發(fā)布時間：2018-08-06 14:38

【摘要】：目的初步觀察轉染SHP-1基因前后大鼠心肌H9C2細胞對抗曲妥珠單抗的能力,SHP-1蛋白表達情況及轉染SHP-1基因對H9C2細胞增殖能力的影響。方法構建真核表達載體pc DNA3.1(+)-SHP-1和pc DNA3.1(+)-SHP-1C/S,利用脂質體轉染法轉染大鼠心肌H9C2細胞,經(jīng)G418篩選陽性克隆,陽性克隆細胞在曲妥株單抗中維持生長。用Western blot檢測SHP-1基因在大鼠心肌H9C2細胞中的穩(wěn)定表達情況,并通過流式細胞學觀察細胞凋亡曲線。結果蛋白水平證實,轉染細胞內有SHP-1基因的表達,并且轉染pc DNA3.1(+)-SHP-1的心肌細胞SHP-1表達明顯升高,經(jīng)曲妥珠單抗干預后蛋白表達量下降。轉染pc DNA3.1(+)-SHP-1后H9C6細胞在曲妥珠單抗中凋亡率明顯升高(P0.05)。結論向大鼠心肌H9C2細胞內轉染SHP-1基因并使其穩(wěn)定表達,可以促進大鼠心肌H9C2細胞的在曲妥珠單抗中的凋亡,為以后進一步探討SHP-1基因的功能打下了基礎。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of SHP-1 protein in rat myocardial H9C2 cells before and after transfection of SHP-1 gene and the effect of SHP-1 gene transfection on the proliferation of H9C2 cells. Methods the eukaryotic expression vectors PC DNA3.1 () -SHP-1 and PC DNA3.1 () -SHP-1C / S were constructed and transfected into rat myocardial H9C2 cells by liposome transfection. The positive clones were screened by G418. Western blot was used to detect the stable expression of SHP-1 gene in rat myocardial H9C2 cells and the apoptosis curve was observed by flow cytometry. Results the expression of SHP-1 gene was confirmed in the transfected cells, and the expression of SHP-1 in the cardiomyocytes transfected with PC DNA3.1 () -SHP-1 was significantly increased, and the protein expression decreased after the intervention of trotozumab. After transfection of PC DNA3.1 () -SHP-1, the apoptosis rate of H9C6 cells increased significantly (P0.05). Conclusion transfection and stable expression of SHP-1 gene into rat myocardial H9C2 cells can promote the apoptosis of rat myocardial H9C2 cells in trotozumab and lay a foundation for further study on the function of SHP-1 gene.
【作者單位】： 廣東省東莞市人民醫(yī)院腫瘤內科;南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院腫瘤內科;南方醫(yī)科大學中西醫(yī)結合醫(yī)院腫瘤中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(編號:81272546) 廣東省中醫(yī)藥局建設中醫(yī)藥強省科研立項課題(編號:20131072)
【分類號】：R965

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：2168046