本文選題：少棘蜈蚣 + 轉(zhuǎn)錄組　； 參考：《中南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2016年04期

【摘要】：采用Illumina II代轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)構(gòu)建了湖北少棘蜈蚣毒腺轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù),從中篩選到一個(gè)全新的毒素多肽編碼基因KTX-Ssm175.經(jīng)序列比對(duì)顯示KTX-Ssm175多肽與κ-SLPTX-Ssm1a高度同源,提示KTX-Ssm175多肽為一種新的電壓門(mén)控性鉀通道阻斷劑.采用基因工程技術(shù)構(gòu)建了p GEX-4T-1-KTX-Ssm175原核表達(dá)載體,通過(guò)GST融合蛋白表達(dá)法對(duì)KTX-Ssm175多肽在大腸桿菌Rosetta中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)和分離純化.MALDI-TOF-MS質(zhì)譜測(cè)定顯示純化的KTX-Ssm175多肽分子量與理論值相吻合,說(shuō)明成功實(shí)現(xiàn)了KTX-Ssm175多肽的基因工程制備,為深入研究其結(jié)構(gòu)與功能提供了物質(zhì)基礎(chǔ).
[Abstract]:A novel toxin peptide encoding gene KTX-Ssm175was constructed by Illumina II generation transcriptome sequencing technique. Sequence alignment showed that KTX-Ssm175 polypeptide was highly homologous to 魏 -SLPTX-Ssm1a, suggesting that KTX-Ssm175 peptide is a new voltage-gated potassium channel blocker. The prokaryotic expression vector of pGEX-4T-1-KTX-Ssm175 was constructed by genetic engineering technique. KTX-Ssm175 polypeptide was induced and expressed in Rosetta by GST fusion protein expression method. The molecular weight of purified KTX-Ssm175 polypeptide was consistent with the theoretical value by MALDI-TOF-MS mass spectrometry. The results show that the genetic engineering of KTX-Ssm175 polypeptide has been successfully realized, which provides a material basis for further study of its structure and function.
【作者單位】： 中南民族大學(xué)藥學(xué)院;中南民族大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81373379) 湖北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2015CFB491) 國(guó)家級(jí)大學(xué)生創(chuàng)新訓(xùn)練項(xiàng)目(GCX15009)
【分類(lèi)號(hào)】：R99

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本文編號(hào)：2000703