【摘要】：目的初步觀察轉(zhuǎn)染SHP-1基因前后大鼠心肌H9C2細(xì)胞對(duì)抗曲妥珠單抗的能力,SHP-1蛋白表達(dá)情況及轉(zhuǎn)染SHP-1基因?qū)9C2細(xì)胞增殖能力的影響。方法構(gòu)建真核表達(dá)載體pc DNA3.1(+)-SHP-1和pc DNA3.1(+)-SHP-1C/S,利用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染大鼠心肌H9C2細(xì)胞,經(jīng)G418篩選陽(yáng)性克隆,陽(yáng)性克隆細(xì)胞在曲妥株單抗中維持生長(zhǎng)。用Western blot檢測(cè)SHP-1基因在大鼠心肌H9C2細(xì)胞中的穩(wěn)定表達(dá)情況,并通過(guò)流式細(xì)胞學(xué)觀察細(xì)胞凋亡曲線。結(jié)果蛋白水平證實(shí),轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)有SHP-1基因的表達(dá),并且轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)-SHP-1的心肌細(xì)胞SHP-1表達(dá)明顯升高,經(jīng)曲妥珠單抗干預(yù)后蛋白表達(dá)量下降。轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)-SHP-1后H9C6細(xì)胞在曲妥珠單抗中凋亡率明顯升高(P0.05)。結(jié)論向大鼠心肌H9C2細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染SHP-1基因并使其穩(wěn)定表達(dá),可以促進(jìn)大鼠心肌H9C2細(xì)胞的在曲妥珠單抗中的凋亡,為以后進(jìn)一步探討SHP-1基因的功能打下了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of SHP-1 protein in rat myocardial H9C2 cells before and after transfection of SHP-1 gene and the effect of SHP-1 gene transfection on the proliferation of H9C2 cells. Methods the eukaryotic expression vectors PC DNA3.1 () -SHP-1 and PC DNA3.1 () -SHP-1C / S were constructed and transfected into rat myocardial H9C2 cells by liposome transfection. The positive clones were screened by G418. Western blot was used to detect the stable expression of SHP-1 gene in rat myocardial H9C2 cells and the apoptosis curve was observed by flow cytometry. Results the expression of SHP-1 gene was confirmed in the transfected cells, and the expression of SHP-1 in the cardiomyocytes transfected with PC DNA3.1 () -SHP-1 was significantly increased, and the protein expression decreased after the intervention of trotozumab. After transfection of PC DNA3.1 () -SHP-1, the apoptosis rate of H9C6 cells increased significantly (P0.05). Conclusion transfection and stable expression of SHP-1 gene into rat myocardial H9C2 cells can promote the apoptosis of rat myocardial H9C2 cells in trotozumab and lay a foundation for further study on the function of SHP-1 gene.
【作者單位】： 廣東省東莞市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院腫瘤內(nèi)科;南方醫(yī)科大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院腫瘤中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81272546) 廣東省中醫(yī)藥局建設(shè)中醫(yī)藥強(qiáng)省科研立項(xiàng)課題(編號(hào):20131072)
【分類號(hào)】：R965

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 謝亞琳;梁繼珍;劉斐燁;張軍一;謝劍明;羅榮城;李榮;;SHP-1基因?qū)θ巳橄侔㎝DA-MB-231細(xì)胞增殖活性的影響[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年05期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 ;Purification and Characterization of the Catalytic Domain of Protein Tyrosine Phosphatase SHP-1 and the Preparation of Anti-ΔSHP-1 Antibodies[J];Chemical Research in Chinese Universities;2008年05期

2 文良志;錢慧;謝渭芬;;磷酸酶SHP-1與消化系統(tǒng)腫瘤關(guān)系的研究現(xiàn)狀[J];國(guó)際消化病雜志;2013年04期

3 李婉南;李瑩;莊妍;李賀;陳穎麗;趙志壯;付學(xué)奇;;蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶SHP-1的中藥抑制劑篩選[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2008年06期

4 李曉婷;謝欣梅;趙清輝;龐曉斌;杜冠華;;人腦蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1基因克隆與原核表達(dá)[J];河南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2013年04期

5 覃晶;錢新宇;陸慧琦;韓煥興;羅榮城;;重組人血管內(nèi)皮抑素誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞凋亡的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

6 薛亞?wèn)|;蔡麗敏;劉靜;王燕華;周毅成;鄭淑云;;蛋白酪氨酸磷酸酶-1和表皮生長(zhǎng)因子受體在尖銳濕疣組織中的表達(dá)及意義[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年07期

7 肖漢龍;陶娟;劉輝峰;安湘杰;王育玨;涂亞庭;;尖銳濕疣組織中蛋白酪氨酸磷酸酶-1和表皮生長(zhǎng)因子受體的表達(dá)[J];臨床皮膚科雜志;2013年08期

8 黃維甄;鄒愛梅;石敏;羅榮城;李榮;;SHP-1對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞侵襲的影響及機(jī)制初步探討[J];熱帶醫(yī)學(xué)雜志;2011年03期

9 申曉倩;張文東;何源流;叢曉;蘇國(guó)海;郝恩魁;;曲妥珠單抗誘導(dǎo)大鼠心功能降低及其機(jī)制的探討[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年12期

10 李麗;張景華;李玉鳳;;乳腺癌基因治療的研究進(jìn)展與展望[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前6條

1 袁清;酪氨酸磷酸酶SHP-1在腎臟缺血再灌注損傷中的作用及其免疫學(xué)機(jī)制[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

2 李哲;蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸激酶JAK2～（V617F）抑制劑Erlotinib的發(fā)現(xiàn)和蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶SHP-1與SHP-2相互作用的鑒定[D];吉林大學(xué);2007年

3 張力;SHP-1缺失的肥大細(xì)胞在小鼠肺過(guò)敏性炎癥中的作用[D];武漢大學(xué);2010年

4 安濤;NRG-1保護(hù)阿霉素所致心肌細(xì)胞損傷的機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

5 崔賀賀;通心絡(luò)對(duì)心臟微血管內(nèi)皮缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

6 殷松娜;SHP-1在小鼠早期胚胎發(fā)育中的作用及其作用機(jī)制的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2014年

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1 王瑞玲;蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1在哮喘小鼠肺組織的表達(dá)及其與氣道炎癥的關(guān)系[D];鄭州大學(xué);2011年

2 黃維甄;RNA干擾SHP-1對(duì)乳腺癌細(xì)胞功能影響的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2011年

3 王琨;乳腺癌SHP-1基因甲基化狀態(tài)及其對(duì)細(xì)胞增殖與凋亡的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

4 王培;右丙亞胺對(duì)曲妥珠單抗、蒽環(huán)類藥物引起的心臟毒性防治效果及其機(jī)制研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

5 李曉婷;蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1抑制劑篩選模型的構(gòu)建及應(yīng)用[D];河南大學(xué);2013年

6 申曉倩;曲妥珠單抗誘導(dǎo)大鼠心功能降低及其機(jī)制的探討[D];山東大學(xué);2014年

7 雷翔慧;CD99通過(guò)JAK/STAT1-SOCS1/SHP1調(diào)控霍奇金淋巴瘤細(xì)胞增殖與凋亡的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

8 喬鵬飛;NDRG1基因啟動(dòng)子甲基化在前列腺癌中的初步研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

9 李芳;三氧化二砷對(duì)Hut78細(xì)胞SHP-1基因去甲基化作用的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 梁繼珍;李榮;張軍一;鄭航;羅榮城;;逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中的表達(dá)[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2009年05期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 欒雪梅;姚立新;;曲妥珠單抗[J];中國(guó)處方藥;2008年07期

2 丁燕,吳洪斌;曲妥珠單抗的不良反應(yīng)及處理[J];藥物不良反應(yīng)雜志;2003年06期

3 段丹丹;;曲妥珠單抗的不良反應(yīng)及處理[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)藥雜志;2011年08期

4 陸益,吳洪斌;抗乳腺癌新藥——曲妥珠單抗[J];中國(guó)臨床藥學(xué)雜志;2004年03期

5 ;曲妥珠單抗耐藥機(jī)制的最新研究進(jìn)展(英文)[J];Chinese-German Journal of Clinical Oncology;2010年11期

6 郭瑋;陳玉琴;王軍志;;生物類似藥物曲妥珠單抗臨床研究的啟示和思考[J];中國(guó)腫瘤生物治療雜志;2014年04期

7 劉炬;蔡瑞剛;王佳玉;袁們;馬飛;樊英;李俏;張頻;李青;徐兵河;;曲妥珠單抗聯(lián)合化療治療34例晚期乳腺癌的療效觀察[J];臨床藥物治療雜志;2010年06期

8 曹俊姿;孫雯;宮菲菲;劉萬(wàn)卉;;毛細(xì)管區(qū)帶電泳方法評(píng)價(jià)曲妥珠單抗類似物的電荷異質(zhì)性[J];藥物分析雜志;2013年12期

9 江峰;陳江浩;楊鐵虹;范黎;喬友備;吳紅;;曲妥珠單抗修飾的阿霉素免疫脂質(zhì)體的制備及體外性質(zhì)研究[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年21期

10 吳凡;陳強(qiáng);葉韻斌;;HER2單抗曲妥珠單抗耐藥機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)新藥與臨床雜志;2008年01期

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1 Henry Shion;Asish Chakraborty;陳熙;宋蘭坤;孫慶龍;賈偉;周春喜;Scott Berger;St.John Skilton;;液質(zhì)聯(lián)用(LC/MS)技術(shù)在單克隆抗體(曲妥珠單抗)結(jié)構(gòu)表征上的應(yīng)用[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

2 付國(guó)權(quán);蔣代文;李爽;蔡君;邊耀武;;曲妥珠單抗聯(lián)合多西他賽及卡培他濱治療hero-2高表達(dá)乳腺癌術(shù)后肝轉(zhuǎn)移14例[A];2010年度全國(guó)醫(yī)藥學(xué)術(shù)論文交流會(huì)暨臨床藥學(xué)與藥學(xué)服務(wù)研究進(jìn)展培訓(xùn)班論文集[C];2010年

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1 麥迪信醫(yī)學(xué)出版有限公司供稿;用得準(zhǔn) 好藥才見良效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2003年

2 余志平;重視臨床研究 聚焦乳腺癌治療進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2005年

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