【摘要】：背景 癲癇是一種常見多發(fā)的以大腦神經元異常放電引發(fā)突然短暫反復發(fā)作為特征的神經系統(tǒng)疾病，嚴重威脅人類生命與健康。目前臨床上癲癇的治療主要依靠藥物療法，，但現(xiàn)有的藥物無法適用所有患者且毒副作用大。 瑞替加濱是唯一一個被FDA批準上市的用于成人部分發(fā)作輔助治療的KCNQ鉀通道激動劑藥物。KCNQ鉀通道在神經興奮性調節(jié)中起著基礎而關鍵的作用，以瑞替加濱為代表的KCNQ激動劑因而被寄予厚望，其抗癲癇作用機制被廣泛研究，但是目前已有的研究多為體外電生理記錄，而對與癲癇相關腦區(qū)（如海馬）神經元電活動的影響不清楚。 目的 建立穩(wěn)定的自由活動動物腦電信號采集系統(tǒng)，通過對自由活動正常大鼠海馬神經元電活動的記錄分析，研究以瑞替加濱為代表的KCNQ鉀通道激動劑對大鼠海馬神經元放電的影響，探索該類化合物治療癲癇的神經電生理作用機制，為發(fā)展新型抗癲癇藥物提供理論指導。 方法 本實驗采用健康雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠（250-350g），行常規(guī)開顱手術，在海馬CA1區(qū)手術植入單電極2*4陣列，動物術后常規(guī)護理，自由飲食，恢復7天。電生理記錄時，動物處于自由活動狀態(tài)，其腦部電極可穩(wěn)定記錄神經元放電，且這種放電可持續(xù)存在1-2周。運用多通道在體記錄系統(tǒng)，將前置放大器接于電極板，電信號傳輸進入采集器，儲存于Recorder16系統(tǒng)，數(shù)據(jù)進行離線分析。 運用多通道在體記錄系統(tǒng)觀察瑞替加濱對自由活動大鼠海馬神經元的影響，實驗時先穩(wěn)定記錄電信號10min，腹腔注射給予動物15mg/kg瑞替加濱，再連續(xù)穩(wěn)定記錄和采集電信號360min。此外，觀察瑞替加濱能否反轉鉀通道抑制劑4-氨基吡啶（4-AP）或XE991導致的自由活動大鼠海馬神經元的興奮性升高，電信號采集方法同前，在腹腔注射給予4-AP（5mg/kg）電信號穩(wěn)定記錄20min后或XE991（10mg/kg）電信號穩(wěn)定記錄120min后，腹腔注射給予瑞替加濱15mg/kg，穩(wěn)定記錄360min。所有電信號均存儲于電腦中，采用Offline Sorter進行離線分析。 結果 在我們實驗室成功建立了基于動物實驗的腦電信號采集系統(tǒng)，實現(xiàn)了對自由活動動物腦電活動的記錄。運用這個系統(tǒng)，我們將海馬神經元進行分類并考察瑞替加濱對海馬神經元放電的影響。我們發(fā)現(xiàn)大鼠腹腔注射15mg/kg瑞替加濱能顯著抑制海馬錐體神經元與中間神經元的自發(fā)放電。此外，同劑量瑞替加濱能翻轉鉀通道抑制劑4-AP (5mg/kg,0.2ml/100g)或XE991(10mg/kg,0.2ml/100g)導致的海馬神經元興奮性升高。 結論 我們的工作首次采用自由活動大鼠在體記錄方式考察KCNQ鉀通道激動劑瑞替加濱對大鼠神經元核團放電的影響，發(fā)現(xiàn)該藥物對海馬錐體神經元和中間神經元的興奮性均有抑制作用，并可逆轉鉀通道抑制劑導致的興奮性升高，部分揭示了瑞替加濱治療癲癇的作用機制。
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圖片說明： ptic drugon theBlockade ofsodiumchannelsBlockade ofcalciumchannelsInhibition ofglutamateexcitationIncrease inGABA levelActpothanarbital 1912 + + +azepine1963 +te 1974 +ntin 1993 +ate 1995 + + +ide 2005 + +ine 2011 替加濱抗癲癇作用機制研究癲癇藥物中，瑞替加濱（Retigabine，化學式見圖 1-1）是 2011 年品管理局批準上市的用于成人部分發(fā)作性癲癇治療的 KCNQ 鉀通KCNQ 通道開放促進鉀離子外流，胞外鉀離子增加導致細胞膜的低神經元的興奮性，最終呈現(xiàn)抗癲癇效應[30]。
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圖片說明： 第 1 章 引言度的瑞替加濱對短時程去極化刺激產生的動作電位沒有影響[32]。對海馬中經元，瑞替加濱抑制動作電位產生過強去極化的數(shù)量達到減少中間神經元奮性[33]。從 17 個進行手術病人取皮層切片，瑞替加濱能降低自發(fā)尖波的發(fā)數(shù)[34]。前人及本實驗室的體外實驗證明瑞替加濱可增強除 KCNQ1 外的所NQ 通道，并可以抑制神經元放電（圖 1-2）[35]。V.Armand 報道在海馬切，瑞替加濱顯著性的減少 4-AP 所致海馬癲癇樣放電[36]。瑞替加濱對在膠細胞由 4-AP 誘導產生的興奮上有明顯鎮(zhèn)靜作用[37]。小鼠皮下給予 4-AP，明顯增加，前直強直，無序的奔跑[38,39]。有研究報道瑞替加濱能逆轉 XE致的神經細胞的發(fā)放[40]。另有研究報道瑞替加濱對神經元 GABA 電流BA 的分泌也有增強作用[41]。
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R965

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 馮麗梅;夏桂枝;任榕娜;楊朋范;周琳瑛;梅珍;;兒童難治性癲vN致vN灶的病理改變[J];中國當代兒科雜志;2013年05期

2 龔含嫣;張溥明;;多通道神經信號分析方法及其應用(英文)[J];生理學報;2011年05期

本文編號：2515721