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鼠李糖乳桿菌培養(yǎng)上清液通過(guò)抑制NF-κB通路預(yù)防大腸桿菌性腦膜炎

發(fā)布時(shí)間:2018-01-24 17:56

  本文關(guān)鍵詞: 鼠李糖乳桿菌 上清液 腦膜炎 人腦血管內(nèi)皮細(xì)胞 E.coli K NF-κB 出處:《南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的體外探討鼠李糖乳桿菌上清液(LGG-CM)能否通過(guò)抑制NF-κB通路來(lái)阻斷大腸桿菌K1(E.coli K1)株引起的細(xì)菌性腦膜炎。方法用人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HBMEC)構(gòu)建體外血腦屏障模型;采用免疫印跡研究LGG-CM能否抑制E.coli K1激活NF-κB通路;通過(guò)侵襲實(shí)驗(yàn)和中性粒細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn),研究LGG-CM能否抑制細(xì)菌侵襲和中性粒細(xì)胞遷移;通過(guò)免疫印跡研究黏附分子CD44和緊密連接蛋白ZO-1的表達(dá);免疫熒光檢測(cè)ZO-1蛋白的細(xì)胞內(nèi)分布;用Transwell建立體外血腦屏障模型,通過(guò)跨細(xì)胞內(nèi)皮電阻(TEER)值和細(xì)菌遷移實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)LGG-CM對(duì)細(xì)胞屏障完整性的保護(hù)作用。結(jié)果免疫印跡結(jié)果表明LGGCM能抑制E.coli K1激活NF-κB通路,藉此抑制E.coli K1的侵襲和中性粒細(xì)胞遷移。同時(shí),LGG-CM可抑制E.coli K1上調(diào)CD44蛋白和下調(diào)緊密連接蛋白ZO-1。此外,LGG-CM能夠明顯減緩TEER值的降低和抑制E.coli K1穿越體外血腦屏障。結(jié)論體外實(shí)驗(yàn)表明,LGG-CM能夠通過(guò)抑制NF-κB通路激活、阻斷E.coli K1侵襲和中性粒細(xì)胞遷移及維護(hù)血腦屏障完整性來(lái)預(yù)防E.coli K1引起的細(xì)菌性腦炎。
[Abstract]:Objective to investigate whether Lactobacillus rhamnoides supernatant LGG-CM) can block Escherichia coli K1 by inhibiting NF- 魏 B pathway. Methods Human brain microvascular endothelial cells (HBMECs) were used to construct the blood-brain barrier model in vitro. Western blot was used to study whether LGG-CM could inhibit the activation of NF- 魏 B pathway by E. coli K1. To study whether LGG-CM can inhibit bacterial invasion and neutrophil migration through invasion test and neutrophil migration experiment. The expression of adhesion molecule CD44 and tight junction protein ZO-1 was studied by Western blot. The intracellular distribution of ZO-1 protein was detected by immunofluorescence. The model of blood-brain barrier in vitro was established by Transwell. Transcellular endothelial resistance (TEER). Results Immunoblotting results showed that LGGCM could inhibit the activation of NF- 魏 B pathway by E. coli K1. In order to inhibit the invasion of E. coli K1 and neutrophil migration. LGG-CM could inhibit the up-regulation of CD44 protein and down-regulation of tight junction protein ZO-1.In addition, E. coli K1 was inhibited by E. coli K1. LGG-CM could significantly slow down the decrease of TEER and inhibit E.coli K1 from crossing the blood-brain barrier in vitro. LGG-CM can be activated by inhibiting NF- 魏 B pathway. To prevent bacterial encephalitis caused by E. coli K1 by blocking the invasion of E. coli K1 and neutrophil migration and maintaining the integrity of blood-brain barrier.
【作者單位】: 南方醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院//廣東省熱帶病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 微生物學(xué)系;南方醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院;南加州大學(xué)洛杉磯兒童醫(yī)院Saban研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81370740) 南方醫(yī)科大學(xué)公衛(wèi)學(xué)院院長(zhǎng)基金(GW201601)~~
【分類號(hào)】:R96
【正文快照】: 大腸桿菌E.coli K1是引起新生兒菌血癥和腦膜炎最常見(jiàn)的革蘭陰性菌[1]。最近的研究表明E.coli K1在侵襲血腦屏障并引發(fā)腦膜炎的過(guò)程中有著典型的三聯(lián)癥特征,即NF-κB信號(hào)通路激活、細(xì)菌侵襲腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞(BMEC)以及中性粒細(xì)胞遷移穿越血腦屏障[2-3]。E.coli K1引起的三聯(lián)炎

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本文編號(hào):1460638

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