【摘要】：目的研究水蛭肽Hirulog-s影響單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑和纖溶酶原相互活化作用考察新型合成水蛭肽的纖溶作用特性。方法構(gòu)筑單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑(pro-uPA)和纖溶酶原(plg)相互活化反應(yīng)體系,添加Hirulog-s成反應(yīng)體系不同濃度,比較pro-uPA和plg相互活化反應(yīng)體系中纖溶酶(plm)作用于pro-uPA反應(yīng)的酶促反應(yīng)動力學(xué)常數(shù)(Km,kcat),分析Hirulog-s對plm作用于pro-uPA反應(yīng)的催化速率及親和性。纖溶活性作用檢測采用底物酶促反應(yīng)法,酶促反應(yīng)動力學(xué)常數(shù)的測定基于單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑激活纖溶酶原的反應(yīng)。結(jié)果在plm作用于pro-uPA的反應(yīng)體系中,30μmol·L~(-1) Hirulog-s與對照相比kcat值增大了3.1倍,Km值減小了1.6倍,表明Hirulog-s可以顯著提高plm的最大催化速率同時(shí)增強(qiáng)親和性。30μmol·L~(-1) Hirulog-s與對照相比kcat/Km值增大了4.75倍,表明Hirulog-s明顯提高了plm的催化效率。通過活性對比表明Hirulog-s的纖溶活性強(qiáng)于水蛭肽Hirulog-1。結(jié)論 Hirulog-s促進(jìn)單鏈尿激酶型纖溶酶原激活劑和纖溶酶原相互活化作用而發(fā)揮纖溶作用,新型合成水蛭肽從酶促反應(yīng)動力學(xué)參數(shù)顯示出優(yōu)良的纖溶作用特性。
[Abstract]:Aim to investigate the effects of leech peptide Hirulog-s on the interaction between single chain urokinase plasminogen activator and plasminogen. Methods the system of single chain urokinase plasminogen activator (pro-uPA) and plasminogen (plg) interaction was constructed, and the different concentration of Hirulog-s was added to the system. The kinetic constants of pro-uPA reaction induced by plasminase (plm) (plm) were compared in the system of pro-uPA and plg interaction, and the catalytic rate and affinity of Hirulog-s to pro-uPA reaction by plm were analyzed. The activity of plasminogen was determined by substrate enzymatic reaction and the kinetic constant was determined based on the single chain urokinase type plasminogen activator activated plasminogen reaction. Results in the reaction system of pro-uPA treated with plm, the kcat value of 30 渭 mol L ~ (-1) Hirulog-s increased by 3.1-fold and decreased by 1.6-fold, which indicated that Hirulog-s could significantly increase the maximum catalytic rate of plm and enhance the affinity. 30 渭 mol L ~ (-1) Hirulog-s increased the kcat/Km value by 4.75 times compared with the control. The results show that Hirulog-s can obviously improve the catalytic efficiency of plm. The results showed that the fibrinolytic activity of Hirulog-s was stronger than that of Hirulog-1. Conclusion Hirulog-s promotes the interaction between single chain urokinase plasminogen activator and plasminogen and plays a role in fibrinolysis. The new synthesis of leech peptide shows excellent fibrinolytic effect from the kinetic parameters of enzymatic reaction.
【作者單位】： 上海海洋大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院;赤峰學(xué)院附屬醫(yī)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81341082,81502955)資助
【分類號】：R96

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本文編號：2151578