【摘要】：目的探討煙酸對(duì)HepG2細(xì)胞攝取及代謝LDL-C的影響,尋找煙酸改善血脂異常,減緩動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的相關(guān)分子機(jī)制,為其臨床用藥提供指導(dǎo)。方法采用油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積;酶法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量;熒光流式檢測(cè)細(xì)胞表面LDLR豐度分布;qPCR及Western blot檢測(cè)LDLR、SREBP2以及PCSK9的mRNA及蛋白含量變化。結(jié)果經(jīng)煙酸處理的HepG2細(xì)胞,油紅O陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及細(xì)胞內(nèi)紅染脂滴增多,細(xì)胞內(nèi)TC、FC水平明顯增高(P0.05);LDLR mRNA含量無(wú)差異(P0.05),而細(xì)胞膜表面LDLR分布豐度及細(xì)胞內(nèi)LDLR的含量明顯增加(P0.05);煙酸對(duì)SREBP2的表達(dá)無(wú)影響,卻能明顯下調(diào)PCSK9的表達(dá)。結(jié)論煙酸可能通過(guò)下調(diào)PCSK9的表達(dá),減少PCSK9成熟體蛋白含量,使得LDLR降解減少,進(jìn)而增加LDLR含量,促進(jìn)HepG2細(xì)胞攝取LDL-C。
[Abstract]:Aim to investigate the effect of nicotinic acid on the uptake and metabolism of LDL-C in HepG2 cells, and to find out the molecular mechanism of nicotinic acid in improving dyslipidemia and slowing down the process of atherosclerosis, so as to provide guidance for its clinical use. Methods Lipid accumulation was observed by oil red O staining, cholesterol content was measured by enzyme method, LDLR abundance distribution on cell surface was measured by fluorescence flow cytometry, mRNA and protein contents of LDLR,SREBP2 and PCSK9 were detected by qPCR and Western blot. Results in the HepG2 cells treated with nicotinic acid, the number of oil red O positive cells and the red staining lipid droplets in the cells were increased, and the intracellular TC,FC level was significantly increased (P0.05). There was no difference in the content of LDLR mRNA (P0.05), but the distribution abundance of LDLR on the surface of cell membrane and the content of LDLR in the cell increased significantly (P0.05), while nicotinic acid had no effect on the expression of SREBP2, but could significantly down-regulate the expression of PCSK9. Conclusion nicotinic acid may decrease the content of PCSK9 mature body protein by down-regulating the expression of PCSK9 and decrease the degradation of LDLR, then increase the content of LDLR and promote the uptake of LDL-C. by HepG2 cells.
【作者單位】： 常德市婦幼保健院遺傳科;南華大學(xué)生物技術(shù)系;常德市職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系;
【基金】：湖南省科技廳項(xiàng)目(No2015SK2038) 湖南省衛(wèi)生計(jì)生委項(xiàng)目(NoB2015-49) 湖南省高層次衛(wèi)生人才“225”工程項(xiàng)目基金 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金(2015) 湖南省教育廳項(xiàng)目(No15C1217) 湖南省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No2014JJ3104) 湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(No2015-230) 衡陽(yáng)市科技局項(xiàng)目(No2015KJ15) 南華大學(xué)“十二五”科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)基金;南華大學(xué)留學(xué)回國(guó)人員啟動(dòng)基金(No2013XQD52);南華大學(xué)大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(2014,2015) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No81600291) 湖南省研究生科研創(chuàng)新項(xiàng)目(NoCX2016B474)
【分類號(hào)】：R96

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