中藥血清藥理學(xué)研究進(jìn)展
本文關(guān)鍵詞:中藥血清藥理學(xué)研究進(jìn)展,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報2006年第27卷第18期
中藥血清藥理學(xué)研究進(jìn)展
王
睿
【摘要】 中藥血清藥理學(xué)是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動物灌服一定時間后采集動物血液、分離
血清,用此含有藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。本文對中藥血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)動物的選 擇、動物給藥方案、含藥血清的處理、含藥血
清的添加量等方面進(jìn)行了綜述,并分別做出評價,闡明了血 清藥理學(xué)在現(xiàn)代j’藥,rF為中藥體外藥效研究的重要性。 【關(guān)鍵詞】血清藥理學(xué) 研究進(jìn)展 現(xiàn)的假陰性反應(yīng)。李儀奎等“]提出兩種方法參考:一是增大 給藥劑量,即給藥劑量一在體實(shí)驗(yàn)的給藥劑量×反應(yīng)系中被 稀釋倍數(shù)(同上述王力倩所提參考公式),然而,其不足之處是 給藥劑量與血藥濃度并不是呈等比增加,況且受到灌胃藥物 濃度和體積的限制。二是按新藥藥理研究的技術(shù)要求設(shè)計(jì)劑 量給藥,將含藥血清制戒冷凍干燥粉,以凍干粉形式加人反應(yīng) 系統(tǒng)使其達(dá)到所需濃度。其優(yōu)點(diǎn)是:根據(jù)需要提高體外反應(yīng) 系統(tǒng)中的含藥濃度或形成等容,有利于血清的儲藏保存。王 寧生等[5]根據(jù)實(shí)驗(yàn)認(rèn)為給藥劑量以整體模型動物的有效劑量 8~18倍為宜。我們認(rèn)為實(shí)驗(yàn)中究竟采取什么劑量,最好通 過預(yù)實(shí)驗(yàn)解決。 2.3給藥次數(shù)與時間間隔 除了給藥劑量以外,在給藥方案
中藥血清藥理學(xué)是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動物灌服 一定時間后采集動物血液、分離血清,用此含有藥物成分的血 清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。1984年由日本學(xué)者首次 提出,國內(nèi)90年代初開始探索,近10年來越來越多地應(yīng)用于 中藥藥理的研究。以中藥血清藥理學(xué)代替中藥粗提物進(jìn)行體 外實(shí)驗(yàn),避免了中藥直接體外用藥的一系列干擾,其實(shí)驗(yàn)條件 又更接近于藥物在體內(nèi)產(chǎn)生效應(yīng)的內(nèi)環(huán)境。不但能反映中藥 及其代謝產(chǎn)物的藥理作用,而且能反映可能由藥物誘導(dǎo)機(jī)體 內(nèi)源性成分所產(chǎn)生的作用,更接近藥物在體內(nèi)環(huán)境產(chǎn)生的真 實(shí)過程。目前血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究報道較多,現(xiàn)綜述如下:
1
實(shí)驗(yàn)動物的選擇 不同種屬的動物,血清成分不同,人與動物血清更存在差
異。陸慧晶[11認(rèn)為:原則上,選擇動物時應(yīng)盡量選與人類生物 特性近似的物種,制備血清的動物應(yīng)與獲取離體器官、組織細(xì) 胞的動物相一致,從而縮小或避免動物血清之間以及動物血 清和人類血清之問在理化、生物等特性上的差異,提高實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的可靠性。劉成海等【2]提出,在體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中宜采用同 一種單一血清,既為細(xì)胞提供營養(yǎng),又為藥物載體,還避免了 多種血清的干擾。動物常采用大鼠、小鼠、兔、豚鼠等來制備 Iln清。一般家兔和大鼠應(yīng)為首選。這些動物與人類生物學(xué)相 似,同時又易獲得,一般動物給藥前禁食不禁水6至12小時 為宜。 2動物給藥方案
2.1
中還要解決的問題是給藥次數(shù)與間隔時間,這樣取得的血清 才能比較真實(shí)完整地反映藥物的作用。給藥次數(shù)及間隔現(xiàn)提 出以下幾種方案:間隔4小時2次給藥;每日1次連續(xù)3天給 藥;每日2次連續(xù)3天給藥;每日1次連續(xù)7~lo天給藥;每 隔一個半衰期給藥1次,連續(xù)4~6次;每日】次連續(xù)1 5日給 藥。楊奎等發(fā)現(xiàn)∽],連續(xù)給藥3天所取含風(fēng)頭飲血清的阻滯 血管內(nèi)皮細(xì)胞鈣通道作用比僅給藥1天好。 3采血方法及采血時阿 3.1采血方法 主要有大鼠股動脈采血法、大鼠下腔靜脈采
血法、家兔耳中央靜脈采血法、家兔耳緣靜脈采血法、家兔頸 靜脈采阻法、豚鼠經(jīng)動脈采血法等口3方法。 一般多用口服(灌胃)給藥方式制備含藥血
3.2
給藥途徑
采血時間
理想的采血時間應(yīng)落在m藥濃度最高峰。
清,其他方式給藥亦可使藥物入血,同時中藥新型制劑不斷產(chǎn) 生,也可以用注射、皮膚、粘膜、呼吸等給藥途徑來試驗(yàn)制備含 藥血清。~般在制備含藥血清時,供體動物的給藥途徑應(yīng)該
但中藥成分復(fù)雜,不同的藥物、同一藥物的不同成分高峰時間 不同,甚至同一藥物的不同劑型口服后吸收快慢有別,不同的 機(jī)能狀態(tài)同一種藥物的吸收也不一樣。因此,采血很難有統(tǒng) 一標(biāo)準(zhǔn)。但可以根據(jù)目前已掌握的大量藥物(包括合成藥物 和天然藥物)內(nèi)的有效成分的藥代學(xué)數(shù)據(jù),模擬出一個較為合 理的可供參考的采血時間∞]。梁春敏等l叫應(yīng)用中藥血清藥理 學(xué)方法,觀察玉屏風(fēng)散對小鼠免疫功能的影響的實(shí)驗(yàn)研究表 明:30 min~2 h時相的試驗(yàn)血清均能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞增 殖(P<0.01或P<0.05).1 h時相血清作用最強(qiáng).在時效關(guān) 系曲線上表現(xiàn)為峰值。趙明奇等‘10]發(fā)現(xiàn),末次給藥后90分 鐘采血分離的血清對離體蛙心作用最強(qiáng)。孟李等}川研究發(fā) 現(xiàn)不同給藥方式、不同采血時間含復(fù)方丹參m清對中性粒細(xì) 胞釋放活性氧具有較高而且相似抑制作用,與給藥1次采血 時間含藥血清抑制作用強(qiáng)度有明顯差異。李儀奎等[o】分析了 96種藥物的達(dá)峰濃度時間,發(fā)現(xiàn)多數(shù)藥物達(dá)峰濃度的時問為
與臨床給藥途徑一致,如注射劑應(yīng)注射給藥等,以避免由于給
藥途徑的不同帶來結(jié)果的差異。 2.2給藥劑量血清藥理學(xué)很重要的一個問題是給藥劑量 的確定,合適的給藥劑量,對保證實(shí)驗(yàn)的成功很重要。給藥劑 量目前尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。因含藥血清加入反映體系后,濃度別 稀釋,使反映體系的濃度達(dá)不到在體條件下的藥物濃度。王 勺倩等口I發(fā)現(xiàn),以參考公式:給藥劑量一臨床常用量×動物等 效面積系數(shù)×培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度,計(jì)算給藥劑量,得到的含 藥血清對腫瘤細(xì)胞體外生長有抑制作用,而比上述參考公式 計(jì)算的給藥量。北读康暮幯鍩o明顯作用。在這種情況 下,如果反應(yīng)系出現(xiàn)陰性反應(yīng),并不能排除藥物濃度過低而出
作者單位:齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院 郵
萬 方數(shù)據(jù) 編161042
1~2 h,故采血時問以給藥后l~2 h為宜。對血清藥理試驗(yàn)
收稿日期2006—10—23
的采血時間我們認(rèn)為有兩個方案可供參考:一是標(biāo)準(zhǔn)法。要
?2244?
得到較為確切的某種藥物的某一指標(biāo)對某種動物的最佳采血 時間,最可靠的方法是先用少量動物進(jìn)行預(yù)試驗(yàn),通過不同采 血時間進(jìn)行比較后確定。二是通法。將待測藥每天給藥兩 次,連續(xù)給藥3 d,末次給藥后1 h采血。按這一方案給藥、采 血,可省去標(biāo)準(zhǔn)法預(yù)試驗(yàn)過程。 4血清的處理 4.1含藥血清的預(yù)處理 由于血清中含有生物活性物質(zhì),如
5.2血清對照組
由于血清中含有許多活性物質(zhì),空白血清
本身有活性,可能使實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性,因此實(shí)驗(yàn) 中除設(shè)立空白對照組(一般為生理鹽水)外,必需設(shè)立空白血 清對照組,,后者加入于體外反應(yīng)系統(tǒng)中的質(zhì)和量必須盡量同 含藥血清組一致。李儀奎[釘認(rèn)為,如果以不同劑量的藥物給 予動物,取同體積的血清作為不同劑量藥物加入體外反應(yīng)系 統(tǒng),則空白血清對照組可只設(shè)一組(等體積空白血清);如果以 一種劑量給予動物,以不同體積的藥物血清加入量作為不同 劑量組,則空白血清對照組應(yīng)設(shè)相應(yīng)的不同加入量的數(shù)個對 照組,從而使加入血清的體積可比。陽性對照藥無論是中藥 還是西藥,也均應(yīng)制成含藥血清后作對照。在統(tǒng)計(jì)處理時,不 能把空白血清對照組作為零,而應(yīng)以實(shí)際測得的數(shù)據(jù)表示。 血清藥理學(xué)是一門較新的體外實(shí)驗(yàn)方法,它優(yōu)于傳統(tǒng)的 將中藥粗制劑直接加入反應(yīng)系的實(shí)驗(yàn)方法,便于從微觀方面 闡明藥物作用機(jī)制,但是它作為一種嶄新的實(shí)驗(yàn)方法,尚處于 探索階段,還不夠完善。但我們相信,隨著中藥化學(xué)分析手段 的進(jìn)步,血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法將不斷完善,將廣泛應(yīng)用于中藥 的藥理學(xué)研究,大大推動了中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程。 參
志,2000,14(3):51—53 [2]劉成海,劉平,劉成,等.抗肝細(xì)胞纖維化有效中藥復(fù)方血清藥 理學(xué)方法探討[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,1984,4’(2):16—18 [3]王力倩,李儀奎,符勝光.等.血清藥理學(xué)方法研究探討[J].中 藥藥理與臨床,1997,13(3):29—31
激素、酶、抗體、補(bǔ)體及前列腺素等,直接加入體外實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中 去,對體外培養(yǎng)的細(xì)胞、病毒、病原菌以及直接作用于體外實(shí) 驗(yàn)的組織器官,會產(chǎn)生毒性及嚴(yán)重干擾。故通常將含藥血清 進(jìn)行預(yù)處理。目前有3種方法:丙酮法,向血清中加入4~5 倍量丙酮,混勻,于3
000
r/min離心,取上清液溫水浴上蒸
發(fā),除去丙酮;乙醇法,向血清內(nèi)加入4~5倍95%乙醇,混 勻,于3
000
r/rain離心。取上清液溫水浴上蒸發(fā),除去乙醇;
加溫法:56℃水浴上放置30 min。這三種方法主要去除了血 清中的大部分蛋白質(zhì)、糖及部分電解質(zhì),血清的正常生物活性 基本喪失,容易突出血清中中藥的作用。同時,從試驗(yàn)上可以 看到,滅活血清不易起泡,對試驗(yàn)干擾較小。周明眉等[123以 含頭風(fēng)飲血清經(jīng)56℃水浴滅活30 min分鐘,其抗血小板釋 放5一HT較未滅活有所提高,但其抑制內(nèi)皮細(xì)胞攝。矗担悖幔玻 作用有明顯差別。李儀奎等H3提出當(dāng)空白血清出現(xiàn)顯著的陽 性反應(yīng)或者當(dāng)進(jìn)行離體器官實(shí)驗(yàn),血清量加入太多,通氧時形 成大量泡沫,都會嚴(yán)重妨礙實(shí)驗(yàn)進(jìn)行,因此需要滅活血清,從 而降低或消除空白血清的干擾作用?梢姡瑴缁钛鍖δ承 研究指標(biāo)是需要的。而徐海波等[1胡卻認(rèn)為含藥血清不宜滅 活,因?yàn)楹幯鍦缁詈,藥物有效活性物質(zhì)會減少或喪失生 物活性,從而影響藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果。他們認(rèn)為可以通過設(shè)立空 白血清對照組來排除非藥理性因素的干擾,而細(xì)胞培養(yǎng)中的 微生物感染可以通過微孔濾膜除菌,56℃的滅活并不能滅 菌。以上可見,含藥血清究竟是否滅活,與實(shí)驗(yàn)所選指標(biāo)和藥 物本身性質(zhì)有關(guān),應(yīng)通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定。 4.2含藥血清的保存 對含藥血清的保存,周明眉等I一”]通
考
文
獻(xiàn)
[1]陸慧晶.血清藥理學(xué)研究中的若干問題探討[J].基層中藥雜
[4]李儀奎.中藥血清藥理學(xué)試驗(yàn)方法的若干問題[J].中藥新藥與
臨床藥理。1999,10(2):95—97
[5]王寧生.關(guān)于血清藥理學(xué)的若干思考[J].中國新藥與臨床藥
理,1999,10(5):263—266 [6]楊奎,周明眉,姜遠(yuǎn)平,等.中藥血清藥理學(xué)方法學(xué)研究[J].中 藥藥理與臨床,1999,15(3):43—44 [7] 徐海波,吳清和.中藥血清藥理學(xué)試驗(yàn)方法的探討[J].中國中 醫(yī)藥科技,2000,7(I):43—46
過含藥血清抑制血小板釋放5一HT和阻滯內(nèi)皮細(xì)胞鈣離子 通道流量兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)含藥血清經(jīng)常時間低溫保存(一 20℃,2個月)后藥效顯著降低(P<0.01),提示低溫冰凍保 存影響含藥血清仍影響含藥血清藥劑。崔曉蘭等[1 4]證實(shí)3 天保存或不保存處理的比較對藥效無任何影響。所以應(yīng)選用 新鮮或保存時間較短的含藥血清進(jìn)行試驗(yàn)。 5血清添加量與對照組 5.1血清的添加量有關(guān)血清添加量方面,由于培養(yǎng)液中包 含有較豐富的營養(yǎng)物質(zhì)以及含藥贏清的細(xì)胞毒作用,在離體 實(shí)驗(yàn)中,含藥血清的濃度不宜太高。周明眉等[123發(fā)現(xiàn)含頭風(fēng) 飲的血清與富含血小板血漿的比值為1/4時,其抗血小板釋 放5一HT作用最強(qiáng)。劉成海口3的試驗(yàn)顯示20%濃度的藥物 血清具有最強(qiáng)的抑制星狀細(xì)胞增殖作用。而吳健宇等n朝在 研究補(bǔ)陽還五湯保護(hù)氧自由基損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞時發(fā)現(xiàn) 10%的。清添加量既能成功地制造血管內(nèi)皮細(xì)胞受損模型, 又能產(chǎn)生明顯的藥理效應(yīng)。聶海梅等[161在四逆湯抗氧化應(yīng) 激性損傷保護(hù)心肌細(xì)胞機(jī)制中研究發(fā)現(xiàn),15%四逆湯含藥血 清的DMEM培養(yǎng)基是心肌細(xì)胞生長的合適濃度。由上可 見,最佳血清濃度也因?qū)嶒?yàn)而異,故最準(zhǔn)確的做法莫過于通過 預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定。
[8]張良,徐立,袁冬萍,等.中藥血清藥理學(xué)方法研究進(jìn)展[J].南
京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2002,18(4);254—255
[9]梁春敏,王賢喜,董群,等.玉屏風(fēng)散對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的血
清藥理學(xué)研究。剩荩虾C庖邔W(xué)雜志,2003,23(6):2852287—
2852289
[10]趙明奇,吳偉康。段新芬,等.四逆湯對阿霉紊心衰性大鼠線粒
體功能的影響[J].中藥材,2005,28(6):486—488
[11]盂李,王寧生.含藥血清的制備方法研究[J].中藥新藥與臨床
藥理,1999,10(5)z209—29I [12]周明眉,楊奎,姜遠(yuǎn)平,等.中藥血清藥理學(xué)等方法學(xué)研究一含 藥血清低溫保存和血清滅活的影。郏剩荩兴幩幚砼c臨床,
1999,15(2):44—46
[13]Xu
HB,LiC J.Discuss the methods of Chinese herb’S serum.
Tradit ChinDrugRes Clin
16
Pharamacol[J],1999:15(8):13—
[14]崔曉蘭,賀玉琢,高英杰,等.中藥復(fù)方血清藥理研究方法探討
[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,1998,4(3):45 [15]吳健宇,李儀奎,符勝光,等.補(bǔ)陽還五湯保護(hù)氧自由基損傷的 血管內(nèi)皮細(xì)胞的血清藥理學(xué)試驗(yàn)方法的建立[J].中藥藥理與 臨床實(shí)踐,1999,15(1):45—47
萬 方數(shù)據(jù)
[16]聶海梅,吳偉康,劉影.四逆湯抗氧化應(yīng)激性損傷保護(hù)心肌細(xì)胞 機(jī)制的探討[J].2005,27(6):697—702
更多相關(guān)文檔:
中藥血清藥理學(xué)研究方法應(yīng)用現(xiàn)狀及展望
【關(guān)鍵詞】血清藥理學(xué);研究方法;綜述 中藥血清藥理學(xué)是近年來逐漸發(fā)展起來的研究中藥藥效較為科學(xué)的一種方法。它是由日 本學(xué)者田代真一于 1988 年首次提出的,該...
抗腫瘤中藥血清藥理學(xué)研究現(xiàn)狀
抗腫瘤中藥血清藥理學(xué)研究現(xiàn)狀南京中醫(yī)藥大學(xué) 2003 級博士 鄒璽 摘要:血清藥理學(xué)近年研究頗多,特別是抗腫瘤中藥方面,F(xiàn)將抗腫瘤中藥 的研究分別從(1)與中藥粗制劑...
中藥藥理學(xué)學(xué)科的研究進(jìn)展及展望
以下是 對中藥藥理學(xué)熱點(diǎn)研究方面的顯著研究進(jìn)展及學(xué)科展望的綜述。 1.血清藥理學(xué)方法研究 .血清藥理學(xué)是指用含有藥物成分的血清施加于體外實(shí)驗(yàn)反應(yīng)體系的一種半體...
中藥藥理學(xué)知識輔導(dǎo):國內(nèi)中藥血清藥理學(xué)的應(yīng)用
中藥藥理學(xué)知識輔導(dǎo):國內(nèi)中藥血清藥理學(xué)的應(yīng)用_計(jì)算機(jī)硬件及網(wǎng)絡(luò)_IT/計(jì)算機(jī)_專業(yè)...中藥藥理學(xué)的 發(fā)展,提高了體外實(shí)驗(yàn)的可信性和可靠性,并使以前無法進(jìn)行的研究...
中藥制劑的療效與血清藥理學(xué)關(guān)系綜述
中藥制劑的療效與血清藥理學(xué)關(guān)系綜述_中醫(yī)中藥_醫(yī)藥衛(wèi)生_專業(yè)資料 暫無評價|0人閱讀|0次下載 中藥制劑的療效與血清藥理學(xué)關(guān)系綜述_中醫(yī)中藥_醫(yī)藥衛(wèi)生_專業(yè)資料。...
中藥血清藥理學(xué)研究方法探討與思考-黃峰
中藥血清藥理學(xué)研究方法探討與思考-黃峰_醫(yī)學(xué)_高等教育_教育專區(qū)。綜述藥理學(xué)ppt...,藥物動力學(xué)同步進(jìn)行,系統(tǒng)研究,尋求和探 索科學(xué)方法,勢必加速中藥研究的發(fā)展. ...
中藥藥理學(xué)研究的現(xiàn)狀與問題討論
中藥藥理研究中的現(xiàn)狀與問... 10頁 1財富值 中藥藥理學(xué)學(xué)科的研究進(jìn)展... 4頁 2財富值 中藥血清藥理學(xué)研究方法應(yīng)... 6頁 免費(fèi) 評述中藥藥理的研究方法 4頁...
血清藥物化學(xué)在中藥物質(zhì)基礎(chǔ)方面的研究進(jìn)展
血清藥物化學(xué)在中藥物質(zhì)基礎(chǔ)方面的研究進(jìn)展作者:肖秋元,馬超英 來源:66wen 更新...而開展中藥血清藥物化學(xué)與中藥血清藥理學(xué)協(xié)同研究,將有助于揭開中藥復(fù)方 作用的...
中藥復(fù)方藥理學(xué)研究
中藥血清藥理學(xué)的方法學(xué)研... 3頁 1財富值喜歡此文檔的還喜歡 中藥復(fù)方藥理學(xué)...可以設(shè)想, 如果不在中藥復(fù)方研究中設(shè)立一種認(rèn)真、嚴(yán)肅的研究以引 導(dǎo)學(xué)術(shù)發(fā)展,...
中藥微丸的藥學(xué)研究進(jìn)展
中藥血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法研... 2頁 免費(fèi)喜歡此文檔的還喜歡 中藥微丸的制備工藝研究 14頁 2財富值如要投訴違規(guī)內(nèi)容,請到百度文庫投訴中心;如要提出功能問題或意見...
更多相關(guān)標(biāo)簽:
中藥藥理學(xué)研究進(jìn)展 | 中藥血清藥理學(xué) | 藥理學(xué)研究進(jìn)展 | 分子藥理學(xué)研究進(jìn)展 | 腫瘤藥理學(xué)研究進(jìn)展 | 中藥藥理學(xué)的研究內(nèi)容 | 中草藥毒性的研究進(jìn)展 | 中藥學(xué)研究進(jìn)展 |本文關(guān)鍵詞:中藥血清藥理學(xué)研究進(jìn)展,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:237953
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/237953.html