【摘要】：目的:研究苦參堿類生物堿聯(lián)合恩替卡韋抗耐藥乙型肝炎病毒(HBV)的作用效果以及對p38 MAPK,鈉離子-�；悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NTCP)表達(dá)的影響。方法:以解放軍第302醫(yī)院自行構(gòu)建的恩替卡韋耐藥乙型肝炎病毒復(fù)制細(xì)胞株Hep G2.A64為模型,采用CPE,CCK-8分別考察苦參堿類生物堿氧化苦參堿、苦參堿、槐果堿、槐定堿和核苷類藥物恩替卡韋單獨(dú)用藥及兩者聯(lián)合用藥的細(xì)胞毒性;采用酶聯(lián)免疫法(ELISA),實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR),蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blot)分別觀察聯(lián)合用藥對Hep G2.A64細(xì)胞HBs Ag分泌,HBV DNA復(fù)制,p38和NTPC mRNA表達(dá),細(xì)胞中p38和p-p38蛋白表達(dá)水平的影響。結(jié)果:與單獨(dú)用藥比較,氧化苦參堿和恩替卡韋聯(lián)合用藥72 h后能顯著抑制HBs Ag分泌,HBV DNA復(fù)制(P0.05),同時(shí)能顯著降低NTCP基因和蛋白的表達(dá)水平以及磷酸化p38蛋白水平。結(jié)論:氧化苦參堿聯(lián)合恩替卡韋可能通過下調(diào)NTCP的表達(dá)同時(shí)抑制p38蛋白磷酸化達(dá)到抗病毒的效果。氧化苦參堿聯(lián)合恩替卡韋能顯著增強(qiáng)抗耐藥HBV病毒的效果。
[Abstract]:Aim: to study the anti-hepatitis B virus (HBV) effect of matrine alkaloids combined with entecavir and its effect on the expression of p38 MAPK, sodium ion-taurocholic acid cotransporter (NTCP). Methods: the anti-hepatitis B virus replication cell line Hep G2.A64, which was established by ourselves in 302 Hospital of PLA, was used as the model. The alkaloid oxymatrine and sophorine were examined by CPE,CCK-8. Cytotoxicity of sophoridine and nucleoside drugs Enticavir alone and the combination of them; Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA),) was used to detect the expression of p38 and NTPC mRNA in Hep G2.A64 cells by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (Western blot). The effect of p38 and p-p38 protein expression in cells. Results: the combination of oxymatrine and enecavir for 72 h could significantly inhibit the secretion of, HBV DNA by HBs Ag (P0.05), and significantly reduce the expression of NTCP gene and protein and the level of phosphorylated p38 protein. Conclusion: oxymatrine combined with entecavir may have antiviral effect by down-regulating the expression of NTCP and inhibiting the phosphorylation of p38 protein. Oxymatrine combined with enecavir could significantly enhance the resistance to HBV virus.
【作者單位】： 成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室四川省中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室——省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地;解放軍第302醫(yī)院全軍中藥研究所;解放軍第302醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合肝病診療與研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(8133090) 山東省協(xié)同創(chuàng)新項(xiàng)目(XTCX2014B01-06)
【分類號】：R96

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 岳風(fēng)娥;程華;;恩替卡韋治療乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎2例[J];肝臟;2007年01期

2 周秀云;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎近期療效觀察[J];實(shí)用肝臟病雜志;2007年05期

3 繆正秋;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎14例近期療效報(bào)道[J];肝臟;2007年05期

4 梁艷麗;梅存金;;恩替卡韋治療慢性重型乙型肝炎療效觀察[J];淮海醫(yī)藥;2008年01期

5 郭翔;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎近期療效觀察[J];臨床肝膽病雜志;2008年06期

6 嚴(yán)志剛;梁杰;劉建鋒;張志玲;王洋;薛寧;馬會忠;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎療效觀察[J];人民軍醫(yī);2008年07期

7 王魯文;嚴(yán)少南;向龍奎;龔作炯;;恩替卡韋治療慢性重型乙型肝炎療效觀察[J];肝臟;2008年04期

8 楊龍;楊陽;龔守軍;;恩替卡韋治療失代償期乙型肝炎肝硬化1年隨訪觀察[J];肝臟;2008年02期

9 姜杰;王慧;吳淑娟;;恩替卡韋治療慢性重型乙型肝炎療效觀察[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版);2009年01期

10 林鋒;吳濤;符健;吳彪;邱平;許小珍;蔡篤運(yùn);賈杰;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎臨床觀察[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2009年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 鐘淵斌;;恩替卡韋治療慢性乙型重型肝炎近期療效的觀察[A];病毒性肝炎慢性化、重癥化基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

2 王魯文;嚴(yán)少南;向龍奎;龔作炯;;恩替卡韋治療慢性重型乙型肝炎的療效觀察[A];全國第2屆中西醫(yī)結(jié)合傳染病學(xué)術(shù)會議暨國家中醫(yī)藥管理局第1屆傳染病協(xié)作組會議論文匯編[C];2008年

3 紀(jì)冬;陳國鳳;李永綱;邵清;韓萍;;恩替卡韋治療慢性乙肝病毒感染患者21例療效觀察及文獻(xiàn)回顧[A];中華醫(yī)學(xué)會全國第九次感染病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

4 張建;白鵠;朱玉成;謝士達(dá);;恩替卡韋聯(lián)合血漿置換治療慢性乙型重型肝炎22例[A];第一屆全國疑難重型肝病大會、第四屆全國人工肝及血液凈化學(xué)術(shù)年會論文集[C];2008年

5 林秉滔;莊海珍;陳進(jìn);;恩替卡韋治療慢性乙型重癥肝炎療效觀察[A];第十次浙江省中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

6 楊聯(lián)勇;;恩替卡韋治療慢性乙型肝炎感染的綜述[A];2006年慢性乙型肝炎治療進(jìn)展研討會資料匯編[C];2006年

7 林秉滔;莊海珍;陳進(jìn);;恩替卡韋治療慢性乙型重癥肝炎療效觀察[A];2008年浙江省感染病、肝病學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2008年

8 胡濤;呂志平;;杞菊地黃丸聯(lián)合恩替卡韋治療肝腎陰虛型慢性乙型肝炎的臨床研究[A];六味地黃類中成藥與方劑——臨床應(yīng)用研究論文集[C];2012年

9 楊澍;王洪;徐強(qiáng)勝;王雪剛;曹麗紅;洪婉媚;;恩替卡韋對慢性乙型重型肝炎搶救意義分析[A];第6屆全國疑難及重癥肝病大會論文集[C];2011年

10 楊靜;朱萱;王河;;恩替卡韋治療失代償期乙型肝炎肝硬化的療效觀察[A];第二十五屆全國中西醫(yī)結(jié)合消化系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 本報(bào)記者 陳國東;國產(chǎn)恩替卡韋打造市場新格局[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年

2 國家上海新藥安全評價(jià)研究中心主任 鄧中平;恩替卡韋治療乙型肝炎的安全性研究[N];中國勞動(dòng)保障報(bào);2005年

3 侯金林;恩替卡韋：慢性乙型肝炎治療的新選擇[N];中國勞動(dòng)保障報(bào);2005年

4 陸志城;恩替卡韋：有望成為治療慢性乙肝的一線藥物[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

5 駐京記者 王丹;恩替卡韋實(shí)際臨床數(shù)據(jù)公布[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

6 記者 靖九江;恩替卡韋可降低肝癌發(fā)生率[N];中國醫(yī)藥報(bào);2012年

7 譚德明;乙肝治療又添新將——恩替卡韋[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2003年

8 記者　張旭;長期接受恩替卡韋治療患者沒有產(chǎn)生耐藥[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

9 曉劍;恩替卡韋用于慢性乙型肝炎的治療[N];中國勞動(dòng)保障報(bào);2005年

10 國家發(fā)改委醫(yī)藥工業(yè)信息中心站 郭文;恩替卡韋溢價(jià)之路潛藏市場危機(jī)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 嚴(yán)景妍;黃芪注射液聯(lián)合恩替卡韋抗乙型肝炎病毒感染機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 嚴(yán)景妍;黃芪注射液聯(lián)合恩替卡韋抗乙型肝炎病毒感染機(jī)理研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 馬科;恩替卡韋治療乙肝病毒相關(guān)慢加急性肝功能衰竭的臨床研究[D];華中科技大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 谷路娟;養(yǎng)肝清熱方聯(lián)合恩替卡韋對濕熱內(nèi)蘊(yùn)證HBeAg陽性慢性乙型肝炎臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 李健;聚乙二醇干擾素聯(lián)合恩替卡韋治療HBeAg陽性慢性乙型肝炎患者的臨床觀察[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 郝光濤;恩替卡韋分散片人體生物利用度和生物等效性研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

4 姚，

本文編號：2458403