【摘要】：目的研究蜂毒素對(duì)人肝癌細(xì)胞(Hep G2、SMMC-7721)生長(zhǎng)的抑制作用及其機(jī)制。方法采用MTT法檢測(cè)蜂毒素對(duì)Hep G2和SMMC-7721細(xì)胞增殖的抑制作用,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)細(xì)胞中microRNA-203(mir-203)以及PIK3CA mRNA的表達(dá)變化,Western blot法檢測(cè)磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)的表達(dá)變化,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染人mir-203 mimics過(guò)表達(dá)mir-203后應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot檢測(cè)mir-203對(duì)PI3K/AKT信號(hào)通路的作用。結(jié)果與正常組比較,蜂毒素處理組細(xì)胞增殖明顯受到抑制,并呈濃度依賴性;實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示蜂毒素(1、2、4mg/L)可以明顯升高mir-203的表達(dá),PIK3CA mRNA的表達(dá)無(wú)明顯改變;Western blot法結(jié)果顯示蜂毒素(1、2、4 mg/L)可以降低PI3K以及P-AKT蛋白的表達(dá)。在Hep G2和SMMC-7721細(xì)胞中過(guò)表達(dá)mir-203后,與正常組及轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照組比較,PIK3CA mRNA的表達(dá)無(wú)明顯改變但PI3K以及P-AKT的蛋白表達(dá)降低。結(jié)論蜂毒素能抑制Hep G2和SMMC-7721細(xì)胞的增殖,其機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)mir-203的表達(dá),進(jìn)而在轉(zhuǎn)錄后水平靶向抑制PI3K的表達(dá),抑制PI3K/AKT信號(hào)通路的活化。
[Abstract]:Objective to study the inhibitory effect of melittin on the growth of human hepatoma cell line (Hep G _ 2 + SMMC-7721) and its mechanism. Methods MTT assay was used to detect the inhibitory effect of melittin on the proliferation of Hep G2 and SMMC-7721 cells. The expression of microRNA-203 (mir-203) and PIK3CA mRNA in Hep G2 and SMMC-7721 cells were detected by real-time quantitative PCR, and phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) was detected by, Western blot method. The expression of phosphorylated protein kinase B (P-AKT) was detected by real-time quantitative PCR and Western blot. The effect of mir-203 on PI3K/AKT signaling pathway was detected by real-time quantitative PCR and Western blot. Results compared with the normal control group, the cell proliferation of the treated group was inhibited in a dose-dependent manner, and the results of real-time quantitative PCR showed that the expression of mir-203 was significantly increased by melittin (1 2 mg / L), but the expression of PIK3CA mRNA was not changed. The results of Western blot assay showed that the expression of PI3K and P-AKT protein was decreased by melittin (1 mg/L). After overexpression of mir-203 in Hep G2 and SMMC-7721 cells, the expression of PIK3CA mRNA did not change, but the expression of PI3K and P-AKT decreased. Conclusion melittin can inhibit the proliferation of Hep G2 and SMMC-7721 cells by up-regulating the expression of mir-203 and then inhibiting the expression of PI3K and the activation of PI3K/AKT signal pathway at post-transcriptional level.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院;安徽醫(yī)科大學(xué)肝病研究所安徽省高校產(chǎn)業(yè)共性技術(shù)研究院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(編號(hào):81273526)
【分類號(hào)】：R96

【參考文獻(xiàn)】

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1 孫曉杰;黃常志;;PI3K-Akt信號(hào)通路與腫瘤[J];世界華人消化雜志;2006年03期

【共引文獻(xiàn)】

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2 劉鵬啟;丁樹哲;邵月;;P53對(duì)線粒體的能量調(diào)控與運(yùn)動(dòng)適應(yīng)的可能機(jī)制[J];廣州體育學(xué)院學(xué)報(bào);2008年03期

3 于舒飛;王燕;;EGFR野生型肺腺癌的治療策略[J];癌癥進(jìn)展;2012年06期

4 毛蜀;何密斯;劉桂元;張雄;李昱;唐俐;;姜黃素對(duì)髓母細(xì)胞瘤PI3K/Akt信號(hào)通路的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年06期

5 王玉招;顏宏利;唐冠楠;林恒榮;章意亮;孫樹漢;;融合蛋白AnxB1-MLT的表達(dá)、純化及其對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC7721和HepG2增殖的抑制作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年11期

6 蒲俏虹;王偉章;朱家勇;金小寶;;慢性粒細(xì)胞白血病格列衛(wèi)耐藥相關(guān)微小RNA的研究進(jìn)展[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年21期

7 胡欣春;魏益平;彭金華;喻東亮;徐建軍;;miR-4686對(duì)A549細(xì)胞球增殖的調(diào)控作用及其機(jī)制研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年04期

8 傅軍;吳雪英;王守銘;;微小RNA與乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系的研究進(jìn)展[J];福建醫(yī)藥雜志;2014年01期

9 翟斡;沈嫣婧;沈一平;丁志山;;山核桃葉總黃酮誘導(dǎo)人多發(fā)性骨髓瘤U266細(xì)胞株凋亡作用研究[J];甘肅中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年02期

10 文武;陳國(guó)棟;賀更生;賀軍;;miRNA在肝細(xì)胞癌患者預(yù)后中的應(yīng)用[J];中國(guó)醫(yī)藥科學(xué);2014年03期

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3 柴小姝;消積飲維持治療晚期肺癌及其對(duì)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路影響的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年

4 陳漪;攜帶IL-24基因的溶瘤腺病毒抑制原發(fā)性肝癌肺轉(zhuǎn)移的作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

5 宋欣燕;人胚胎生殖干細(xì)胞在體內(nèi)外對(duì)卵巢癌生長(zhǎng)抑制的研究[D];山東大學(xué);2008年

6 茍興春;HAb18G/CD147調(diào)控肝癌細(xì)胞自噬的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

7 邵月;運(yùn)動(dòng)地P53調(diào)節(jié)能量代謝信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的影響[D];華東師范大學(xué);2010年

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4 王偉;MRP-1/CD9、MMP-2在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];南昌大學(xué);2011年

5 陳勝民;PTEN、PI3K和Akt蛋白表達(dá)與卵巢漿液性癌臨床病理學(xué)的相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2011年

6 劉羽燕;雌二醇對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響及其機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

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8 柳亞娟;胃癌組織中Ghrelin和Obestatin表達(dá)相關(guān)性及臨床意義[D];青海大學(xué);2011年

9 任遠(yuǎn);HuR基因和survivin基因在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及臨床意義[D];寧波大學(xué);2011年

10 李霞;PTEN、PI3Kp110α和p-AktSer473蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義[D];石河子大學(xué);2011年

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2 張晨,劉嶺,翟東霞,李勇,李柏;蜂毒素的抗腫瘤生物活性及其穩(wěn)定性研究[J];浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年06期

3 王瑞平;黃舒然;周錦勇;鄒璽;;蜂毒素與化療藥物的協(xié)同作用及其可能機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志;2014年02期

4 凌昌全,黃雪強(qiáng),劉嶺;蜂毒素體外抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年07期

5 凌昌全,黃雪強(qiáng),劉嶺,王勇姿,張亞妮;蜂毒素緩釋制劑瘤內(nèi)注射減毒增效作用的實(shí)驗(yàn)研究[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年07期

6 游育紅，鄔大元，黃自強(qiáng);蜂毒素對(duì)大鼠血小板內(nèi)鈣濃度的影響[J];福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1995年04期

7 秦剛;李海東;徐蘇洋;李玉梅;孫劍;陳永強(qiáng);;蜂毒素對(duì)內(nèi)皮祖細(xì)胞微血管形成能力及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2磷酸化作用的影響[J];腫瘤防治研究;2014年04期

8 李玉梅;陳永強(qiáng);顧偉;;蜂毒及其主要成分蜂毒素抗腫瘤機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志;2008年01期

9 游育紅;黃自強(qiáng);李常春;;蜂毒素的心血管藥理作用[J];福建醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1993年04期

10 張晨;付大鵬;韓大躍;李勇;凌昌全;;蜂毒素對(duì)肝癌細(xì)胞磷脂酶A_2的影響[J];臨床軍醫(yī)雜志;2010年02期

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1 胡坤生;施樺;蔣秋興;張衡濤;;蜂毒素與紫膜相互作用的光譜學(xué)研究[A];第九次全國(guó)生物物理大會(huì)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2002年

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2 王志軍;八肋游仆蟲中心蛋白性質(zhì)和功能的研究[D];山西大學(xué);2007年

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2 李曙光;蜂毒素誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞周期阻滯及機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

3 劉嶺;蜂毒素提取純化方法與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2002年

4 彭永海;蜂毒素對(duì)小鼠肝癌H_（22）細(xì)胞增殖與實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2002年

5 王怡蘋;蜂毒素對(duì)胃癌細(xì)胞系SGC-7901細(xì)胞的抑制作用及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

6 翟東霞;蜂毒素誘導(dǎo)人肝癌細(xì)胞株Bel-7402惡性表型轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 王朋景;蜂毒素對(duì)人肝癌HepG-2細(xì)胞株裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用及部分機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

8 章慧;蜂毒素下調(diào)HDAC2抑制HepG2增殖的作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

9 曹清心;蜂毒素通過(guò)調(diào)節(jié)HMGB1及其相關(guān)信號(hào)通路抑制人肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

10 吳寶明;蜂毒素對(duì)SGC-7901細(xì)胞株增殖的影響及其部分作用機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2426243