本文選題：胰島素抵抗 + 內(nèi)皮細胞�。� 參考：《吉林大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：胰島素抵抗常與內(nèi)皮功能障礙同時出現(xiàn)，它們擁有共同的發(fā)病機制（如高血糖、高血脂、高胰島素、炎癥、凝血功能障礙、激素釋放紊亂等），相互影響、相互交錯并加重，最終可導(dǎo)致糖尿病、肥胖、代謝綜合征、全身心腦血管系統(tǒng)疾病及相關(guān)靶器官損害的出現(xiàn)和發(fā)展。所以說二者是上述疾病形成的主要推動力和重要基礎(chǔ)條件。 正常情況下胰島素可通過與內(nèi)皮細胞上的胰島素受體結(jié)合后激活I(lǐng)RS（胰島素受體底物）并憑借特定的細胞信號通路相繼激活PI3K（磷脂酰肌醇-3激酶）、Akt（蛋白激酶B）、eNOS（內(nèi)皮型一氧化氮合酶）以刺激內(nèi)皮細胞產(chǎn)生一氧化氮（NO），完成其使血管擴張，血流增加的生物學(xué)特性。但是當(dāng)處于高糖、氧化應(yīng)激等條件下胰島素信號更容易通過MAPK（絲裂原活化蛋白激酶）——ET-1細胞信號通路作用血管內(nèi)皮細胞，刺激血管內(nèi)皮素-1（ET-1）和粘附分子（AM）的表達，這樣可達到與IRS-1——PI3K——Akt信號傳導(dǎo)通路相反的生理、病理反應(yīng)，使血管收縮，血流減少，細胞增殖、增生，血栓容易形成，凝血系統(tǒng)異常，從而影響內(nèi)皮細胞功能，導(dǎo)致內(nèi)皮細胞完整性被破壞，引發(fā)內(nèi)皮細胞功能障礙。反過來內(nèi)皮功能障礙也可影響胰島素的正常生物特性，使之不能有效和其受體結(jié)合并產(chǎn)生細胞信號，最終可導(dǎo)致胰島素靶器官對胰島素調(diào)節(jié)葡萄糖利用的靈敏度和/或代謝作用的反應(yīng)下降而引發(fā)胰島素抵抗。導(dǎo)致多系統(tǒng)疾病的能量穩(wěn)態(tài)、細胞生長和組織修復(fù)之間失衡，出現(xiàn)葡萄糖和脂質(zhì)代謝紊亂，表現(xiàn)為脂質(zhì)沉積、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)增多，趨化因子和細胞因子隨即釋放而損傷血管，進一步加重胰島素抵抗和內(nèi)皮功能障礙的程度，最終導(dǎo)致多種臨床慢性疾病的出現(xiàn)直至MODS（多器官功能障礙綜合征）的發(fā)生。 因此胰島素和內(nèi)皮細胞能否正常發(fā)揮生理效應(yīng)，對保持健康機體內(nèi)環(huán)境中代謝和血流動力學(xué)間的平衡起著至關(guān)重要的作用。所以尋找能夠同時增強胰島素敏感性并保護血管內(nèi)皮細胞，確保胰島細胞能如常分泌適宜胰島素作用正常內(nèi)皮細胞以使二者生理功能得以如常發(fā)揮，避免或減輕胰島素抵抗和內(nèi)皮功能障礙的病理損害發(fā)展到如血管結(jié)構(gòu)異常增生及斷裂、胰島素靶器官喪失對其敏感性、胰島分泌功能耗竭影響代謝導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境紊亂引發(fā)多種疾病出現(xiàn)并走向終末階段以致不可逆轉(zhuǎn)，降低相關(guān)疾病如糖尿病、冠心病的發(fā)病率及死亡率的方法，，對臨床工作將大有裨益。 吡格列酮（Pioglitazone）作為噻唑烷二酮家族成員之一，屬于胰島素增敏劑。而因為吡格列酮具有提高胰島素靶器官對胰島素的敏感性，促進葡萄糖的攝取從而降低血糖的作用，目前臨床工作中主要用來針對2型糖尿病患者進行治療。新近一些實驗、調(diào)查、研究表明吡格列酮可能對損傷的內(nèi)皮功能有改善作用，但是否對內(nèi)皮細胞有保護作用及具體機制依然沒有明確提出。本研究應(yīng)用吡格列酮作用胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞，觀察其對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞是否具有保護作用及可能的作用機制。 方法： 1、以高濃度葡萄糖培養(yǎng)基加糖皮質(zhì)激素和不同濃度的胰島素培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞，通過模擬人體胰島素抵抗形成的常見環(huán)境建立胰島素模型。利用葡萄糖消耗實驗檢測糖耗量，利用硝基還原酶法測定一氧化氮的含量，確定胰島素血管內(nèi)皮細胞造模的最佳時間和最佳劑量；利用RT-PCR、western blot方法觀察胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞IRS-1、PPAR-γ的mRNA基因及蛋白表達水平，觀察胰島素抵抗對該兩種蛋白的影響。 2、在各組胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞中加入不同濃度的吡格列酮溶液，檢測其對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞的作用，利用MTT法觀察細胞活性，利用流式細胞儀檢測細胞凋亡率、分光光度法測量Caspase-3，檢測各組中細胞凋亡情況；利用硝基還原酶法測定一氧化氮的含量，利用western blot檢測eNOS蛋白質(zhì)的表達情況。 3、利用RT-PCR、western blot方法檢測各吡格列酮組對照組中IRS-1、PPAR-γ、PI3K、Akt mRNA及蛋白質(zhì)的表達情況，探討吡格列酮對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞的保護機制。 結(jié)果： 1、葡萄糖消耗結(jié)果顯示，與對照組比較，10-4mM胰島素+30mM葡萄糖+1μM地塞米培養(yǎng)48h葡萄糖消耗最少，NO含量最低（P0.05），為模型最佳劑量；與對照組相比，胰島素抵抗模型組IRS-1、PPAR-γ基因、蛋白表達降低。胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞造模成功，并且該模型抑制IRS-1、PPAR-γ的表達。 2、MTT實驗結(jié)果顯示：吡格列酮組細胞生存率明顯高于胰島素抵抗模型組，呈劑量依賴性，50ng/mL為最佳實驗劑量；與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮可以有效的降低細胞凋亡率。與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮組可以有效的降低caspase-3活性；與胰島素抵抗模型組相比，吡格列酮組（50ng/mL）可以有效的升高eNOS蛋白水平表達。 3、吡格列酮作用胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞后，與對照組相比，IRS-1、PI3K，AktmRNA及蛋白的表達量升高，吡格列酮可能通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt信號傳導(dǎo)途徑對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞起到保護作用。 結(jié)論： 1、成功復(fù)制胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞模型。 2、吡格列酮可能對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞起到保護作用，降低細胞損傷，其分子機制可能通過激活PI3K-Akt信號傳導(dǎo)通路實現(xiàn)其保護作用。 創(chuàng)新點從細胞信號通路角度探討吡格列酮對胰島素抵抗血管內(nèi)皮細胞的保護作用，為其臨床應(yīng)用提供實驗及理論依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R96

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 游捷,陳瑤,黃培基,林哲章;血清可溶性腫瘤壞死因子受體與胰島素抵抗的關(guān)系[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;2002年01期

2 楊凌輝,鄒大進;肥胖致胰島素抵抗的機制[J];中華內(nèi)分泌代謝雜志;2002年03期

3 管立學(xué),王敬先,王景明,陳亮,朱國明,王瑞麗;血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因多態(tài)性與胰島素抵抗的臨床應(yīng)用研究[J];中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志;2002年02期

4 劉鐵迎;微血管內(nèi)皮異常與胰島素抵抗[J];中國老年學(xué)雜志;2002年01期

5 蔡紅衛(wèi);脂聯(lián)素與胰島素抵抗的研究進展[J];重慶醫(yī)學(xué);2002年11期

6 時海波,程雷,徐其昌;阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征與胰島素抵抗[J];臨床耳鼻咽喉科雜志;2003年05期

7 盧德成,羅佐杰;肥胖與胰島素抵抗有關(guān)調(diào)控因素的研究進展[J];臨床薈萃;2003年16期

8 周昭明;小劑量胰島素治療糖尿病酮癥酸中毒68例觀察[J];國際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報;2003年12期

9 王繼旺;吸煙與胰島素抵抗[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)分泌學(xué)分冊);2003年04期

10 楊瑞平 ,甘曉健;老年2型糖尿病患者血清瘦素與胰島素及胰島素抵抗關(guān)系的探討[J];廣西醫(yī)學(xué);2003年11期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李晨鐘;張素華;舒昌達;任偉;;氯喹對胰島素抵抗大鼠胰島素降解酶基因及酶蛋白表達的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

2 劉鐵迎;高鑫;江孫蘇;孫璇;周庭川;姚君厘;余丹青;雪怡;;肥胖患者胰島素抵抗和血漿vWF水平的變化[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

3 都健;劉國良;;胰島素抵抗大鼠內(nèi)皮依賴性血管舒張功能及其發(fā)生機制的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

4 曲波;;中醫(yī)藥防治胰島素抵抗的研究進展[A];第七次中國中西醫(yī)結(jié)合糖尿病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

5 李光偉;;胰島素抵抗評估[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

6 郭正宇;尹衛(wèi)東;宋硯明;鄧小健;;褪黑素改善胰島素抵抗大鼠海馬胰島素信號通路障礙[A];湖南省生理科學(xué)會2008年度學(xué)術(shù)年會論文摘要匯編[C];2008年

7 張榮;單慧敏;趙三妹;許榮q;;高脂飼料誘導(dǎo)的大鼠胰島素抵抗及與血清瘦素的關(guān)系[A];加入WTO和中國科技與可持續(xù)發(fā)展——挑戰(zhàn)與機遇、責(zé)任和對策（下冊）[C];2002年

8 柴國祿;譚麗艷;楊玉紅;劉晶礫;李麗疆;;糖尿病合并高血壓患者胰島素抵抗與血漿血管緊張素Ⅱ及內(nèi)皮素的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會第六次全國內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

9 陳瑩;高彥彬;;中醫(yī)藥對胰島素抵抗及胰島素抵抗綜合征的研究進展[A];第七次全國中醫(yī)糖尿病學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2003年

10 孫琳;班博;于世鵬;孫冰;趙秀貞;;胰島素抵抗、血脂與老年2型糖尿病合并高血壓的關(guān)系[A];第三屆全國老年醫(yī)學(xué)進展學(xué)術(shù)會議論文集[C];2003年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 孟懷東;“致命四重奏”與胰島素抵抗[N];中國醫(yī)藥報;2007年

2 ;應(yīng)正確認識胰島素[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

3 ;哪些人不宜過早應(yīng)用胰島素[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2008年

4 劉燕玲;中醫(yī)藥防治胰島素抵抗[N];健康報;2002年

5 本報記者趙晴晴;胰島素治療后為何發(fā)胖？[N];健康時報;2003年

6 本報特約記者 徐夕;“口服植物胰島素”并不存在[N];衛(wèi)生與生活報;2005年

7 河南省鄭州市第三人民醫(yī)院內(nèi)分泌科副主任醫(yī)師 劉龍誕邋陳錦屏 整理;胰島素抵抗試試增敏劑[N];健康報;2007年

8 董飛俠;解開胰島素抵抗密碼[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2006年

9 北京協(xié)和醫(yī)院主任醫(yī)生 姚我清;胰島素抵抗的藥物治療[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

10 指導(dǎo)專家 全軍糖尿病診治中心、306醫(yī)院內(nèi)分泌科副主任 劉彥君 博士;現(xiàn)在開始，讓您的胰島素活起來！[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王曉凌;高脂飲食大鼠的胰島素抵抗及肝脂肪酸的代謝[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

2 吳勉云;高脂誘導(dǎo)胰島素抵抗機理及花生四烯酸對胰島素抵抗預(yù)防作用研究[D];華中科技大學(xué);2007年

3 萬學(xué)東;褪黑素對體內(nèi)體外高脂誘導(dǎo)胰島素抵抗的預(yù)防作用及機制研究[D];華中科技大學(xué);2009年

4 易瑋;針刺對胰島素抵抗干預(yù)作用的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2002年

5 邵偉娟;胰島素對小鼠早期胚胎發(fā)育的程序化影響及相關(guān)分子機理的研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

6 劉蓉;胰島素油溶液的制備及性質(zhì)研究[D];中南大學(xué);2008年

7 張治國;乙酸調(diào)節(jié)脂代謝及乙酸、醋粉預(yù)防胰島素抵抗研究[D];浙江大學(xué);2008年

8 關(guān)宇光;不同運動時間對胰島素抵抗大鼠尾加壓素Ⅱ及其受體影響的研究[D];北京體育大學(xué);2007年

9 張靜;游離脂肪酸致胰島素抵抗的作用機制[D];中國醫(yī)科大學(xué);2004年

10 完強;乙醇對大鼠骨骼肌胰島素敏感性的影響及機制探討[D];山東大學(xué);2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 于婷;胰島素抵抗大鼠硫化氫/胱硫醚γ—裂解酶體系的實驗觀察[D];山東大學(xué);2007年

2 甘宇;2型糖尿病患者血清真胰島素水平與血脂的關(guān)系研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2003年

3 楊衛(wèi)紅;高糖和胰島素對鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的影響及其機制研究[D];華中科技大學(xué);2007年

4 李小寧;骨骼肌組織磷脂酰肌醇3激酶表達與妊娠期糖尿病胰島素抵抗關(guān)系研究[D];青島大學(xué);2008年

5 侯連國;胰島素抵抗與2型糖尿病大鼠心肌脂肪酸代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平的改變[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年

6 鄧娟;圍術(shù)期胰島素抵抗相關(guān)影響因素的分析[D];中南大學(xué);2009年

7 李海東;蛋白質(zhì)酪氨酸硝化對胰島素磷酸化信號的影響[D];華中科技大學(xué);2008年

8 張紅玉;哈薩克族肥胖、胰島素抵抗與糖調(diào)節(jié)異常的關(guān)系[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

9 劉慧琳;胰島素抵抗與絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的關(guān)系初探[D];四川大學(xué);2005年

10 張俊防;真胰島素、胰島素原與2型糖尿病大血管病[D];河北醫(yī)科大學(xué);2002年

本文編號：1996331