本文選題：尼氟滅酸 + 海馬神經(jīng)元�。� 參考：《吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年05期

【摘要】：目的:探討尼氟滅酸(NFA)對氯化鈷(CoCl2)誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元凋亡的抑制作用,闡明其可能的機制。方法:原代培養(yǎng)乳鼠海馬細胞,并在倒置顯微鏡下觀察海馬細胞的形態(tài)變化。將海馬神經(jīng)元隨機分為對照組(含1%血清培養(yǎng)液)、CoCl2損傷組(含200μmol·L-1 NFA等體積培養(yǎng)液)和不同濃度NFA組(在CoCl2損傷組基礎(chǔ)上加入20、40、80μmol·L-1 NFA)。MTT法檢測各組海馬神經(jīng)元的存活率,流式細胞術(shù)分析海馬神經(jīng)元調(diào)亡率,ELISA法檢測神經(jīng)元培養(yǎng)液上清中相關(guān)凋亡蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3和缺氧相關(guān)蛋白低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)的表達水平。結(jié)果:海馬神經(jīng)元在培養(yǎng)7d后形態(tài)規(guī)則,突觸相互交織形成網(wǎng)絡(luò)。MTT檢測,與對照組比較,CoCl2損傷組神經(jīng)元存活率明顯降低(P0.01);與CoCl2損傷組比較,20、40和80μmol·L-1 NFA組神經(jīng)元存活率升高(P0.05或P0.01)。流式細胞術(shù)檢測,與對照組比較,CoCl2損傷組神經(jīng)元早期凋亡率、晚期凋亡率和總凋亡率升高(P0.05或P0.01);與CoCl2損傷組比較,20、40和80μmol·L-1 NFA組神經(jīng)元早期凋亡率、晚期凋亡率及總凋亡率下降(P0.05或P0.01)。ELISA法檢測,與對照組比較,CoCl2損傷組神經(jīng)元培養(yǎng)液上清中HIF-1α、caspase-3和Bax表達水平升高(P0.01);與CoCl2損傷組比較,20和40μmol·L-1 NFA組神經(jīng)元培養(yǎng)上清中HIF-1α、caspace-3和Bax表達水平下降,Bcl-2表達水平升高(P0.05或P0.01)。結(jié)論:NFA可以降低CoCl2對海馬神經(jīng)元的缺氧損傷作用,其機制與抑制HIF-1α的表達、下調(diào)Bax/Bcl-2及抑制神經(jīng)元凋亡有關(guān)聯(lián)。
[Abstract]:Aim: to investigate the inhibitory effect of NFAA on apoptosis of hippocampal neurons induced by cobalt chloride (CoCl2) and to elucidate its possible mechanism. Methods: the hippocampal cells were cultured in primary culture and the morphological changes of hippocampal cells were observed under inverted microscope. Hippocampal neurons were randomly divided into two groups: the control group (containing 1% serum culture medium) and the control group (containing 200 渭 mol L-1 NFA) and the NFA group with different concentrations (20 ~ 4080 渭 mol ~ (-1) NFA).MTT) was added to the CoCl2 injury group to detect the survival rate of hippocampal neurons in each group. Apoptosis rate of hippocampal neurons was analyzed by flow cytometry and the expression of apoptotic protein Bcl-2Caspase-3 and hypoxia inducible factor (HIF-1 偽) in the supernatant of cultured neurons was detected by Elisa. Results: the morphology of hippocampal neurons was regular and the synapses intertwined with each other to form a network. MTT assay showed that the survival rate of hippocampal neurons in the CoCl2 injured group was significantly lower than that in the control group, and the survival rate of neurons in the NFA group was significantly higher than that in the CoCl2 injury group (P0.05 or P0.01). Compared with the control group, the neuronal early apoptosis rate, late apoptosis rate and total apoptosis rate were increased by flow cytometry (P 0.05 or P 0.01), and the early apoptosis rate of neurons in the NFA group (20 40 渭 mol L-1) and 80 渭 mol L-1 NFA group (80 渭 mol L-1) was higher than that in the control group (P 0.05 or P 0.01). The late apoptosis rate and the total apoptotic rate were detected by P05 or P0.01).ELISA. Compared with the control group, the expression of HIF-1 偽 -caspase-3 and Bax in the supernatant of cultured neurons in the CoCl2 injured group was higher than that in the CoCl2 injury group, and the expression level of HIF-1 偽 -caspase-3 and Bax in the supernatant of the cultured supernatant of the CoCl2 group was significantly lower than that in the CoCl2 injury group (P 0.05 or P 0.01). Conclusion the effects of CoCl2 on hypoxic injury of hippocampal neurons can be reduced by CoCl2. The mechanism is related to the inhibition of the expression of HIF-1 偽, the down-regulation of Bax/Bcl-2 and the inhibition of neuronal apoptosis.
【作者單位】： 吉林醫(yī)藥學(xué)院生理學(xué)教研室;吉林醫(yī)藥學(xué)院病理學(xué)教研室;吉林醫(yī)藥學(xué)院病原學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助課題(81201671) 吉林省教育廳科研項目資助課題(2014369)
【分類號】：R965

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：1897729