【摘要】：目的研究聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化聚酰胺-胺樹(shù)狀大分子(polyamidoamine dendrimer,PAMAM)的理化性質(zhì)及其作為質(zhì)粒DNA載體。方法用1H-NMR考察PAMAM-PEG的化學(xué)結(jié)構(gòu);用瓊脂糖凝膠電泳法、圓二色譜法和透射電鏡法考察復(fù)合物的形成;用動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定復(fù)合物的粒徑和zeta電位;用MTT法測(cè)定復(fù)合物的毒性;用螢光素酶報(bào)告基因的表達(dá)表征復(fù)合物的轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果結(jié)果表明,載體化合物合成成功,PEG修飾度為9%;瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果表明,在N/P比大于2時(shí),復(fù)合物能阻滯DNA的電泳;圓二色譜、透射電鏡結(jié)果表明復(fù)合物已經(jīng)形成,其形態(tài)規(guī)整,呈球形。隨著N/P比的增加,復(fù)合物的粒徑減小,zeta電位升高;MTT結(jié)果表明復(fù)合物的細(xì)胞毒性小;螢光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明復(fù)合物的轉(zhuǎn)染效率高。結(jié)論作為DNA載體,PAMAM-PEG的細(xì)胞毒性小、轉(zhuǎn)染效率高,具有很大的研究前景。
[Abstract]:Objective To study the physicochemical properties of polyethylene glycol (PEG)-polyamidoamine dendrimer (PAMAM) and its application as plasmid DNA carrier. The particle size and zeta potential of the complex were determined by scattering method, the toxicity of the complex was determined by MTT method, and the transfection efficiency was characterized by the expression of luciferase reporter gene. The results of circular dichroism and transmission electron microscopy showed that the complex had been formed and its morphology was regular and spherical.With the increase of N/P ratio, the particle size of the complex decreased and zeta potential increased.MTT results showed that the cytotoxicity of the complex was small.Luciferase test showed that the transfection efficiency of the complex was high.Conclusion As a DNA carrier, PAMAM-PEG had little cytotoxicity. The transfection efficiency is high and has great research prospects.
【作者單位】： 沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院;賽諾菲(北京)制藥有限公司;沈陽(yáng)科海醫(yī)藥科技有限公司;
【分類號(hào)】：R94

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本文編號(hào)：2230423