發(fā)布時(shí)間：2018-06-14 20:54

  本文選題：BAPTA-AM + 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎　； 參考：《中國藥理學(xué)通報(bào)》2015年05期

【摘要】：目的觀察BAPTA-AM對胞外酸化誘導(dǎo)大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞自噬作用的影響,探討其可能的作用機(jī)制。方法體外使用胰酶-Ⅱ型膠原酶消化法分離提取大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞,分為正常組(p H 7.4)、酸化組(p H 6.0)、以及分別經(jīng)BAPTA-AM處理的正常組和酸化組,激光共聚焦技術(shù)檢測軟骨細(xì)胞胞內(nèi)鈣離子變化,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測細(xì)胞自噬基因Beclin-1、ULK1 mRNA的表達(dá),Western blot法檢測自噬蛋白LC3的表達(dá),吖啶橙染色分析細(xì)胞自噬溶酶體形成情況。結(jié)果與p H 7.4正常組比較,p H 6.0酸化刺激明顯增加大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度,且自噬標(biāo)志物Beclin-1、ULK1 mRNA及LC3Ⅱ蛋白表達(dá)均明顯升高,酸性自噬溶酶體形成增多,同時(shí)酸化刺激能引起Ca MKKβ及pAMPK蛋白表達(dá)水平增高,磷酸化蛋白p-m TOR水平明顯降低。BAPTA-AM酸化組自噬水平和Ca MKKβ及p-AMPK表達(dá)明顯降低,p-m TOR表達(dá)明顯升高。結(jié)論 BAPTA-AM能明顯減弱胞外酸化誘導(dǎo)軟骨細(xì)胞自噬作用,其機(jī)制可能與抑制胞內(nèi)Ca2+有關(guān)。
[Abstract]:Objective to observe the effect of BAPTA-AM on the autophagy induced by extracellular acidification in rat articular chondrocytes and to explore its possible mechanism. Methods Rat articular chondrocytes were isolated and extracted by trypsin 鈪，

本文編號：2018931