【摘要】：目的研究毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)與克百威(carbofuran,CF)單獨及聯(lián)合染毒對體外培養(yǎng)細(xì)胞株的毒性,并闡明聯(lián)合作用模式。方法應(yīng)用不同濃度的CPF(0、50、100、200和400μmol/L)和CF(0、25、50、100和200μmol/L)分別單獨染毒大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤株P(guān)C12細(xì)胞12 h,聯(lián)合效應(yīng)研究分別在低劑量(CPF 50μmol/L,CF 25μmol/L)和高劑量(CPF 200μmol/L,CF 100μmol/L)水平下混合染毒。染毒結(jié)束后,采用丁酰硫代膽堿法檢測乙酰膽堿酯酶(ACh E)活性,二氯熒光素二乙酸酯(DCFH-DA)熒光探針法測定細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的生成,硫代巴比妥酸(TBA)法測定細(xì)胞中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量,黃嘌呤氧化酶法測定細(xì)胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性,5,5'-二硫代雙硝基苯甲酸(DTNB)顯色法測定細(xì)胞中谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性。結(jié)果毒死蜱、克百威單獨染毒時,對ACh E活性的抑制作用、PC12細(xì)胞內(nèi)ROS的生成量、SOD及GPx的活性均顯著高于對照組(P0.01),MDA含量無明顯變化。2×2析因設(shè)計分析聯(lián)合效應(yīng)結(jié)果表明,較低劑量水平下,CPF與CF之間無交互作用,較高劑量水平,CPF、CF之間存在交互作用(P0.01),作用模式主要為協(xié)同作用。結(jié)論毒死蜱、克百威單獨及聯(lián)合染毒都具有細(xì)胞毒性,聯(lián)合作用模式主要為協(xié)同作用,氧化應(yīng)激可能是其產(chǎn)生細(xì)胞毒性的機制之一。
[Abstract]:Objective to study the toxicity of chlorpyrifos (chlorpyrifos,CPF) and carbofuran (carbofuran,CF) alone or in combination to cultured cell lines in vitro and to elucidate the combined effects. Methods Rat pheochromocytoma cell line PC12 cells were exposed to different concentrations of CPF (050 100 200 渭 mol/L and 400 渭 mol/L) and CF (0 25 渭 mol/L,CF 50 100 and 200 渭 mol/L) for 12 h, respectively. The combined effects were studied at low (CPF 50 渭 mol/L,CF 25 渭 mol/L) and high dose (CPF 200 渭 mol/L,CF 100 渭 mol/L) levels. The activity of acetylcholinesterase (ACh E) and the production of reactive oxygen species (ROS) in cells were detected by butyrylthiocholine method and dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) fluorescence probe method. The content of malondialdehyde (MDA), a product of lipid peroxidation, was determined by thiobarbituric acid (TBA) assay. The activity of superoxide dismutase (SOD) in cells was determined by xanthine oxidase method. The activity of glutathione peroxidase (GPx) was determined by (DTNB) colorimetric assay. Results the inhibitory effects of chlorpyrifos and carbofuran on the activity of ACh E in PC12 cells were significantly higher than those in the control group (P0.01). The combined effect of 2 脳 2 factorial design analysis showed that the activity of ROS and GPx in PC12 cells were significantly higher than those in the control group (P0.01). There was no interaction between CF and CF at lower dose level (P0.01). Conclusion Chlorpyrifos and carbofuran alone or in combination have cytotoxicity. The mode of combined action is mainly synergistic. Oxidative stress may be one of the mechanisms of cytotoxicity of chlorpyrifos.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西公共衛(wèi)生學(xué)院營養(yǎng)食品衛(wèi)生與毒理學(xué)系;上海市食品藥品檢驗所藥理毒理室;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院疾病預(yù)防控制所毒理學(xué)評價研究中心;
【基金】：國家“十一五”科技支撐計劃(No.2006BAK02A00)
【分類號】：R99

【參考文獻】

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