穿膜肽凋亡素融合蛋白誘導黑色素瘤細胞凋亡的實驗研究
本文選題:細胞穿膜肽 切入點:蛋白轉導 出處:《中國藥學雜志》2017年02期
【摘要】:目的探討新型細胞穿膜肽h PP10和凋亡素Apoptin融合蛋白介導小鼠黑色素瘤細胞B16凋亡的效應。方法構建p ET15b-h PP10-Apoptin、p ET15b-Apoptin原核表達質粒,經(jīng)IPTG誘導和NI-NTA樹脂純化后得到融合蛋白;運用TUNEL法體外檢測h PP10-Apoptin誘導B16細胞的凋亡效應;制備荷瘤小鼠模型,并在體內檢測h PP10-Apoptin融合蛋白的抗腫瘤能力。結果融合蛋白h PP10-Apoptin經(jīng)Western blot鑒定正確,且此融合蛋白能在體內外有效誘導B16黑色素瘤細胞凋亡。結論新型細胞穿膜肽h PP10可有效攜帶Apoptin穿透細胞膜并發(fā)揮抗腫瘤作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of a novel transmembrane peptide h PP10 and apoptin Apoptin fusion protein on the apoptosis of murine melanoma cell line B16.Methods the prokaryotic expression plasmid of p ET15b-h PP10-Apoptinine p ET15b-Apoptin was constructed, and the fusion protein was obtained by IPTG induction and NI-NTA resin purification. The apoptosis of B16 cells induced by h PP10-Apoptin was detected by TUNEL assay in vitro.The anti tumor ability of h PP10-Apoptin fusion protein was detected in vivo.Results the fusion protein h PP10-Apoptin was proved to be correct by Western blot, and this fusion protein could effectively induce apoptosis of B16 melanoma cells in vitro and in vivo.Conclusion h PP10, a novel cell membrane penetrating peptide, can effectively carry Apoptin through the cell membrane and play an anti-tumor effect.
【作者單位】: 三峽大學腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點實驗室;三峽大學醫(yī)學院病原生物與免疫學系;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81501330) 湖北省科技計劃自然科學基金資助項目(2010CDB10705) 三峽大學人才啟動基金資助項目(KJ2014B066)
【分類號】:R96
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,本文編號:1724741
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