發(fā)布時(shí)間：2018-03-29 01:12

  本文選題：IDR-1018　切入點(diǎn)：人工合成肽　出處：《大連醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的1.測(cè)定耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的生長曲線及MRSA生物被膜生長曲線,指導(dǎo)后期實(shí)驗(yàn)中對(duì)細(xì)菌接種時(shí)間及紅霉素應(yīng)用濃度的把握。2.構(gòu)建MRSA體外生物被膜模型。3.探究不同濃度IDR-1018與紅霉素對(duì)MRSA成熟生物被膜的破壞作用以及對(duì)MRSA生物被膜形成的抑制作用。方法1.挑取單菌落于5ml TSB培養(yǎng)基中,37℃震蕩培養(yǎng)16h后,將細(xì)菌懸液按1:1000接種于TSB培養(yǎng)基中,每2h取出200μl菌懸液于595nm處測(cè)量吸光度值,得到細(xì)菌生長曲線。2.建立生物被膜模型。以聚氯乙烯(PVC)材質(zhì)的96孔板作為細(xì)菌的粘附載體,以TSB為液體培養(yǎng)基,將對(duì)數(shù)后期細(xì)菌懸液濃度調(diào)整至108CFU/ml后接種于載體上,37℃靜置培養(yǎng),以結(jié)晶紫染色法觀察生物被膜狀態(tài)。3.將IDR-1018/紅霉素工作液(1000mg/L)于96孔板中經(jīng)二倍稀釋法稀釋為一系列不同濃度梯度的藥液備用。4.細(xì)菌接種24h、48h后給予不同濃度的IDR-1018和(或)紅霉素干預(yù),繼續(xù)37℃靜置培養(yǎng),以結(jié)晶紫染色法觀察生物被膜狀態(tài),生理鹽水清洗后加入乙醇溶解,于595nm處測(cè)量吸光度值。結(jié)果1.細(xì)菌接種至液體培養(yǎng)基中后,2~4h為生長適應(yīng)期,從第4h起已開始進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期,持續(xù)16h,隨后細(xì)菌開始進(jìn)入生長穩(wěn)定期。2.PVC 96孔板經(jīng)結(jié)晶紫染色可見孔壁氣液交界處一層紫色連續(xù)性片狀生物被膜。3.細(xì)菌接種48h后給予不同濃度IDR-1018或紅霉素干預(yù),觀察到各濃度組的IDR-1018對(duì)成熟生物被膜產(chǎn)生了明顯的破壞作用;高濃度組(1g/L~250mg/L)的紅霉素可對(duì)成熟生物被膜起到破壞作用,低濃度組(250mg/L)對(duì)生物被膜的破壞作用不明顯。4.細(xì)菌接種24h后給予IDR-1018或紅霉素干預(yù),觀察到各個(gè)濃度組IDR-1018對(duì)生物被膜形成產(chǎn)生了明顯的抑制作用,高濃度分組(1g/L~250mg/L)的紅霉素可抑制未成熟生物被膜的形成,低濃度分組(250mg/L)對(duì)生物被膜的抑制作用不明顯。5.聯(lián)合應(yīng)用IDR-1018和紅霉素后,在低藥物濃度下(均為15mg/L)兩者聯(lián)合應(yīng)用即可產(chǎn)生較強(qiáng)的抑制生物被膜的作用。結(jié)論1.IDR-1018能有效破壞已經(jīng)形成的MRSA生物被膜,即使在較低濃度下仍有作用;紅霉素在高濃度時(shí)有破壞生物被膜的作用,隨著濃度降低,其效果明顯減弱。2.IDR-1018能有效抑制未成熟的MRSA生物被膜生長,即使在較低濃度下仍有作用;紅霉素在高濃度時(shí)有抑制生物被膜生長的作用,隨著濃度降低,其效果明顯減弱。3.在聯(lián)合應(yīng)用IDR-1018和紅霉素后,在較低的藥物濃度下可產(chǎn)生較強(qiáng)的對(duì)生物被膜的抑制作用。
[Abstract]:Objective 1. To determine the growth curve and MRSA biofilm growth curve of methicillin-resistant Staphylococcus aureus. In the later experiment, the time of inoculation of bacteria and the concentration of erythromycin were grasped. 2. The model of MRSA biofilm in vitro was constructed. 3. To explore the destructive effect of different concentrations of IDR-1018 and erythromycin on MRSA mature biofilm and on MRSA biofilm. Methods 1. Single colony was cultured in 5ml TSB medium at 37 鈩，

本文編號(hào)：1678881