【摘要】：目的:建立應(yīng)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS)測定大鼠血漿(包括富含血小板血漿)中5-羥色胺濃度的方法,并將其應(yīng)用于感染后腸易激綜合征模型大鼠體內(nèi)5-HT的測定。方法:血漿樣品在加入甲巰咪唑(內(nèi)標(biāo))后用苯甲酰氯作為衍生試劑,以四硼酸鈉為催化試劑,室溫下進(jìn)行柱前衍生。樣品在甲醇沉淀蛋白后采用ESI電離源在正離子模式下檢測,用Agilent Zorbax eclipse plus C18色譜柱,甲醇-水溶液為流動相洗脫,流速為1.0ml·min-1。結(jié)果:經(jīng)衍生后5-HT在大鼠富含血小板血漿及血漿中其線性范圍及定量限均符合測定要求,日內(nèi)、日間精密度及基質(zhì)效應(yīng)均15%;腸易激綜合征大鼠血漿中游離5-HT相較正常組大鼠顯著增高。結(jié)論:本方法快速、靈敏、專屬性強(qiáng)且重現(xiàn)性好,可用于大鼠血漿中5-HT濃度的測定。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the determination of serotonin in rat plasma (including platelet-rich plasma) by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS/MS). It was applied to the determination of 5-HT in rats with irritable bowel syndrome after infection. Methods: after adding methimazole (internal standard) to plasma samples, benzoyl chloride was used as derivative reagent, sodium tetraborate as catalytic reagent and pre-column derivatization at room temperature. After the protein was precipitated by methanol, the samples were detected by ESI ionization source in a positive ion mode. The chromatographic column was Agilent Zorbax eclipse plus C18, the mobile phase was methanol-aqueous solution, and the flow rate was 1.0ml min-1.. Results: the linear range and the quantitative limit of 5-HT in platelet-rich plasma and plasma of rats were in accordance with the requirement of determination. During the day, the interday precision and matrix effect were 15%. The level of free 5-HT in plasma of irritable bowel syndrome rats was significantly higher than that of normal rats. Conclusion: this method is rapid, sensitive, specific and reproducible, and can be used for the determination of 5-HT in rat plasma.
【作者單位】： 蘭州大學(xué)第一醫(yī)院藥劑科;蘭州大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(編號81341145,81400596)
【分類號】：R927.2;O657.63

【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2412985