本文選題：雞冠 + 透明質(zhì)酸��； 參考：《哈爾濱商業(yè)大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：對以雞冠為原料提取的透明質(zhì)酸進(jìn)行純化以及降解,并對其抗氧化效果進(jìn)行研究。 以得率為標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)透明質(zhì)酸,通過對比雙酶法和試劑法兩種方法的提取效果,并采用響應(yīng)曲面法優(yōu)化提取條件,確定雙酶法提取的最佳工藝條件為：酶用量0.004g,酶解溫度46℃,酶解時間2.3h,該工藝制備透明質(zhì)酸得率為10.36%,對乙醇浸泡法提取雞冠中透明質(zhì)酸的料液比、乙醇濃度和靜置時間等因素進(jìn)行優(yōu)化組合,確定乙醇浸泡法提取透明質(zhì)酸的最佳工藝條件為：料液比1：177(g/mL)、乙醇濃度90%、靜置時間25.7h,雞冠中透明質(zhì)酸的得率為27.37%。 以純度為檢驗(yàn)指標(biāo),對陰離子樹脂法和溶劑沉淀法純化雞冠中透明質(zhì)酸的方法進(jìn)行比較。對陰離子交換樹脂進(jìn)行靜態(tài)吸附及解析實(shí)驗(yàn),確定選用201×7陰離子交換樹脂,得到透明質(zhì)酸最優(yōu)純化條件為：吸附液與樹脂體積比為4：1(g/mL)；樹脂吸附時間為45min洗脫劑濃度為0.6mol/L的氯化鈉溶液；洗脫劑流速為1.0mL/min;洗脫劑與樹脂的體積比為4：1(g/mL)。溶劑沉淀法純化透明質(zhì)酸,選擇十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)為最佳溶劑,通過單因素及響應(yīng)曲面試驗(yàn)確定最佳工藝條件為：CTAB濃度為11.90%,pH值為9.0,HA粗提液與CTAB溶液料液體積比為1：3.70(g/mL)。對離子交換法和溶劑沉淀法分別采用雙光束紫外分光光度法測定純化后透明質(zhì)酸的含量,純度分別為40.05%和82.29%。以此確定最佳純化方法為溶劑沉淀法,提取物中透明質(zhì)酸的純度明顯得到提高。 對提取后的物質(zhì)進(jìn)行檢測,證明提取的物質(zhì)為透明質(zhì)酸；對純化后的物質(zhì)進(jìn)行紫外光譜(UV)檢測及高效液相色譜(HPLC)檢測,對比得出純化以后的樣品與標(biāo)品出峰位置一致。對純化后的樣品進(jìn)行紅外光譜檢測,得到純化后物質(zhì)和標(biāo)品透明質(zhì)酸的結(jié)構(gòu)一致。進(jìn)一步證明從雞冠中提取的物質(zhì)為透明質(zhì)酸。 應(yīng)用還原糖法測定降解后透明質(zhì)酸的分子量,通過單因素試驗(yàn)、響應(yīng)曲面法分析建立二次回歸模型,對降解時間、自由基的添加量,降解pH,降解溫度和料液比的影響因素進(jìn)行優(yōu)化組合,確定降解雞冠中透明質(zhì)酸的最佳工藝條件為：降解時間5min、H202濃度為1.67mol/L.料液比(Vc:H2O2)為1：4.13(g/mL),pH為8.0,溫度為25℃時降解程度最好。該工藝降解透明質(zhì)酸得分子量最低為1791。 對雞冠中透明質(zhì)酸的抗氧化活性進(jìn)行研究,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：透明質(zhì)酸對五種自由基表現(xiàn)出了良好的清除能力。對總抗氧化能力、超氧陰離子、羥自由基、烷基自由基、脂質(zhì)體的最大抑制率分別為18.97U/mL、42.87%、50.69%、41.22%、50.69%。
[Abstract]:The hyaluronic acid extracted from chicken crowns was purified and degraded, and its antioxidant effect was studied. The extraction efficiency of hyaluronic acid was tested by using yield as standard. By comparing the extraction effects of two methods, and using the response surface method to optimize the extraction conditions, the optimum conditions were determined as follows: enzyme dosage 0.004 g, enzymatic hydrolysis temperature 46 鈩，

本文編號：1818366