本文關(guān)鍵詞：不同特性PLGA納米內(nèi)耳給藥系統(tǒng)的設(shè)計(jì)與評(píng)價(jià)　出處：《廣東藥科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 內(nèi)耳給藥 PLGA納米粒 不同特性 穿膜肽 熒光成像

【摘要】：典型的內(nèi)耳疾病涉及到整個(gè)膜迷路,其表現(xiàn)為引起感覺(jué)神經(jīng)性耳聾、耳鳴和眩暈,嚴(yán)重影響人體聽(tīng)覺(jué)與平衡。臨床上常采用鼓室(IT)給藥來(lái)治療內(nèi)耳疾病,藥物主要通過(guò)圓窗膜(RWM)滲透進(jìn)入內(nèi)耳。RWM的通透性受到物質(zhì)的大小、表面性質(zhì)、促滲劑等因素的影響。聚乳酸羥基乙酸(PLGA)納米粒(NPs)作為藥物載體及穿膜肽作為促滲劑,均能夠促進(jìn)藥物通過(guò)RWM。因此,本研究設(shè)計(jì)制備具有不同特性PLGA-NPs,包括不同粒徑與不同表面性質(zhì),并將NPs混合穿膜肽,采用近紅外成像系統(tǒng)對(duì)NPs進(jìn)入耳蝸的程度進(jìn)行評(píng)價(jià),期望構(gòu)建一個(gè)更為有效的納米內(nèi)耳藥物遞送系統(tǒng)。采用單乳化溶劑揮發(fā)法制備香豆素-6 PLGA-NPs,單因素考察其制備工藝,發(fā)現(xiàn)PVA濃度、水油比和超聲時(shí)間對(duì)粒徑影響較大,PLGA分子量、濃度和超聲功率影響較小。通過(guò)改變制備工藝中的有機(jī)相、PVA濃度、水油比和超聲時(shí)間及功率,制備出不同粒徑的PLGA-NPs,平均粒徑分別為小于100 nm(79.9 nm)、100-200 nm(157.5nm)、200-400 nm(302.7 nm),對(duì)應(yīng)的多分散系數(shù)(PDI)分別為0.158、0.117和0.198,Zeta電位分別為-14.74、-13.32和-7.41 mV。以?xún)龈珊驨Ps外觀(guān)、復(fù)溶性、粒徑及PDI為指標(biāo),考察NPs凍干儲(chǔ)存的穩(wěn)定性。結(jié)果表明,加入2%的甘露醇作為NPs的凍干保護(hù)劑最為合適。不同粒徑范圍的NPs加入2%的甘露醇凍干后于常溫下儲(chǔ)存1周、3周和2個(gè)月,NPs復(fù)溶后的粒徑及粒徑分布趨勢(shì)與凍干前基本一致,提示在該條件下NPs凍干儲(chǔ)存,其穩(wěn)定性可達(dá)2個(gè)月。利用帶正電荷的殼聚糖(CS)能夠靜電吸附在帶負(fù)電荷的PLGA-NPs表面上,制成CS修飾的PLGA-NPs。紅外光譜和X射線(xiàn)光電子能譜測(cè)定結(jié)果表明CS修飾PLGA NPs表面CS氨基的存在,提示CS成功修飾在NPs的表面。X射線(xiàn)衍射分析說(shuō)明CS吸附在NPs的表面時(shí),CS的晶型發(fā)生了改變,變成了無(wú)定形狀態(tài)。制備了不同粒徑CS-PLGA-NPs,平均粒徑分別為100-200 nm(173.9 nm)、200-400 nm(276.5和313.7nm),對(duì)應(yīng)的pdi分別為0.292、0.262和0.204,zeta電位分別為18.47、10.70和1.37mv;采用茚三酮試驗(yàn)法測(cè)定表面cs的吸附量分別為0.047±0.007、0.110±0.072和0.106±0.012mg·mg-1(n=3)。利用泊洛沙姆407(p407)疏水端的聚環(huán)氧丙烯通過(guò)疏水作用力與疏水的plga-nps結(jié)合,將p407修飾在nps上。制備了不同粒徑的p407-plga-nps,平均粒徑分別是小于100nm(77.2nm)、100-200nm(177.4nm)和200-400nm(296.9nm),對(duì)應(yīng)的pdi分別為0.131、0.127和0.174,zeta電位分別為-7.33、-15.90和-3.08mv;利用p407中聚氧乙烯片段與硫氰酸鈷試劑形成有色復(fù)合物來(lái)測(cè)定nps上p407的吸附量,分別為34.10±4.78、32.47±2.67和28.71±1.10μg·mg-1(n=3)。采用mpeg-plga聚合物制備了不同粒徑的mpeg修飾的plga-nps,平均粒徑分別為小于100nm(67.0nm)、100-200nm(142.8nm)和200-400nm(211.9nm),對(duì)應(yīng)的pdi分別為0.169、0.162和0.243,zeta電位分別為-10.79、-12.36和-7.58mv。采用冷凍超速離心法測(cè)得所制得的nps的包封率,均在80%以上,磷鎢酸負(fù)染法透射電鏡下觀(guān)察,nps形狀圓整,分布均勻,無(wú)粘連。采用熒光成像系統(tǒng)評(píng)價(jià)不同特性的plga-nps透過(guò)rwm進(jìn)入耳蝸的體內(nèi)行為。與包載香豆素-6nps相比,應(yīng)用載近紅外熒光探針dir的nps經(jīng)it給藥考察離體耳蝸,背景干擾較少。豚鼠分別it給藥和靜脈(iv)給藥dir-nps,在體成像發(fā)現(xiàn)iv給藥后,nps主要積聚在肝部位;離體組織成像發(fā)現(xiàn)it給藥后,nps主要聚集在耳蝸處。說(shuō)明,it給藥相比iv給藥,能使nps在耳蝸處達(dá)較高濃度,避免被肝脾清除。不同粒徑的dir-nps經(jīng)it給藥0.5h后,300nmnps在耳蝸的熒光強(qiáng)度顯著高于80nm(p0.05),而與150nmnps相差不大;it給藥24h后,80nm的nps在耳蝸的熒光強(qiáng)度更高。不同修飾的dir-nps在it給藥0.5h后,cs-plga-nps在耳蝸的熒光強(qiáng)度顯著高于未修飾、p407-和mpeg-plga-nps(p0.001);it給藥24h后,p407-plga-nps在耳蝸的熒光強(qiáng)度高于其他nps(p0.001)。提示不同粒徑、修飾的plga-nps透過(guò)rwm進(jìn)入耳蝸的速度和程度不同。而且,進(jìn)一步應(yīng)用熒光成像系統(tǒng)考察不同穿膜肽(tat、penetratin、lmwp和r8)對(duì)plga-nps透膜進(jìn)入耳蝸的作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)穿膜肽能促進(jìn)nps進(jìn)入到耳蝸,且lmwp的作用最強(qiáng)(p0.05)。lmwp分別混合不同nps(plga-nps與p407-plga-nps)it給藥0.5h后,p407-plga-nps和混合lmwp的nps在耳蝸的熒光強(qiáng)度高于plga-nps(p0.05),且混合lmwp的p407-plga-nps的熒光強(qiáng)度最高,說(shuō)明P407-PLGA-NPs跨RWM的能力更強(qiáng),且LMWP能夠進(jìn)一步增強(qiáng)這種能力。綜上所述,通過(guò)改變制備條件可以制備出不同粒徑的NPs,利用PLGA-NPs表面的電荷和表面的疏水性可以分別制備出CS和P407修飾的NPs。研究結(jié)果表明,NPs通過(guò)粒徑和表面性質(zhì)的改變可以提高其進(jìn)入耳蝸的量,通過(guò)混合穿膜肽能夠進(jìn)一步增強(qiáng)這種效果,這為構(gòu)建更為有效的納米內(nèi)耳給藥系統(tǒng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：廣東藥科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R943

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王志清;劉衛(wèi);徐輝碧;楊祥良;;載三氧化二砷的PEG-PLGA隱性納米粒的制備及體外研究(英文)[J];Chinese Journal of Chemical Engineering;2007年06期

2 ;Effect of Excipients on Stability and Structure of rhCuZn-SOD Encapsulated in PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2004年03期

3 郭曉東;;Surface Modification of Biomimetic PLGA-(ASP-PEG) Matrix with RGD-Containing Peptide:a New Non-Viral Vector for Gene Transfer and Tissue Engineering[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2006年03期

4 陳劍;樊新;周忠誠(chéng);阮建明;;PLGA材料仿生改性的最新進(jìn)展[J];粉末冶金材料科學(xué)與工程;2008年06期

5 ;Preparation and mineralization of PLGA/Gt electrospun fiber mats[J];Chinese Science Bulletin;2009年08期

6 李雙燕;;PLGA組織工程支架材料的研究與展望[J];國(guó)外絲綢;2009年02期

7 郝杰;鄭啟新;;Biomineralization of the Surface of PLGA-(ASP-PEG) Modified with the K_(16) and RGD-containing Peptide[J];Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science Edition);2009年05期

8 ;Preparation of Tolterodine Metabolite Loaded Biodegradable PLGA Microspheres[J];Chemical Research in Chinese Universities;2010年01期

9 ;Comparison of BSA Release Behavior from Electrospun PLGA and PLGA/Chitosan Membranes[J];Chemical Research in Chinese Universities;2011年04期

10 Y.H.Wu;N.Li;Y.Cheng;Y.F.Zheng;Y.Han;;In vitro Study on Biodegradable AZ31 Magnesium Alloy Fibers Reinforced PLGA Composite[J];Journal of Materials Science & Technology;2013年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鄭強(qiáng);潘志軍;薛德挺;李杭;李建兵;;納米PLGA/HA復(fù)合物和骨髓基質(zhì)干細(xì)胞在軟骨修復(fù)中的應(yīng)用[A];2009年浙江省骨科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

2 王漢杰;蘇文雅;廖振宇;王生;常津;;PLGA/Liposome核殼納米粒子的制備[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

3 王光林;吳輝;;聯(lián)合靜電紡絲法和轉(zhuǎn)筒接收法制備PLGA—膠原—絲素納米神經(jīng)導(dǎo)管[A];第六屆西部骨科論壇暨貴州省骨科年會(huì)論文匯編[C];2010年

4 趙潔;全大萍;廖凱榮;伍青;;含不同側(cè)氨基密度的ASP-PEG-PLGA的合成與表征[A];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第六次會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2004年

5 黃艷霞;任天斌;張麗紅;呂凱歌;蔣欣泉;潘可風(fēng);任杰;;PLGA/NHA-RGD復(fù)合材料的制備及性能研究[A];2006年上海市醫(yī)用生物材料研討會(huì)論文匯編[C];2006年

6 ;Synthesis of PLGA Labeled with ~(125)I[A];2006年上海市醫(yī)用生物材料研討會(huì)論文匯編[C];2006年

7 李艷輝;崔媛;張慧敏;關(guān)秀文;;利用等離子體技術(shù)在PLGA表面固定膠原的研究[A];2011年全國(guó)高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集[C];2011年

8 何樹(shù);畢龍;劉建;扈剛;孟國(guó)林;董鑫;郝賦;趙軼男;;新型PLGA/HMS-HA復(fù)合微球載體支架對(duì)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

9 ;Preparation of PLGA Ultrasound Microbubble Loaded Hematoporphyrin and optimization of formulation[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十次全國(guó)超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

10 李志宏;武繼民;汪鵬飛;陳學(xué)忠;黃姝杰;關(guān)靜;張西正;;BMP/PLGA緩釋微球的制備與體外釋放性能[A];第七屆中國(guó)功能材料及其應(yīng)用學(xué)術(shù)會(huì)議論文集（第4分冊(cè)）[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 記者　白毅;合成溫敏型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

2 尹東鋒 鐘延強(qiáng);聚合物 藥物 制備工藝 附加劑[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

3 李博;“人造紅細(xì)胞”[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李玉華;載阿倫磷酸鈉PLGA微球的磷酸鈣骨水泥復(fù)合組織工程骨修復(fù)兔股骨髁骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

2 周璇;RGD靶向微泡與載藥微球在肝臟創(chuàng)傷滲血診斷和治療中的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

3 陶春;可注射鑲嵌載生長(zhǎng)因子殼聚糖微球的PLGA多孔復(fù)合微球支架的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

4 封水彬;生物降解型緩釋微球的制備、性能及其應(yīng)用研究[D];華中科技大學(xué);2015年

5 鮑文;靶向納米載藥系統(tǒng)DNR-PLGA-PLL-PEG-Tf治療惡性血液病的體內(nèi)、體外研究[D];東南大學(xué);2015年

6 王晨暉;裝載蛋白藥物的PCADK/PLGA混合微球研究及在重組人生長(zhǎng)激素中的應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2016年

7 盧明子;載血紅蛋白PEG-PLGA納米粒子的構(gòu)建、生物學(xué)作用及其靶向性能的研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2016年

8 張皓軒;載辛伐他汀PLGA微球/磷酸鈣組織工程骨的生物相容性和成骨活性的研究[D];山東大學(xué);2016年

9 李青;新型高效靶向ROS響應(yīng)的載藥納米粒子系統(tǒng)在口腔鱗癌治療中的研究[D];山東大學(xué);2016年

10 齊峰;粒徑均一的PLGA顆粒制備及在長(zhǎng)效緩釋體系和Pickering乳液中的應(yīng)用[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院(過(guò)程工程研究所);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陽(yáng)剛;復(fù)合肌腱修復(fù)材料—載細(xì)胞用防粘連性隔離/支架型PLGA膜的體外研制[D];中南大學(xué);2010年

2 唐冠男;微流控技術(shù)原位合成多形貌PLGA/TiO_2復(fù)粒子及其體外藥物釋放的研究[D];華南理工大學(xué);2015年

3 李文秀;形貌可控的PLGA/PCL復(fù)合粒子的制備及體外降解性能的基礎(chǔ)研究[D];華南理工大學(xué);2015年

4 黃卓穎;重組人表皮生長(zhǎng)因子PLGA納米粒經(jīng)皮治療大鼠糖尿病潰瘍的作用研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 聞繼杰;含胺基修飾beta-環(huán)糊精的可降解兩親性聚酯的合成及其對(duì)蛋白質(zhì)和抗癌藥物的控制釋放[D];天津理工大學(xué);2015年

6 王翠偉;基于點(diǎn)擊化學(xué)制備PCL/PEG兩親性共網(wǎng)絡(luò)聚合物以及不同支臂PLGA作為疫苗載體的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

7 王共喜;PLA/AT納米復(fù)合材料的制備與性能及PLGA纖維的表面改性[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

8 劉青;植入體材料與PLGA載藥微球的復(fù)合研究[D];西南交通大學(xué);2015年

9 張科技;蠶絲-PLGA支架的生物相容性及力學(xué)性能的研究[D];浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2015年

10 黃曉君;關(guān)節(jié)腔注射用青藤堿-PLGA微球—溫敏凝膠的制備及評(píng)價(jià)[D];廣東藥學(xué)院;2015年

，

本文編號(hào)：1336346