【摘要】：目的:建立一種快速、靈敏、高效和易操作的方法,用于檢測重組人源化抗TNF-α單抗WLB303猴重復(fù)給藥毒性試驗血清中產(chǎn)生的中和抗體。方法:對食蟹猴靜脈輸注WLB303,連續(xù)給藥4周。采取給藥期和恢復(fù)期不同時間的血清,隨后采用橋式酶聯(lián)免疫吸附法對血清中的抗藥抗體進行定性篩選,對篩選為陽性的血清樣本進行預(yù)處理,然后以WLB303生物學(xué)活性測定法為基礎(chǔ)的中和反應(yīng)法對中和抗體進行確證。結(jié)果:建立了WLB303中和抗體的確證方法,確定了檢測的臨界點。確證方法的檢出率為100%,在血清中檢測到具有中和活性的抗體,中和抗體的中和作用強度總體與給藥時間、給藥劑量呈正相關(guān)。結(jié)論:建立的檢測方法能夠直接體現(xiàn)出劑量差異性和個體差異性,也能反映中和抗體的滴度差別。該方法的特異性、靈敏度和有效性能夠滿足試驗要求,可以用于單抗藥物重復(fù)給藥動物毒性試驗血清中和抗體的檢測。
[Abstract]:Objective: to establish a rapid, sensitive, efficient and easy to operate method for the detection of neutralizing antibodies produced in the sera of recombinant human anti TNF- 偽 monoclonal antibody WLB303 monkeys. Methods: WLB303, was infused intravenously for 4 weeks. Serum samples of different periods of administration and convalescence were used, and then the anti-drug antibodies in serum were screened qualitatively by bridge enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa), and the positive serum samples were pretreated. Then the neutralization reaction method based on WLB303 assay was used to confirm the neutralization antibody. Results: the method of WLB303 neutralizing antibody was established and the critical point of detection was determined. The positive rate of the method was 100. The neutralizing activity of antibody was detected in serum. The neutralization intensity of neutralizing antibody was positively correlated with the administration time and dosage. Conclusion: the established method can not only reflect the difference of dose and individual, but also the titer of neutralizing antibody. The specificity, sensitivity and effectiveness of the method can meet the requirements of the test, and can be used for the detection of serum neutralization antibody in repeated drug administration animal toxicity test.
【作者單位】： 深圳萬樂藥業(yè)有限公司;北京昭衍新藥研究中心股份有限公司;
【分類號】：R965

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本文編號：2300852