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靶向血管內(nèi)皮生長因子受體2超聲造影劑的制備及其體外尋靶能力實驗研究

發(fā)布時間:2018-04-23 10:00

  本文選題:靶向超聲造影劑 + 生物素-親和素 ; 參考:《腫瘤影像學(xué)》2016年04期


【摘要】:目的:制備靶向血管內(nèi)皮生長因子受體2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)超聲造影劑,評價其物理性質(zhì)及對腫瘤細(xì)胞的尋靶能力。方法:利用生物素-親和素橋接法將微米級超聲造影劑USphere與VEGFR2抗體結(jié)合,制備靶向VEGFR2超聲造影劑,檢測其粒徑分布;用免疫熒光法檢測不同細(xì)胞株(高轉(zhuǎn)移肝腫瘤細(xì)胞MHCC-97H及正常肝細(xì)胞LO2)中VEGFR2表達強度,以及靶向與非靶向VEGFR2超聲造影劑對MHCC-97H和LO2細(xì)胞的結(jié)合能力。結(jié)果:靶向VEGFR2超聲造影劑微泡分布均勻,平均粒徑(1 012.67±78.59)nm,免疫熒光法顯示VEGFR2抗體可特異性連接于微泡表面。標(biāo)記熒光的VEGFR2抗體在MHCC-97H細(xì)胞高表達,在LO2細(xì)胞低表達。免疫熒光定量顯示靶向VEGFR2造影劑在MHCC-97H細(xì)胞中的熒光強度比值(微泡熒光強度/細(xì)胞熒光強度)為0.75±0.32,顯著高于其他3組(P0.01)。結(jié)論:本研究成功制備靶向VEGFR2超聲造影劑,其大小穩(wěn)定均一,可與高表達VEGFR2的MHCC-97H細(xì)胞特異性結(jié)合。
[Abstract]:Aim: to prepare 2(vascular endothelial growth factor receptor 2 VEGFR2 ultrasound contrast agent and evaluate its physical properties and targeting ability to tumor cells. Methods: the micron ultrasound contrast agent (USphere) was combined with VEGFR2 antibody by biotin-avidin bridging method to prepare the targeted VEGFR2 ultrasound contrast agent and its particle size distribution was detected. The expression of VEGFR2 in different cell lines (high metastatic liver tumor cells MHCC-97H and normal hepatocytes LO2) and the binding ability of targeted and non-targeted VEGFR2 ultrasound contrast agents to MHCC-97H and LO2 cells were detected by immunofluorescence assay. Results: the average diameter of VEGFR2 ultrasound contrast agent was 1 012.67 鹵78.59 nm. Immunofluorescence assay showed that VEGFR2 antibody could be specifically linked to the surface of microbubble. The fluorescent VEGFR2 antibody was highly expressed in MHCC-97H cells and low in LO2 cells. Immunofluorescence quantitative analysis showed that the fluorescence intensity ratio of targeted VEGFR2 contrast agent in MHCC-97H cells was 0.75 鹵0.32, which was significantly higher than that in other three groups (P 0.01). Conclusion: in this study, the target VEGFR2 ultrasound contrast agent was successfully prepared, and its size was stable and uniform, which could bind to MHCC-97H cells with high expression of VEGFR2.
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院超聲科;江蘇省南京鼓樓醫(yī)院超聲科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(No:81371577,81571676)
【分類號】:R943;R96

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本文編號:1791476

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