本文關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)鐵蛋白-PEG-睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的制備及其生物活性評價　出處：《中國生物工程雜志》2016年04期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 蛋白偶聯(lián) 長效 轉(zhuǎn)鐵蛋白 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子 減肥

【摘要】：為了實現(xiàn)在體內(nèi)更持久的藥效作用,根據(jù)睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子CNTF第17位為游離半胱氨酸殘基,而轉(zhuǎn)鐵蛋白Tf無游離半胱氨酸的特點,采用N-羥基琥珀酰亞胺-聚乙二醇5K-馬來酰亞胺(NHS-PEG5k-MAL)作為偶聯(lián)劑,實現(xiàn)了兩者定點偶聯(lián),然后結(jié)合蛋白自身特性制定純化方法,制備獲得純度高于90%的轉(zhuǎn)鐵蛋白-聚乙二醇5k-睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(Tf-PEG5k-CNTF)耦合物。高效凝膠色譜和動態(tài)光散射分析顯示耦合物的表觀分子體積大于兩蛋白之和。細(xì)胞試驗結(jié)果顯示耦合物的活性下降至原蛋白的65.8%。大鼠藥代動力學(xué)試驗顯示Tf-PEG5k-CNTF耦合物在體內(nèi)的代謝半衰期延長至8.2小時,與CNTF原蛋白相比提高了約17倍。小鼠動物試驗顯示在每周2次的給藥頻率,每次1.0 mg/kg的劑量下,Tf-PEG5k-CNTF能更為顯著地影響小鼠對食物攝入量和減輕體重。因此,轉(zhuǎn)鐵蛋白偶聯(lián)技術(shù)可用于腦部靶向蛋白藥物的長效遞送。
[Abstract]:In order to achieve a more lasting effect in vivo, ciliary neurotrophic factor (CNTF) is the 17th free cysteine residue, while transferrin TF has no free cysteine. N- hydroxysuccinimide-polyethylene glycol 5K- Maleimide (NHS-PEG5k-MAL) was used as the coupling agent to realize the fixed-point coupling. Then, the purification method was developed by combining the characteristics of the protein. Preparation of transferrin with purity above 90%-polyethylene glycol 5k- ciliary neurotrophic factor Tf-PEG5k-CNTFs. Couplings. High performance gel chromatography and dynamic light scattering analysis showed that the apparent molecular volume of the coupling was greater than the sum of the two proteins. Cell tests showed that the coupling activity decreased to 65.8 percent of the original protein. The pharmacokinetic activity of the coupling was 65.8 percent of the original protein. Mechanical tests showed that the metabolic half-life of Tf-PEG5k-CNTF couplings in vivo was prolonged to 8.2 hours. Compared with CNTF proto protein, it was increased by about 17 times. Mice were given twice a week at a dose of 1.0 mg/kg. Tf-PEG5k-CNTF can significantly affect food intake and weight loss in mice. Therefore, transferrin coupling technique can be used for long-term delivery of brain targeted protein drugs.
【作者單位】： 四川大學(xué)華西藥學(xué)院靶向藥物及釋藥系統(tǒng)教育部重點實驗室;中國科學(xué)院過程工程研究所生化工程國家重點實驗室;北京生物制品研究所;
【基金】：教育部博士點基金(120120181110036) 國家自然科學(xué)基金(21576267)資助項目
【分類號】：R943
【正文快照】： 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子( ciliary neuronotrophic factor,CNTF) 是上世紀(jì)80 年代由Barbin等[1]從雞胚的睫狀神經(jīng)節(jié)中提取的一種多功能細(xì)胞因子。早期的研究認(rèn)為它是一種可促進(jìn)睫狀神經(jīng)元和脊髓中運(yùn)動神經(jīng)元存活的營養(yǎng)因子,但在隨后的臨床研究出乎意料地發(fā)現(xiàn)其具減輕個體體重的活性

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張焱;閉靜秀;周衛(wèi)斌;李巖;董愛華;孫娟;蘇志國;;PEG沉淀結(jié)合層析分離重組乙肝病毒表面抗原[J];過程工程學(xué)報;2006年01期

2 李慶,李輝,蔡孟深,李中軍;新型糖苷合成法-三氯乙酸酯法在合成半乳糖基氨基甘露糖PEG綴合物中的應(yīng)用[J];廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1999年S1期

3 李菁若;朱洪洲;周超;何麗紅;曹雪娟;;PEG/陶粒相變顆粒的制備及儲熱性能研究[J];新型建筑材料;2013年06期

4 李慶,李輝,蔡孟深,李中軍;PEG-乳糖苷及其二聚體的合成[J];廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1999年S1期

5 林桂萍;江秋蕓;;運(yùn)用PEG毛細(xì)管柱測定白酒中乙酸乙酯的含量[J];釀酒;2008年03期

6 丁群星,何慶芳,賽吉慶,孫允明,謝友菊,米景九;用于轉(zhuǎn)化玉米的增效載體的鑒定及PEG介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法研究[J];中國科學(xué)(B輯 化學(xué) 生命科學(xué) 地學(xué));1992年02期

7 郎樂;莊秀麗;劉亞棟;章培標(biāo);陳學(xué)思;危巖;;苯胺四聚體-PEG兩親性嵌段共聚物的合成、表征及自組裝行為[J];高等學(xué)�；瘜W(xué)學(xué)報;2011年02期

8 李慶,李輝,蔡孟深,李中軍;乙酰氨基乳糖PEG苷的合成研究[J];廈門大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);1999年S1期

9 張梅;李全明;邱發(fā)貴;靳玉偉;馬榮堂;姜振華;;聚乙二醇(PEG)/聚乙烯醇(PVA)固-固相變材料受限非等溫結(jié)晶動力學(xué)研究[J];功能材料;2007年10期

10 宋懷俊;張漢力;徐麗;劉國際;;PEG改性蜜胺樹脂熱解特性及其動力學(xué)研究[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(工學(xué)版);2011年03期

相關(guān)會議論文 前10條

1 謝惠民;張曉科;張燕春;付曉潔;;PEG誘導(dǎo)小麥幼苗株高和蛋白質(zhì)差異的初步研究[A];2003年全國作物遺傳育種學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2003年

2 田勇;杜杭根;殷利春;何民;章國軍;王承;郝必烈;;經(jīng)皮內(nèi)鏡下胃造瘺術(shù)(PEG)在神經(jīng)外科中的應(yīng)用[A];2005年浙江省神經(jīng)外科學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

3 呂冰;龔忠華;劉秀麗;陳剛;曹顯祖;梁建生;;微管骨架在玉米根尖細(xì)胞適應(yīng)PEG模擬干旱脅迫應(yīng)答中的作用[A];2005年全國植物逆境生理與分子生物學(xué)研討會論文摘要匯編[C];2005年

4 王翔;劉平;高云華;劉佳;劉宏;;含生物素化PEG長臂脂膜超聲造影劑的制備與初步評價[A];中華醫(yī)學(xué)會第十次全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

5 趙婷;王鳳山;王秀云;;蛋白質(zhì)和多肽的PEG定點修飾研究進(jìn)展[A];2007年全國生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)年會論文集[C];2007年

6 王鳳山;趙婷;袁勤生;;蛋白質(zhì)和多肽的PEG定點修飾研究進(jìn)展[A];2008年中國藥學(xué)會學(xué)術(shù)年會暨第八屆中國藥師周論文集[C];2008年

7 陳世國;謝景;李育軍;;PEG模擬干旱條件下苦瓜品種的芽期抗旱性鑒定與篩選[A];2012年中國作物學(xué)會學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2012年

8 席景會;王旭;周欣;殷建文;郝東云;;PEG分級沉淀法在擬南芥蛋白質(zhì)雙向電泳中的應(yīng)用[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第三屆學(xué)術(shù)大會論文摘要[C];2005年

9 林琳;田華雨;陳學(xué)思;;PEG改性透明質(zhì)酸增加基因載體體內(nèi)穩(wěn)定性的研究[A];2011年全國高分子學(xué)術(shù)論文報告會論文摘要集[C];2011年

10 邱玉超;李國明;韋莉萍;;PEG／MMT血脂吸附劑的合成及吸附性能研究[A];2005年全國高分子學(xué)術(shù)論文報告會論文摘要集[C];2005年

相關(guān)重要報紙文章 前6條

1 本報記者 劉興龍;成長與估值輪轉(zhuǎn) PEG修正加速[N];中國證券報;2010年

2 天弘永定價值成長基金經(jīng)理 馬志強(qiáng);用PEG策略挖掘潛在牛股[N];第一財經(jīng)日報;2008年

3 張偉霖;成長性估值新發(fā)現(xiàn)：A股PEG仍小于1[N];21世紀(jì)經(jīng)濟(jì)報道;2008年

4 蘇培科;創(chuàng)業(yè)板別被PEG給忽悠了[N];中國經(jīng)濟(jì)時報;2009年

5 東航金融注冊金融分析師 姜山;PEG不能成為新股高估值理由[N];證券時報;2009年

6 本報記者 劉興龍;PEG溝壑未平 估值修復(fù)或延續(xù)[N];中國證券報;2010年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 王靜潔;膠原模擬多肽-PEG雜化水凝膠的構(gòu)建及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

2 歐陽輝;改性PEG水凝膠—去細(xì)胞生物復(fù)合支架材料構(gòu)建組織工程心臟瓣膜的實驗研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

3 孫建國;PEG水凝膠的金微圖案化修飾及其表面細(xì)胞黏附行為的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

4 梁軍;聚乙二醇（PEG）作為綠色反應(yīng)介質(zhì)的若干有機(jī)反應(yīng)研究[D];浙江大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 毛小曼;新型自組裝阿霉素納米前藥PEG_(2k)-DOX的制備及其克服腫瘤耐藥性的研究[D];浙江大學(xué);2014年

2 韓小路;PEG介導(dǎo)的蘋果果生刺盤孢Colletotrichum fructicola原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化體系的研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

3 張曉媛;PE-b-PEG嵌段共聚物及PEG基水凝膠的受限結(jié)晶行為研究[D];北京化工大學(xué);2013年

4 胡國霞;PEG預(yù)處理對水分脅迫下水稻抗氧化系統(tǒng)的影響[D];沈陽師范大學(xué);2011年

5 魏霖;RGD肽與可剪切PEG共修飾脂質(zhì)體的構(gòu)建及體外抗腫瘤作用評價[D];蘇州大學(xué);2013年

6 潘興;PEG預(yù)處理對鹽脅迫下水稻幼苗生理特性的影響[D];沈陽師范大學(xué);2012年

7 劉艷玲;添加PEG對綿羊檸條日糧采食量、消化率及瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

8 孫學(xué)榮;干濕處理及PEG滲透調(diào)節(jié)對油松種子活力的影響[D];南京林業(yè)大學(xué);2005年

9 張林;PEG水凝膠接枝活性肽及其表面細(xì)胞粘附和抗菌性的研究[D];河南大學(xué);2012年

10 趙朋;關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)用殼聚糖-PEG水凝膠的制備及其性能研究[D];武漢理工大學(xué);2010年

，

本文編號：1364566