作用研究[J];神經(jīng)藥理學報;2011年01期

10 陳武兵;蔡志毅;;中藥體外誘導腫瘤細胞凋亡的分子機制研究進展[J];醫(yī)學研究雜志;2013年09期

本文編號：2538685