【摘要】：目前,由于受環(huán)境等多方面的影響,人們對(duì)藥物的需求也越來越多。對(duì)藥物的研究也越來越多的受到人們的關(guān)注。藥物在人體發(fā)揮作用離不開相應(yīng)蛋白質(zhì)的配合,因此研究蛋白質(zhì)與藥物的結(jié)合機(jī)理至關(guān)重要。本文就牛轉(zhuǎn)鐵蛋白與頭孢類藥物的相互作用結(jié)合了多種方法進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)探究包含下列各部分:第一章:參考34篇文獻(xiàn)就蛋白質(zhì)大分子-藥物小分子結(jié)合機(jī)制的不同研究方法進(jìn)行了綜述,介紹了多種光譜法,包括熒光猝滅法、紫外吸收光譜法、圓二色光譜法等。簡(jiǎn)單總結(jié)了蛋白質(zhì)對(duì)于生物體的多種功能。第二章:將牛轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)作為研究對(duì)象,298 K、310 K和318 K三個(gè)溫度下對(duì)牛轉(zhuǎn)鐵蛋白與頭孢呋辛鈉(CSI)的相互作用進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。由實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)知:TRF、CSI的作用位點(diǎn)近似為1,提高溫度Ka變小,表示TRF、CSI反應(yīng)生成的產(chǎn)物的穩(wěn)定性降低,該熒光猝滅過程是靜態(tài)的。ΔS0、ΔG0,表示該過程屬于自由能降低且熵增的自發(fā)過程。第三章:將轉(zhuǎn)鐵蛋白的熒光變化作為研究對(duì)象,在298 K、310 K、318 K下采用紫外吸收、傳統(tǒng)熒光、同步熒光、圓二色譜法,對(duì)TRF與頭孢噻肟鈉(CEM)的結(jié)合綜合分析。數(shù)據(jù)處理和分析顯示:TRF的熒光伴隨CEM濃度的提高而呈現(xiàn)規(guī)律性猝滅,猝滅方式是靜態(tài)的,兩者借助靜電作用結(jié)合,反應(yīng)生成新物質(zhì)。結(jié)果的準(zhǔn)確性通過上述方法進(jìn)行了驗(yàn)證。此外,同步熒光和圓二色譜也表明CEM影響了TRF的構(gòu)象。第四章:分別以TRF、牛血清白蛋白(BSA)為研究對(duì)象,就TRF、BSA與CSI之間的結(jié)合機(jī)理運(yùn)用多種方法實(shí)施了研究。結(jié)果表明:伴隨CSI的加入,BSA、TRF的吸光度峰值減小,最高吸光度所對(duì)應(yīng)的峰位置有3 nm、5 nm的紅移,表示CSI與BSA、TRF間有新物質(zhì)生成,CSI對(duì)BSA、TRF吸收光譜的猝滅是靜態(tài)的。TRF、BSA與CSI的結(jié)合作用影響了TRF的α-螺旋結(jié)構(gòu),導(dǎo)致其變得松散且使得TRF的熒光猝滅。盡管CD峰的峰值有所變化,但其峰形與位置都沒受到影響,從而證明在TRF、BSA中主要結(jié)構(gòu)依然是α-螺旋。第五章:以TRF為研究對(duì)象,對(duì)TRF-頭孢西丁鈉(CFS)體系的作用機(jī)理進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示:提高溫度Ka變小,表示TRF、CFS反應(yīng)生成的產(chǎn)物的穩(wěn)定性降低,該熒光猝滅過程是靜態(tài)的,ΔH0,ΔS0,表示TRF、CFS憑借靜電作用力而結(jié)合。λex=280 nm時(shí)對(duì)應(yīng)的猝滅水平大于λex=295 nm時(shí)的熒光猝滅水平,進(jìn)而可知CFS與BSA、TRF相互結(jié)合過程中同時(shí)有Trp、Tyr兩者的參與。多種方法應(yīng)用于同一研究可以使所得結(jié)果更精確,因此在此研究的基礎(chǔ)上仍可拓展和探索新的方法。
[Abstract]:At present, due to the environment and other aspects of the impact, the demand for drugs is also increasing. More and more people pay attention to the study of drugs. It is very important to study the mechanism of protein-drug binding because the function of drugs in human body is inseparable from the cooperation of corresponding proteins. The interaction of bovine transferrin with cephalosporins was studied in this paper. The experimental study consists of the following parts: chapter 1: the different research methods of protein macromolecular-drug small molecule binding mechanism are reviewed with 34 references, and a variety of spectroscopic methods, including fluorescence quenching method, ultraviolet absorption spectrometry method, are introduced. Circular dichroism, etc. This paper briefly summarizes the various functions of proteins for organisms. Chapter 2: the interaction between bovine transferrin and cefuroxime sodium (CSI) was studied at 298K 310K and 318K using bovine transferrin (TRF) as the research object. The experimental data show that the interaction site of TRF,CSI is approximately 1, and the increasing temperature of Ka becomes smaller, which means that the stability of the product produced by TRF,CSI reaction is decreased, and the fluorescence quenching process is static. 螖 S _ 0, 螖 G _ 0, which means that the process belongs to the spontaneous process of decreasing free energy and increasing entropy. In chapter 3, the fluorescence changes of transferrin were studied. UV absorption, traditional fluorescence, synchronous fluorescence and circular dichroism were used to analyze the binding of TRF with cefotaxime sodium (CEM) at 298K ~ 310K ~ 318K. Data processing and analysis show that the fluorescence of TRF is quenched regularly with the increase of CEM concentration, and the quenching mode is static. The accuracy of the results was verified by the above methods. In addition, synchronous fluorescence and circular dichroism showed that CEM affected the conformation of TRF. Chapter 4: TRF, bovine serum albumin (TRF,) (BSA) was used to study the binding mechanism between TRF,BSA and CSI. The results show that the peak absorbance of BSA,TRF decreases with the addition of CSI, and the peak position corresponding to the highest absorbance is red-shifted by 3 nm,5 nm. It indicates that there is a new substance formation between CSI and BSA,TRF, and that the quenching of BSA,TRF absorption spectrum by CSI is static. The binding of TRF,BSA and CSI affects the 偽 -helix structure of TRF, resulting in its loosening and fluorescence quenching of TRF. Although the peak value of CD has changed, the shape and position of the peak have not been affected, which proves that the main structure in TRF,BSA is still 偽 -helix. Chapter 5: the mechanism of TRF- cefxitin sodium (CFS) system was studied with TRF as the research object. The results show that increasing the temperature of Ka decreases the stability of the products produced by the TRF,CFS reaction. The fluorescence quenching process is static, 螖 H 0, 螖 S 0, which indicates that TRF,CFS is bound by electrostatic force. The corresponding quenching level of 位 ex=280 nm is greater than that of 位 ex=295 nm, and Trp,Tyr and BSA,TRF are involved in the process of CFS and BSA,TRF. Many methods can be applied to the same study to make the results more accurate, so the new method can be expanded and explored on the basis of the research.
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R96;O657.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2283438