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醌茜素通過MAPK及Akt信號(hào)途徑誘導(dǎo)人胃癌AGS細(xì)胞凋亡

發(fā)布時(shí)間:2018-07-23 20:03
【摘要】:目的探討醌茜素對(duì)人胃癌細(xì)胞的凋亡作用及其分子機(jī)制。方法 MTT法檢測(cè)醌茜素對(duì)3種人胃癌AGS、MKN-28及MKN-45細(xì)胞的殺傷作用;Annexin V-FITC/PI雙染法、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)醌茜素誘導(dǎo)AGS細(xì)胞凋亡能力及細(xì)胞內(nèi)活性氧簇(ROS)水平;蛋白質(zhì)免疫印跡法檢測(cè)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)量變化。結(jié)果醌茜素對(duì)3種胃癌細(xì)胞均具有明顯的殺傷作用,且呈濃度依賴性(P0.05)。經(jīng)計(jì)算其IC50值分別為7.07μmol/L、22.55μmol/L及14.18μmol/L。醌茜素能誘導(dǎo)AGS細(xì)胞發(fā)生凋亡,且呈濃度依賴性(P0.001),并能夠促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性氧水平升高(P0.001)。當(dāng)預(yù)處理ROS清除劑NAC后,能夠明顯抑制醌茜素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡(P0.001)。Western blotting結(jié)果顯示促凋亡蛋白p-p38、p-JNK、Bad、cleaved-caspase-3及cleaved-PARP-1表達(dá)量增加(P0.05),抗凋亡蛋白p-Akt、p-ERK及Bcl-2蛋白表達(dá)量減小(P0.05)。結(jié)論醌茜素通過上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ROS水平,調(diào)控MAPK及Akt信號(hào)途徑,進(jìn)而誘導(dǎo)人胃癌AGS細(xì)胞發(fā)生凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of alizarin quinone on apoptosis of human gastric cancer cells and its molecular mechanism. Methods MTT assay was used to detect the cytotoxicity of alizarin to three kinds of human gastric cancer cells AGSN MKN-28 and MKN-45 cells. Flow cytometry was used to detect the apoptosis ability of AGS cells induced by quinone alizarin and the level of intracellular reactive oxygen species (ROS). The expression of apoptosis-related protein was detected by Western blot. Results Quinose alizarin had obvious killing effect on three kinds of gastric cancer cells in a concentration dependent manner (P0.05). The calculated IC50 values are 7.07 渭 mol / L, 22.55 渭 mol/L and 14.18 渭 mol / L, respectively. Alizarin can induce apoptosis of AGS cells in a concentration-dependent manner (P0.001) and increase the level of reactive oxygen species (P0.001). After pretreatment with ROS scavenger NAC, apoptosis induced by alizarin quinone (P0.001). Western blotting results showed that the expression of p-p38 + -JNK-Badcleaved-caspase-3 and cleaved-PARP-1 was increased (P0.05), and the expression of anti-apoptotic protein p-Aktnt-ERK and Bcl-2 decreased (P0.05). Conclusion alizarin can up-regulate MAPK and Akt signaling pathway and induce apoptosis in AGS cells of gastric cancer by upregulating the level of intracellular ROS.
【作者單位】: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院;黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;哈爾濱醫(yī)科大學(xué)第五醫(yī)院;
【基金】:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)研究生創(chuàng)新科研項(xiàng)目(YJSCX2017-Y72) 黑龍江省自然基金(LC2015036) 學(xué)成、引進(jìn)人才科研啟動(dòng)計(jì)劃項(xiàng)目(XYB2013-24)
【分類號(hào)】:R96

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本文編號(hào):2140498

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