【摘要】：目的以桔梗多糖為模板,利用Vc還原亞硒酸鈉的反應(yīng)制備粒徑適宜的納米硒-桔梗多糖復(fù)合物,在確定其粒徑的大小、含硒量和急性毒性的基礎(chǔ)上,考察其體外抗氧化性、體內(nèi)降糖和保肝活性。方法納米硒-桔梗多糖復(fù)合物的制備:采用單因素的實(shí)驗(yàn)方法,在固定反應(yīng)體系中Na2SeO3濃度的條件下,考察桔梗多糖的濃度、Vc和Na2SeO3的配比、反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間等因素對(duì)納米硒形成的影響,以納米硒尺寸的大小和均勻程度來(lái)評(píng)價(jià)納米硒的制備條件,從而給出最佳的制備方案;采用膠體溶液的雙波長(zhǎng)比色法、透射電鏡和X射線衍射等手段對(duì)制備的納米硒-桔梗多糖復(fù)合物進(jìn)行表征。用DAN法測(cè)定納米硒中的硒含量。以Vc,桔梗多糖作對(duì)照,采用鄰苯三酚自氧化法測(cè)定超氧陰離子自由基清除率,水楊酸法測(cè)定羥基自由基清除率,紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定DPPH自由基的清除能力和還原能力。在降糖活性的研究中,取昆明種小鼠56只分成2組,第一組8只為正常組,第二組48只為模型組。第二組一次性腹腔注射四氧嘧啶溶液進(jìn)行造模,選擇血糖值11.1 mmol·L-1的小鼠為造模成功的小鼠。將造模成功的小鼠分為模型組、陽(yáng)性組、桔梗多糖組、納米硒低、中和高劑量組。連續(xù)灌胃給藥14 d,末次給藥16 h后稱重,測(cè)小鼠血糖值,摘眼球取血測(cè)定血清中谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)的含量。保肝作用的實(shí)驗(yàn)研究中,取昆明種小鼠56只平均分成7組,分別為正常組、模型組、陽(yáng)性組、桔梗多糖組、納米硒低、中和高劑量組,每組8只。正常飼養(yǎng)一周后,連續(xù)灌胃給藥14 d,第7 d和第14 d給藥1 h后,除正常組外,各組小鼠腹腔注射CCl4橄欖油溶液,末次給藥16 h后稱重。摘眼球采血,測(cè)血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和總蛋白(TP)的含量;取肝臟,稱重,同時(shí)測(cè)定肝組織勻漿中的還原型谷胱甘肽(GSH)和MDA的含量。對(duì)相同部位的肝臟進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果制備顆粒均勻穩(wěn)定的納米硒-桔梗多糖復(fù)合物的最佳工藝為:桔梗多糖的濃度為100 mg·L-1、Vc與亞硒酸鈉的摩爾比為3:1、反應(yīng)時(shí)間為4 h、反應(yīng)溫度為40℃。其粒徑大小約50 nm,且為晶型粉末,在常溫下放置1個(gè)月,溶液仍為橙色,且無(wú)沉淀產(chǎn)生。含硒量為4.018%,急毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果未測(cè)出LD50�？寡趸詫�(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:納米硒-桔梗多糖、桔梗多糖清除超氧陰離子自由基的IC50分別為1.72 mg·mL-1和54.44 mg·mL-1;清除羥基自由基的IC50分別為3.19 mg·mL-1和8.27 mg·mL-1;清除DPPH自由基的IC50分別為6.76 mg·mL-1和26.51 mg·mL-1,納米硒還原能力強(qiáng)于桔梗多糖。其降糖活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:納米硒高、中劑量組與模型組相比可極顯著地降低血糖值(p0.01)以及血清中的MDA(p0.01)含量,極顯著的提高血清中GSH-Px(p0.01)活性,與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異;桔梗多糖組這些指標(biāo)沒(méi)有顯著地改善。保肝活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:納米硒高、中劑量組與模型組相比可極顯著地降低血清中的ALP、ALT、GLB和AST酶活性(p0.01)以及肝組織中的MDA和GSH(p0.01)含量,極顯著升高血清中TP、ALB水平(p0.01),與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異;納米硒低劑量組可顯著改善這些指標(biāo)。桔梗多糖組這些指標(biāo)沒(méi)有顯著地改善。中、高劑量治療組均可不同程度地改善CCl4所致的病理組織損傷,且顯著優(yōu)于低劑量組與桔梗多糖治療組。結(jié)論該制備納米硒的方法反應(yīng)條件溫和,操作方便,獲得的納米硒顆粒大小適宜,均勻且穩(wěn)定。具有很強(qiáng)的清除超氧陰離子自由基、羥基自由基和DPPH自由基的能力,對(duì)糖尿病以及藥物性肝損傷也具有很好的治療能力,為其在降糖、保肝和抗衰老藥物的研發(fā)過(guò)程中奠定基礎(chǔ),提供大量的理論依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：佳木斯大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R943

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2325210