本文選題：順式頭孢丙烯　切入點：反式頭孢丙烯　出處：《河北醫(yī)科大學》2015年碩士論文

【摘要】：頭孢丙烯為第二代半合成頭孢菌素類抗生素,是順式和反式兩種異構體的混合體,順式異構體與反式異構體的含量比值約9:1,被臨床廣泛應用。目前已有文獻報道,均采用微生物法和高效液相色譜法測定人血漿中頭孢丙烯的濃度,但仍存在一定的局限性。頭孢丙烯的順反異構體不同于手性化合物的光學異構體,在非手性條件下即可實現(xiàn)分離。本研究首次建立LC-MS/MS同時測定人血漿中順式頭孢丙烯、反式頭孢丙烯的定量分析方法;以國內(nèi)已經(jīng)批準上市的原研藥頭孢丙烯片(中美上海施貴寶制藥有限公司生產(chǎn))為參比制劑,國產(chǎn)頭孢丙烯片(北京京豐制藥有限公司生產(chǎn))為受試制劑,對國產(chǎn)頭孢丙烯和原研藥進行生物等效性評價;同時探討順反頭孢丙烯藥代動力學是否具有立體選擇性。第一部分人血中順式頭孢丙烯和反式頭孢丙烯濃度測定方法的建立目的:建立人血漿中順式頭孢丙烯和反式頭孢丙烯濃度的LC-MS/MS定量分析方法。方法:在冰水浴條件下,以頭孢氨芐為內(nèi)標,血漿樣本經(jīng)乙腈蛋白沉淀法處理后用Synergi 4u Hydro-RP 80A色譜柱(150 mm×2.0 mm I.D.,4μm粒徑,美國Phenomenex Inc.)進行分離,以甲醇-0.2%甲酸(25:75,v/v)為流動相。采用電噴霧電離(ESI)源負離子模式、多反應監(jiān)測(MRM),用于定量分析的離子反應分別為m/z 388.0#174;m/z 205.0(順式、反式頭孢丙烯)和m/z 346.1#174;m/z 268.1(內(nèi)標頭孢氨芐)。結果:在本研究建立的LC-MS/MS樣本測定條件下,順式頭孢丙烯在0.125~16.0μg/m L血漿濃度范圍內(nèi)線性良好,r0.998,反式頭孢丙烯在0.0403~1.72μg/m L血漿濃度范圍內(nèi)線性良好,r0.998,順式和反式頭孢丙烯的定量下限分別為0.125μg/m L和0.0403μg/m L;順式頭孢丙烯批內(nèi)和批間精密度(RSD)均小于9.7%,準確度(RE)在-0.8%~4.7%間,反式頭孢丙烯批內(nèi)和批間精密度(RSD)均小于6.5%,準確度(RE)在0.6%~2.2%間;順式頭孢丙烯的平均基質(zhì)效應、平均回收率分別為(109.7±3.2)%和(80.5±1.9)%,反式頭孢丙烯的平均基質(zhì)效應、平均回收率分別為(104.5±3.3)%和(80.2±2.8)%;順式頭孢丙烯和反式頭孢丙烯血漿樣本冰水浴中放置6 h、處理后室溫放置10 h、反復凍融3次和凍存于-80℃35 d后均穩(wěn)定。結論:本研究首次建立了測定人血漿中頭孢丙烯濃度的LC-MS/MS分析方法,此方法是一種快速、靈敏、穩(wěn)定、重現(xiàn)性高的質(zhì)譜方法。該法符合生物樣品分析要求,可用于頭孢丙烯片的生物等效性研究。第二部分頭孢丙烯片劑健康人體生物等效性研究目的:健康受試者單劑量空腹口服北京京豐制藥有限公司研制的頭孢丙烯片(受試制劑)與中美上海施貴寶制藥有限公司生產(chǎn)的頭孢丙烯片(參比制劑)后,通過已建立的測定人血漿中順式和反式頭孢丙烯濃度的LC-MS/MS定量分析方法,測定血漿中順式頭孢丙烯和反式頭孢丙烯的濃度,評價受試制劑與參比制劑是否具有生物等效性。方法:采用單中心、隨機、開放、雙周期、自身交叉的試驗設計方法。24例健康男性受試者隨機交叉單劑量空腹口服頭孢丙烯片受試制劑或參比制劑各500 mg,于給藥前和給藥后0~11 h內(nèi)不同時間點采集血樣。采用LC-MS/MS定量分析方法測定順式和反式頭孢丙烯的血藥濃度,運用Win Nonlin 6.3軟件(美國Pharsight Corporation)處理血藥濃度數(shù)據(jù)和計算藥代動力學參數(shù),對AUC0-t、AUC0-∞和Cmax經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行方差分析,采用雙向單側t檢驗與90%置信區(qū)間法評價和判斷受試制劑和參比制劑是否具有生物等效性。結果:24例男性健康受試者口服受試制劑和參比制劑500 mg后順式頭孢丙烯的主要藥代動力學參數(shù)AUC0-t分別為(28.91±3.76)μg×h/m L和(29.47±3.43)μg×h/m L,AUC0-∞分別為(29.27±3.80)μg×h/m L和(29.84±3.46)μg×h/m L,Cmax分別為(8.73±1.22)μg/m L和(9.00±1.30)μg/m L,Tmax分別為1.38(1.00~4.00)h和1.50(1.00~3.00)h,t1/2分別為(1.30±0.14)h和(1.28±0.14)h;反式頭孢丙烯的主要藥代動力學參數(shù)AUC0-t分別為(2.70±0.38)μg×h/m L和(2.83±0.36)μg×h/m L,AUC0-∞分別為(2.73±0.38)μg×h/m L和(2.86±0.37)μg×h/m L,Cmax分別為(0.906±0.143)μg/m L和(0.956±0.13)μg/m L,Tmax分別為1.50(1.00~4.00)h和1.50(1.00~3.00)h,t1/2分別為(1.05±0.19)h和(1.08±0.17)h;順式頭孢丙烯+反式頭孢丙烯的主要藥代動力學參數(shù)AUC0-t分別為(31.57±4.09)μg×h/m L和(32.29±3.72)μg×h/m L,AUC0-∞分別為(32.00±4.14)μg×h/m L和(32.69±3.79)μg×h/m L,Cmax分別為(9.64±1.36)μg/m L和(9.94±1.43)μg/m L,Tmax分別為1.38(1.00~4.00)h和1.50(1.00~3.00))h,t1/2分別為(1.28±0.12)h和(1.25±0.15)h。Cmax、AUC0-t和AUC0-∞經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行方差分析,兩種頭孢丙烯片的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞差異無顯著性(P0.05)。采用雙向單側t檢驗與90%置信區(qū)間法,24名受試者口服受試制劑和參比制劑500 mg后順式頭孢丙烯的AUC0-t、AUC0-∞90%置信區(qū)間分別為95.92%~100.03%、95.91%~99.98%。反式頭孢丙烯的AUC0-t、AUC0-∞90%置信區(qū)間分別為92.57%~98.10%、92.63%~98.09%。順式頭孢丙烯+反式頭孢丙烯AUC0-t、AUC0-∞90%置信區(qū)間分別為95.56%~99.73%、95.71%~99.81%。結論:結果表明,以順式頭孢丙烯+反式頭孢丙烯的AUC和Cmax作為生物等效性評價的主要指標,以順式頭孢丙烯、反式頭孢丙烯AUC和Cmax作為生物等效性評價的次要指標,判斷受試制劑與參比制劑具有生物等效性。
[Abstract]:Cefprozil is the second generation of semi synthetic cephalosporin antibiotics, is a mixture of CIS and trans isomers of two, ratio of cis isomer and trans isomers of about 9:1, is widely used in clinic. At present, it has been reported that using spectral method for the determination of plasma concentration of cefprozil by microorganism and high performance liquid chromatography, but there are still some limitations. Cefprozil CIS trans isomers in different optical isomers of chiral compounds, chiral conditions can be achieved in isolation. This is the first study to establish LC-MS/MS simultaneous determination of plasma CIS cefprozil, quantitative analysis method of trans cefprozil in China; has approved the listing of the original drug Cefprozil Tablets (Sino American Shanghai Squibb Pharmaceutical Co.) as a reference preparation, domestic Cefprozil Tablets (Beijing Jingfeng Pharmaceutical Co.) as the test preparation, made in China Cefprozil and original drug bioequivalence; and to investigate the pharmacokinetics of CIS trans cefprozil is stereoselective. Objective to establish a method for the determination of the first part of human blood CIS cefprozil and trans cefprozil concentration: establishment and quantitative analysis methods of LC-MS/MS trans cefprozil plasma concentrations of CIS cefprozil methods: under the condition of ice bath, using Cefalexin as internal standard, the plasma samples with acetonitrile protein precipitation method after treatment with Synergi 4U Hydro-RP 80A column (150 mm * 2 mm I.D., 4 m diameter, Phenomenex Inc.) were isolated by -0.2% methanol formic acid (25:75, v/v) as mobile phase. Using electrospray ionization (ESI) source in negative ion mode and multiple reaction monitoring (MRM), respectively, for quantitative analysis of ion reaction for m/z 388.0#174; m/z (205 CIS, trans of propylene) and m/z 346.1#174 m/z 268.1 (internal standard; 澶村姘ㄨ媱).緇撴灉:鍦ㄦ湰鐮旂┒寤虹珛鐨凩C-MS/MS鏍鋒湰嫻嬪畾鏉′歡涓，

本文編號：1693828