本文關(guān)鍵詞：對乙酰氨基酚對大鼠原代肝細(xì)胞及BRL-3A細(xì)胞的毒性作用比較　出處：《藥物評價研究》2016年03期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 大鼠原代肝細(xì)胞 原代培養(yǎng) BRL-A細(xì)胞 對乙酰氨基酚 肝毒性

【摘要】：目的建立大鼠原代肝細(xì)胞提取鑒定體系,比較對乙酰氨基酚(APAP)對大鼠原代肝細(xì)胞和永生化細(xì)胞BRL-3A的毒性作用。方法采用膠原酶原位兩步灌流法提取大鼠原代肝細(xì)胞,通過過碘酸雪夫染色(PAS)和肝細(xì)胞雙核結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定;CCK 8法測定APAP對大鼠原代肝細(xì)胞及BRL-3A細(xì)胞毒性作用的IC50;光學(xué)顯微鏡透射電鏡觀察APAP對2種細(xì)胞的損傷情況;全自動生化分析儀測定細(xì)胞上清AST、ALT、LDH、ALP、ALB、BUN、TP、GLU 8項生化指標(biāo)的變化。結(jié)果PAS糖原染色鑒定獲取的大鼠原代肝細(xì)胞,雙核結(jié)構(gòu),細(xì)胞存活率浮動在80%~95%;最佳接種密度為60 000/cm2,在第3~5天為對數(shù)生長期;APAP作用于大鼠原代肝細(xì)胞24 h的IC50為18.03 mmol/L,95%置信區(qū)間為(17.28~18.81)mmol/L,作用于BRL-3A的IC_(50)為20.05 mmol/L,95%置信區(qū)間為(18.99~21.17)mmol/L;透射電鏡結(jié)果顯示,在30 mmol/L APAP作用下,2種細(xì)胞細(xì)胞器腫脹,核膜破裂,細(xì)胞膜邊界模糊不清;與對照組比較,大鼠原代肝細(xì)胞分泌的天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿素氮(BUN)、葡萄糖(GLU)、堿性磷酸酶(ALP)、乳酸脫氫酶(LDH)隨著APAP濃度增加產(chǎn)生顯著變化,而BRL-3A細(xì)胞幾乎所有的酶學(xué)指標(biāo)變化均差異不顯著。結(jié)論與永生化細(xì)胞BRL-3A比較,大鼠原代肝細(xì)胞更能體現(xiàn)藥物的肝臟毒性作用,但其體外培養(yǎng)存活時間較短;BRL-3A細(xì)胞缺少肝臟重要酶類,增加細(xì)胞內(nèi)肝臟酶類是提升其作為肝臟毒性篩選模型的更好手段之一。
【作者單位】： 廣東藥科大學(xué)藥科學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所抗毒藥物與毒理學(xué)國家重點實驗室國家北京藥物安全評價研究中心;
【基金】：重大新藥創(chuàng)制科技重大專項(2013ZX09302303,2012ZX09301-001-008) 北京市科委基金項目(Z131100006513010)
【分類號】：R961
【正文快照】： 2.軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所,抗毒藥物與毒理學(xué)國家重點實驗室,國家北京藥物安全評價研究中心,北京100850藥物肝毒性是新藥開發(fā)過程中臨床實驗階段失敗的主要原因,也是藥物上市后撤回的原因之一[1]。據(jù)統(tǒng)計約有三分之二的進(jìn)入臨床實驗的藥物因其肝毒性而不得不終止開發(fā),其

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 田麗;尹玲;關(guān)莉莉;戴寧;;紅景天苷對原代培養(yǎng)脂肪變性大鼠肝細(xì)胞細(xì)胞色素P4502E1蛋白表達(dá)的抑制作用[J];實用肝臟病雜志;2015年03期

2 孔慶喜;羅曼;趙煜;陽華;;臨床生化指標(biāo)在新藥臨床前研究中的毒理學(xué)意義[J];藥物評價研究;2014年05期

3 王雁;湯納平;富欣;殷承勝;季龍鳳;楊琛懋;黃歡夏;馬t，

本文編號：1321590