本文選題：單克隆抗體 + 前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素(PCSK)��； 參考：《中國新藥雜志》2015年15期

【摘要】：目的:建立前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)單抗的生物學活性檢測方法。方法:利用系列稀釋的PCSK9單抗以劑量依賴性方式阻斷PCSK9與低密度脂蛋白受體(LDLR)結合,增加低密度脂蛋白(LDL)在Hep G2細胞內(nèi)攝取率,通過BODIPY類熒光染料標記低密度脂蛋白(BODIPY-LDL)檢測胞內(nèi)熒光強度來反映PCSK9單抗的生物學活性,并用PCSK9單抗參比品計算供試品相對百分效價。結果:PCSK9、PCSK9單抗參比品及供試品在該方法中均存在量效關系,且符合四參數(shù)方程式:Y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D。利用該法對4批PCSK9單抗供試品進行檢測,每批供試品重復試驗3次,PCSK9單抗的相對百分效價的平均值在94.25%~110.77%之間,變異系數(shù)均小于15%。結論:該方法靈敏度高、重復性好、結果準確,可作為PCSK9單抗生物學活性測定的常規(guī)檢測方法。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the determination of bioactivity of proprotein converting enzyme lysogenin 9 PCSK9 monoclonal antibody. Methods: a series of diluted PCSK9 monoclonal antibodies were used to block the binding of PCSK9 to LDLR in a dose-dependent manner, and to increase the uptake rate of LDL in Hep G2 cells. The bioactivity of PCSK9 McAb was measured by BODIPY fluorescent dye labeled low density lipoprotein (LDL). The relative titer of PCSK9 McAb was calculated by using PCSK9 McAb reference material. Results there was a dose-effect relationship between the reference sample and the test sample of the McAb of 10% PCSK9 and PCSK9, which was in accordance with the four-parameter equation: 1 X% Cnb / [1 X / Cnb] D. the results showed that there was a dose-effect relationship between the reference sample and the tested sample in this method. Four batches of PCSK9 McAbs were tested by this method. The average value of the relative percent titer of each sample was 94.25% and 110.77%, and the coefficient of variation was less than 15%. Conclusion: this method is sensitive, reproducible and accurate. It can be used as a routine method for the determination of biological activity of PCSK9 monoclonal antibody.
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院衛(wèi)生部生物技術產(chǎn)品檢定方法及其標準化重點實驗室;
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(2014ZX09304311-001;2012ZX09304010)
【分類號】：R927.1

【共引文獻】

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本文編號：1969455